본 실험은 닥나무(Broussonetia kazinoki)의 기내배양을 통한 부정근의 대량 증식 방법을 확립하고, 닥나무 부정근과 노지에서 재배한 닥나무의 잎, 수피, 근피 메탄올 추출물의 생리활성 비교를 통해 부정근으로부터 유용물질 생산 가능성을 조사하기 위해 실시하였다.
닥나무 가지를 4% HgCl2에 5분간 침지하여 표면살균 후 측아로부터 기내묘를 유도하였다. 닥나무 부정근은 NAA가 1.0 mg/L로 함유된 배지에서 잎 절편으로부터 유도되었으며, 0.5 mg/L IBA를 첨가한 배지에서 가장 높은 성장률을 나타내었다. 또한 최적의 액체배양조건을 확인하고자 PGRs 농도, pH, ...
본 실험은 닥나무(Broussonetia kazinoki)의 기내배양을 통한 부정근의 대량 증식 방법을 확립하고, 닥나무 부정근과 노지에서 재배한 닥나무의 잎, 수피, 근피 메탄올 추출물의 생리활성 비교를 통해 부정근으로부터 유용물질 생산 가능성을 조사하기 위해 실시하였다.
닥나무 가지를 4% HgCl2에 5분간 침지하여 표면살균 후 측아로부터 기내묘를 유도하였다. 닥나무 부정근은 NAA가 1.0 mg/L로 함유된 배지에서 잎 절편으로부터 유도되었으며, 0.5 mg/L IBA를 첨가한 배지에서 가장 높은 성장률을 나타내었다. 또한 최적의 액체배양조건을 확인하고자 PGRs 농도, pH, sucrose 농도 그리고 접종량을 조사하였다. 닥나무 부정근의 최적 액체 배양 조건은 0.5 mg/L IBA를 첨가한 MS 배지였으며 pH는 5.2, sucrose 농도는 30 mg/L로 확인되었다.
닥나무 부정근 및 노지에서 재배한 잎, 수피, 근피의 생리활성을 비교하기 위하여 메탄올 추출물의 항산화, 항균, 항염 활성을 조사하였다. 총 페놀과 플라보노이드 함량을 측정한 결과 페놀 함량은 부정근에서 85.0 mg GAE/g으로 추출물 중 가장 높은 함량을 나타내었으며, 플라보노이드 함량은 45.1 mg QE/g으로 잎에서 가장 높은 함량을 나타내었다. 항산화 활성은 DPPH 및 ABTS free radical 소거능에서는 부정근 추출물의 RC50이 각각 51.7 μg/mL, 54.4 μg/mL로 가장 높은 활성을 나타내었으며, 수피 추출물이 낮은 활성을 나타내었다. RAW 264.7 cell을 이용하여 nitric oxide의 억제활성을 측정한 결과, 모든 추출물에서 농도 의존적으로 nitric oxide 생성을 억제하는 것으로 나타났다. 특히 nitric oxide의 분비는 잎 추출물과 부정근 추출물을 처리하였을 때 현저히 감소하는 결과를 보였다. 디스크 확산법을 이용하여 항균활성을 측정한 결과, 부정근 추출물에서는 항균 활성이 나타나지 않았으며, 수피와 근피 추출물에서 그람 양성균인 S. aureus와 S. epidermidis에 대한 항균 활성을 확인할 수 있었다. 미백 활성 실험에서 기질을 각각 L-tyrosine과 L-DOPA로 하였을 때 모든 추출물이 tyrosinase 활성을 억제하는 효과가 있었으며 기내에서 배양한 닥나무 부정근 또한 높은 tyrosinase 억제 활성을 나타냈다.
이러한 결과로 볼 때, 생물 반응기를 이용한 닥나무 부정근의 배양이 항산화, 항염 및 미백효과가 있는 원료를 안정적으로 대량 생산하는 원천기술로 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.
본 실험은 닥나무(Broussonetia kazinoki)의 기내배양을 통한 부정근의 대량 증식 방법을 확립하고, 닥나무 부정근과 노지에서 재배한 닥나무의 잎, 수피, 근피 메탄올 추출물의 생리활성 비교를 통해 부정근으로부터 유용물질 생산 가능성을 조사하기 위해 실시하였다.
닥나무 가지를 4% HgCl2에 5분간 침지하여 표면살균 후 측아로부터 기내묘를 유도하였다. 닥나무 부정근은 NAA가 1.0 mg/L로 함유된 배지에서 잎 절편으로부터 유도되었으며, 0.5 mg/L IBA를 첨가한 배지에서 가장 높은 성장률을 나타내었다. 또한 최적의 액체배양조건을 확인하고자 PGRs 농도, pH, sucrose 농도 그리고 접종량을 조사하였다. 닥나무 부정근의 최적 액체 배양 조건은 0.5 mg/L IBA를 첨가한 MS 배지였으며 pH는 5.2, sucrose 농도는 30 mg/L로 확인되었다.
닥나무 부정근 및 노지에서 재배한 잎, 수피, 근피의 생리활성을 비교하기 위하여 메탄올 추출물의 항산화, 항균, 항염 활성을 조사하였다. 총 페놀과 플라보노이드 함량을 측정한 결과 페놀 함량은 부정근에서 85.0 mg GAE/g으로 추출물 중 가장 높은 함량을 나타내었으며, 플라보노이드 함량은 45.1 mg QE/g으로 잎에서 가장 높은 함량을 나타내었다. 항산화 활성은 DPPH 및 ABTS free radical 소거능에서는 부정근 추출물의 RC50이 각각 51.7 μg/mL, 54.4 μg/mL로 가장 높은 활성을 나타내었으며, 수피 추출물이 낮은 활성을 나타내었다. RAW 264.7 cell을 이용하여 nitric oxide의 억제활성을 측정한 결과, 모든 추출물에서 농도 의존적으로 nitric oxide 생성을 억제하는 것으로 나타났다. 특히 nitric oxide의 분비는 잎 추출물과 부정근 추출물을 처리하였을 때 현저히 감소하는 결과를 보였다. 디스크 확산법을 이용하여 항균활성을 측정한 결과, 부정근 추출물에서는 항균 활성이 나타나지 않았으며, 수피와 근피 추출물에서 그람 양성균인 S. aureus와 S. epidermidis에 대한 항균 활성을 확인할 수 있었다. 미백 활성 실험에서 기질을 각각 L-tyrosine과 L-DOPA로 하였을 때 모든 추출물이 tyrosinase 활성을 억제하는 효과가 있었으며 기내에서 배양한 닥나무 부정근 또한 높은 tyrosinase 억제 활성을 나타냈다.
이러한 결과로 볼 때, 생물 반응기를 이용한 닥나무 부정근의 배양이 항산화, 항염 및 미백효과가 있는 원료를 안정적으로 대량 생산하는 원천기술로 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.
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