위령선 추출물이 human neuroblastoma 세포주에서 CoCl2에 의해 유도된 세포사멸에 미치는 보호효과 Protective effect of Clematidis Radix extract on CoCl2-induced apoptosis in human neuroblastoma cells원문보기
연구배경: 위령선(Clematidis Radix)은 신경통, 근육통, 편두통, 관절통과 부종의 치료제로 사용되어 왔다. 저산소증 상태는 뇌졸중, 허혈성 심장질환, 종양의 진행 및 치료에 영향을 미치는 중요한 기전으로 알려져 있다. 본 연구에서는 ...
연구배경: 위령선(Clematidis Radix)은 신경통, 근육통, 편두통, 관절통과 부종의 치료제로 사용되어 왔다. 저산소증 상태는 뇌졸중, 허혈성 심장질환, 종양의 진행 및 치료에 영향을 미치는 중요한 기전으로 알려져 있다. 본 연구에서는 위령선 추출물의 처치가 CoCl2(cobalt chloride)에 의해 유발된 저산소성 in vitro 인간 신경아세포종 SH-SY5Y 모델에서 HIF-1α와 세포사멸에 어떠한 영향을 미치는지를 실험하였다. 연구방법: 본 연구에서는 위령선 추출물의 처치가 CoCl2에 의해 유도된 인간 신경아세포종 SH-SY5Y의 세포 생존율에 미치는 영향을 알아보기 위해 MTT assay를 사용하였으며, 세포사의 형태학적 변화의 관찰은 DAPI staining, TUNEL assay를 사용하였다. 그리고 DNA 분절화와 HIF-1α, Bax, Bcl-2, cytochrome c, Caspase-3의 변화를 측정하기 위하여 DNA fragmentation assay and Western blotting을 사용하였다. 결과: MTT 분석을 실시한 결과 CoCl2 농도에 의존적으로 세포 생존율의 감소가 나타났고, 위령선 추출물 처치에 의해 세포 생존율의 감소가 농도 의존적으로 억제되는 것으로 나타났다. DAPI 염색, TUNEL 염색, PI 염색을 실시한 결과 CoCl2 처치에 의해 세포사의 형태학적 변화가 나타났고, 위령선 처치에 의해 세포사멸의 형태학적 특징이 감소되었다. CoCl2에 의해 나타난 DNA 분절은 위령선 추출물 처치에 의해 분절화가 억제되었으며, CoCl2에 의해 발현이 증가된 HIF-1α, Bax, cytochrome c는 위령선 추출물 처치에 의해 농도 의존적으로 발현의 증가가 억제되었다. Bcl-2 발현은 CoCl2 처치에 의해 감소하였으며, 위령선 추출물 처치에 의해 감소가 억제되었고, Caspase-3 활성은 CoCl2 처치에 의해 증가하였으며, 위령선 추출물 처치에 의해 증가가 억제되었다. 결론: 위령선 추출물의 처치로 인해 저산소증의 상태를 나타내는 특징들이 감소되었고, 세포사멸의 형태학적 변화가 개선되었다. 이는 위령선 추출물이 저산소증의 상태 개선과 저산소증으로 인해 나타날 수 있는 세포사멸 억제에 도움을 준다는 것을 알 수 있다.
