Phytosphingosine-1-phosphate와Epidermal Growth Factor가 피부의 주름, 탄력 개선에 미치는 상승효과 Effects of Phytosphingosine-1-phosphate and Epidermal Growth Factor on Skin Wrinkles and Elasticity Improvement원문보기
최근 사회적으로 외모를 중시하는 경향과 동안 열풍으로 노화방지용 화장품 성분 개발에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 특히 노화 개선 화장품 성분으로 많이 사용되고 있는 EGF는 그 효능이 매우 우수하지만 고가라는 단점이 있다. 따라서 화장품 원료 산업에서 이를 보완할 수 있는 성분의 개발이 필요하다고 판단되어, 세포의 성장을 촉진하는 것으로 알려진 PhS1P를 연구 대상으로 선정하였다. 본 연구에서는 세포효력시험과 인체적용시험을 통해 PhS1P와 EGF가 상승작용을 하여 피부의 노화를 개선하는데 효과가 있음을 검증하고자 하였다. 세포효력시험은 인간 진피섬유아세포(...
최근 사회적으로 외모를 중시하는 경향과 동안 열풍으로 노화방지용 화장품 성분 개발에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 특히 노화 개선 화장품 성분으로 많이 사용되고 있는 EGF는 그 효능이 매우 우수하지만 고가라는 단점이 있다. 따라서 화장품 원료 산업에서 이를 보완할 수 있는 성분의 개발이 필요하다고 판단되어, 세포의 성장을 촉진하는 것으로 알려진 PhS1P를 연구 대상으로 선정하였다. 본 연구에서는 세포효력시험과 인체적용시험을 통해 PhS1P와 EGF가 상승작용을 하여 피부의 노화를 개선하는데 효과가 있음을 검증하고자 하였다. 세포효력시험은 인간 진피섬유아세포(normal human dermal fibroblasts; nHDFs)에 대한 PhS1P와 EGF의 상승작용으로 인한 노화 억제작용을 검증하는 데 목적이 있다. PhS1P와 EGF의 효능을 검증하기 위해 세포 생존율, Western blotting, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), 세포 이동성, ROS 생성도 분석을 실시하였다. PhS1P를 nHDFs에 전 처리하면 EGFR mRNA 발현을 유도함을 확인하였다. PhS1P와 EGF를 nHDFs에 처리 시, 세포의 증식에 관여하는 조절 단백질인 ERK와 AKT의 인산화를 활성화시킨다는 것을 확인하였다. 세포의 이동성은 PhS1P와 EGF를 처리 시 현저히 증가함을 확인하였다. nHDFs에 PhS1P와 EGF를 처리 시 MMP1의 발현이 감소되고 COL1A1의 발현이 증가됨을 확인하였다. UVB가 조사된 nHDFs에 PhS1P와 EGF를 처리 시 세포의 viability가 증가되어, PhS1P와 EGF 가 손상된 세포의 회복에 효과가 있음을 확인하였다. UVB의 조사로 증가된 ROS는 EGF와 PhS1P 처리에 의해 제거되어짐을 확인하였다. 이러한 결과들은 PhS1P와 EGF가 상승작용을 통하여 피부의 노화작용을 효과적으로 억제함을 보여준다. 인체적용시험은 피험자 선정 및 제외기준에 적합한 눈가 주름이 있는 35세 이상의 여성을 대상으로, PhS1P와 EGF가 미함유된 크림을 사용하는 대조군과 PhS1P와 EGF가 함유된 크림을 사용하는 실험군으로 피시험자를 각각 20명씩 나누어 실험을 진행하였다. 시험은 이중맹검법으로 진행하였고, 시험물질은 6주 동안 사용하였다. 기기 측정은 제품 사용 전, 제품 사용 3주, 6주 후 시점에서 이루어졌다. 실험군의 보습 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 23.21%, 사용 6주 후 42.55%로 현저히 증가되었다. 실험군의 표피 두께 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 9.09%, 사용 6주 후 27.96%로 증가되었다. 실험군의 표피 치밀도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 5.99%, 사용 6주 후 13.19%로 증가되었다. 실험군의 진피 두께 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 7.96%, 사용 6주 후 14.50%로 증가되었다. 실험군의 진피 치밀도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 5.82%, 사용 6주 후 13.57%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 Ra값 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 17.27%, 사용 6주 후 19.83%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 길이 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 15.29%, 사용 6주 후 28.18%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 면적 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 13.52%, 사용 6주 후 25.59%로 증가되었다. 실험군의 우측 눈밑 주름 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 14.15%, 사용 6주 후 30.19%로 증가되었다. 실험군의 좌측 눈밑 주름 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 7.35%, 사용 6주 후 35.29%로 증가되었다. 실험군의 피부 탄력도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 9.81%, 사용 6주 후 20.15%로 증가되었다. 이러한 결과들은 PhS1P와 EGF가 피부의 보습, 두께 및 치밀도, 주름, 탄력을 개선시키는데 효능이 있음을 보여준다. 따라서 EGF와 PhS1P가 상승작용을 통하여 피부의 노화를 효과적으로 억제하는데 효능이 있음을 확인하였고, 앞으로 PhS1P와 EGF가 우수한 노화방지용 화장품 소재로서 사용가치가 있을 것이라 사료된다.