연구배경: 위령선(Clematidis Radix)은 신경통, 근육통, 편두통, 관절통과 부종의 치료제로 사용되어 왔다. 저산소증 상태는 뇌졸중, 허혈성 심장질환, 종양의 진행 및 치료에 영향을 미치는 중요한 기전으로 알려져 있다. 본 연구에서는 위령선 추출물의 처치가 CoCl2(cobalt chloride)에 의해 유발된 저산소성 in vitro 인간 신경아세포종 SH-SY5Y 모델에서 HIF-1α와 세포사멸에 어떠한 영향을 미치는지를 실험하였다. 연구방법: 본 연구에서는 위령선 추출물의 처치가 CoCl2에 의해 유도된 인간 신경아세포종 SH-SY5Y의 세포 생존율에 미치는 영향을 알아보기 위해 MTT assay를 사용하였으며, 세포사의 형태학적 변화의 관찰은 DAPI staining, TUNEL assay를 사용하였다. 그리고 DNA 분절화와 HIF-1α, Bax, Bcl-2, cytochrome c, Caspase-3의 변화를 측정하기 위하여 DNA fragmentation assay and Western blotting을 사용하였다. 결과: MTT 분석을 실시한 결과 CoCl2 농도에 의존적으로 세포 생존율의 감소가 나타났고, 위령선 추출물 처치에 의해 세포 생존율의 감소가 농도 의존적으로 억제되는 것으로 나타났다. DAPI 염색, TUNEL 염색, PI 염색을 실시한 결과 CoCl2 처치에 의해 세포사의 형태학적 변화가 나타났고, 위령선 처치에 의해 세포사멸의 형태학적 특징이 감소되었다. CoCl2에 의해 나타난 DNA 분절은 위령선 추출물 처치에 의해 분절화가 억제되었으며, CoCl2에 의해 발현이 증가된 HIF-1α, Bax, cytochrome c는 위령선 추출물 처치에 의해 농도 의존적으로 발현의 증가가 억제되었다. Bcl-2 발현은 CoCl2 처치에 의해 감소하였으며, 위령선 추출물 처치에 의해 감소가 억제되었고, Caspase-3 활성은 CoCl2 처치에 의해 증가하였으며, 위령선 추출물 처치에 의해 증가가 억제되었다. 결론: 위령선 추출물의 처치로 인해 저산소증의 상태를 나타내는 특징들이 감소되었고, 세포사멸의 형태학적 변화가 개선되었다. 이는 위령선 추출물이 저산소증의 상태 개선과 저산소증으로 인해 나타날 수 있는 세포사멸 억제에 도움을 준다는 것을 알 수 있다.
Object: Clematidis Radixis has commonly used in traditional medicine to alleviate neuralgia, myalgia, migraine, joint pain, and for the relief of swelling. Hypoxia condition is an important mechanism for stroke, ischemic heart disease, and tumor progression. The purpose of this study was to evaluate...
Object: Clematidis Radixis has commonly used in traditional medicine to alleviate neuralgia, myalgia, migraine, joint pain, and for the relief of swelling. Hypoxia condition is an important mechanism for stroke, ischemic heart disease, and tumor progression. The purpose of this study was to evaluate the effects of Clematidis Radix extract on CoCl2-induced apoptosis in SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Methods: In order to investigate the protective effect of Clematidis Radix on CoCl2-induced cytotoxicity in neuronal cells, MTT(3-(4,5-dimethylthiazol -2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay, DAPI(4,6-diamidino-2- phenylindoleI) staining, TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase- mediated dUTP nick end-labeling) assay, DNA fragmentation assay, and western blotting were performed on SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Results: Cells treated with CoCl2 exhibited several apoptotic features, while cells pre-treated with Clematidis Radix prior to CoCl2 exposure showed a decrease in the occurrence of apoptotic features. CoCl2 increased HIF-1α expression, in contrast, Clematidis Radix treatment decreased CoCl2-induced HIF-1α expression. Pre-treatment with the extract of Clematidis Radix suppressed Bax, cyochrome c, and caspase-3 expressions, and also increased Bcl-2 expression in SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Conclusion: These results suggest that Clematidis Radix may exert a protective effect on CoCl2-induced apoptosis in SH-SY5Y human neuroblastoma cells.
Object: Clematidis Radixis has commonly used in traditional medicine to alleviate neuralgia, myalgia, migraine, joint pain, and for the relief of swelling. Hypoxia condition is an important mechanism for stroke, ischemic heart disease, and tumor progression. The purpose of this study was to evaluate the effects of Clematidis Radix extract on CoCl2-induced apoptosis in SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Methods: In order to investigate the protective effect of Clematidis Radix on CoCl2-induced cytotoxicity in neuronal cells, MTT(3-(4,5-dimethylthiazol -2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay, DAPI(4,6-diamidino-2- phenylindoleI) staining, TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase- mediated dUTP nick end-labeling) assay, DNA fragmentation assay, and western blotting were performed on SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Results: Cells treated with CoCl2 exhibited several apoptotic features, while cells pre-treated with Clematidis Radix prior to CoCl2 exposure showed a decrease in the occurrence of apoptotic features. CoCl2 increased HIF-1α expression, in contrast, Clematidis Radix treatment decreased CoCl2-induced HIF-1α expression. Pre-treatment with the extract of Clematidis Radix suppressed Bax, cyochrome c, and caspase-3 expressions, and also increased Bcl-2 expression in SH-SY5Y human neuroblastoma cells. Conclusion: These results suggest that Clematidis Radix may exert a protective effect on CoCl2-induced apoptosis in SH-SY5Y human neuroblastoma cells.
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