최근 사회적으로 외모를 중시하는 경향과 동안 열풍으로 노화방지용 화장품 성분 개발에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 특히 노화 개선 화장품 성분으로 많이 사용되고 있는 EGF는 그 효능이 매우 우수하지만 고가라는 단점이 있다. 따라서 화장품 원료 산업에서 이를 보완할 수 있는 성분의 개발이 필요하다고 판단되어, 세포의 성장을 촉진하는 것으로 알려진 PhS1P를 연구 대상으로 선정하였다. 본 연구에서는 세포효력시험과 인체적용시험을 통해 PhS1P와 EGF가 상승작용을 하여 피부의 노화를 개선하는데 효과가 있음을 검증하고자 하였다. 세포효력시험은 인간 진피섬유아세포(normal human dermal fibroblasts; nHDFs)에 대한 PhS1P와 EGF의 상승작용으로 인한 노화 억제작용을 검증하는 데 목적이 있다. PhS1P와 EGF의 효능을 검증하기 위해 세포 생존율, Western blotting, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), 세포 이동성, ROS 생성도 분석을 실시하였다. PhS1P를 nHDFs에 전 처리하면 EGFR mRNA 발현을 유도함을 확인하였다. PhS1P와 EGF를 nHDFs에 처리 시, 세포의 증식에 관여하는 조절 단백질인 ERK와 AKT의 인산화를 활성화시킨다는 것을 확인하였다. 세포의 이동성은 PhS1P와 EGF를 처리 시 현저히 증가함을 확인하였다. nHDFs에 PhS1P와 EGF를 처리 시 MMP1의 발현이 감소되고 COL1A1의 발현이 증가됨을 확인하였다. UVB가 조사된 nHDFs에 PhS1P와 EGF를 처리 시 세포의 viability가 증가되어, PhS1P와 EGF 가 손상된 세포의 회복에 효과가 있음을 확인하였다. UVB의 조사로 증가된 ROS는 EGF와 PhS1P 처리에 의해 제거되어짐을 확인하였다. 이러한 결과들은 PhS1P와 EGF가 상승작용을 통하여 피부의 노화작용을 효과적으로 억제함을 보여준다. 인체적용시험은 피험자 선정 및 제외기준에 적합한 눈가 주름이 있는 35세 이상의 여성을 대상으로, PhS1P와 EGF가 미함유된 크림을 사용하는 대조군과 PhS1P와 EGF가 함유된 크림을 사용하는 실험군으로 피시험자를 각각 20명씩 나누어 실험을 진행하였다. 시험은 이중맹검법으로 진행하였고, 시험물질은 6주 동안 사용하였다. 기기 측정은 제품 사용 전, 제품 사용 3주, 6주 후 시점에서 이루어졌다. 실험군의 보습 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 23.21%, 사용 6주 후 42.55%로 현저히 증가되었다. 실험군의 표피 두께 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 9.09%, 사용 6주 후 27.96%로 증가되었다. 실험군의 표피 치밀도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 5.99%, 사용 6주 후 13.19%로 증가되었다. 실험군의 진피 두께 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 7.96%, 사용 6주 후 14.50%로 증가되었다. 실험군의 진피 치밀도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 5.82%, 사용 6주 후 13.57%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 Ra값 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 17.27%, 사용 6주 후 19.83%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 길이 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 15.29%, 사용 6주 후 28.18%로 증가되었다. 실험군의 눈꼬리 주름 면적 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 13.52%, 사용 6주 후 25.59%로 증가되었다. 실험군의 우측 눈밑 주름 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 14.15%, 사용 6주 후 30.19%로 증가되었다. 실험군의 좌측 눈밑 주름 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 7.35%, 사용 6주 후 35.29%로 증가되었다. 실험군의 피부 탄력도 개선율(%)을 분석한 결과, 사용 3주 후 9.81%, 사용 6주 후 20.15%로 증가되었다. 이러한 결과들은 PhS1P와 EGF가 피부의 보습, 두께 및 치밀도, 주름, 탄력을 개선시키는데 효능이 있음을 보여준다. 따라서 EGF와 PhS1P가 상승작용을 통하여 피부의 노화를 효과적으로 억제하는데 효능이 있음을 확인하였고, 앞으로 PhS1P와 EGF가 우수한 노화방지용 화장품 소재로서 사용가치가 있을 것이라 사료된다.
Due to the recent social trend of appearance consciousness and young looking face wave, recent studies are active in developing ingredients on anti-aging cosmetics. Despite of the excellent efficacy of the EGF, which commonly used for anti-aging cosmetics ingredients, its disadvantage is the high pr...
Due to the recent social trend of appearance consciousness and young looking face wave, recent studies are active in developing ingredients on anti-aging cosmetics. Despite of the excellent efficacy of the EGF, which commonly used for anti-aging cosmetics ingredients, its disadvantage is the high price. Therefore, further studies are needed to determine the alternative ingredients. In this study, the PhS1P is chosen as the target which promotes a cell growth. This study was to verify that PhS1P and EGF are effective in skin anti-aging by the synergistic effect of PhS1P and EGF through the in vitro assay and clinical study. The aim of the in vitro assay is verifying the anti-aging action by synergism of PhS1P and EGF on the normal human dermal fibroblasts (nHDFs). Analysis on cell viability, Western blotting, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), cell migration and ROS formation were implemented to investigate the efficacy of PhS1P and EGF. It is confirmed that pretreating PhS1P to nHDFs induces EGFR mRNA expression. When treating PhS1P and EGF to nHDFs, it activated the phosphorylation of AKT and ERK, and cell migration was drastically increased. Expression of MMP1 was decreased but COL1A1 was increased under the same condition. When treating PhS1P and EGF to UVB-radiated nHDFs, cell viability was increased and PhS1P and EGF were effective for the recovery of damaged cells. Increased ROS by UVB radiation were removed by the treatment of PhS1P and EGF. This result shows that PhS1P and EGF have synergistic effect on skin anti-aging. A clinical study was examined all throughout 40 female, overage 35 with periorbital wrinkles appropriate for the subject selection and exception criteria, and the subjects were divided by 20 people into the experimental group using the cream with PhS1P and EGF, and the control group using the cream without PhS1P and EGF. The clinical study was carried out into double-blind test and the test material was used for 6 weeks. The evaluation was conducted after 3 weeks and 6 weeks from the use of the test material. The moisture enhancement rate(%) of the experimental group, it drastically increased to 23.21% for 3 weeks after the use and to 42.55% for 6 weeks after the use. The improvement rate(%) of epidermal thickness and epidermal density of the experimental group were increased to 9.09% (3 weeks after of use) and 27.96% (6 weeks), and 5.99% (3 weeks) and 13.19% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of dermal thickness and dermal density of the experimental group were increased to 7.96% (3 weeks after the use) and 14.50% (6 weeks), and 5.82% (3 weeks) and 13.57% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of crow's feet Ra value, crow's feet length, and crow’s feet area of the experimental group were increased to 17.27% (3 weeks after the use) and 19.83% (6 weeks), 15.29% (3 weeks) and 28.18% (6 weeks), and 13.52% (3 weeks) and 25.59% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of right side under eye wrinkle and left side under eye wrinkle of the experimental group increased to 14.15% (3 weeks after the use) and 30.19% (6 weeks), and 7.35% (3 weeks) and 35.29% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of skin elasticity of the experimental group were increased to 9.81% (3 weeks after the use) and 20.15% (6 weeks). Such results show that PhS1P and EGF have effect on improving the skin moisture, thickness, density, wrinkles and elasticity of the skin. Therefore, PhS1P and EGF are effective in the skin anti-aging through synergism, and it is considered that PhS1P and EGF have indefinite value of use as anti-aging cosmetics ingredients in the future.
Due to the recent social trend of appearance consciousness and young looking face wave, recent studies are active in developing ingredients on anti-aging cosmetics. Despite of the excellent efficacy of the EGF, which commonly used for anti-aging cosmetics ingredients, its disadvantage is the high price. Therefore, further studies are needed to determine the alternative ingredients. In this study, the PhS1P is chosen as the target which promotes a cell growth. This study was to verify that PhS1P and EGF are effective in skin anti-aging by the synergistic effect of PhS1P and EGF through the in vitro assay and clinical study. The aim of the in vitro assay is verifying the anti-aging action by synergism of PhS1P and EGF on the normal human dermal fibroblasts (nHDFs). Analysis on cell viability, Western blotting, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), cell migration and ROS formation were implemented to investigate the efficacy of PhS1P and EGF. It is confirmed that pretreating PhS1P to nHDFs induces EGFR mRNA expression. When treating PhS1P and EGF to nHDFs, it activated the phosphorylation of AKT and ERK, and cell migration was drastically increased. Expression of MMP1 was decreased but COL1A1 was increased under the same condition. When treating PhS1P and EGF to UVB-radiated nHDFs, cell viability was increased and PhS1P and EGF were effective for the recovery of damaged cells. Increased ROS by UVB radiation were removed by the treatment of PhS1P and EGF. This result shows that PhS1P and EGF have synergistic effect on skin anti-aging. A clinical study was examined all throughout 40 female, overage 35 with periorbital wrinkles appropriate for the subject selection and exception criteria, and the subjects were divided by 20 people into the experimental group using the cream with PhS1P and EGF, and the control group using the cream without PhS1P and EGF. The clinical study was carried out into double-blind test and the test material was used for 6 weeks. The evaluation was conducted after 3 weeks and 6 weeks from the use of the test material. The moisture enhancement rate(%) of the experimental group, it drastically increased to 23.21% for 3 weeks after the use and to 42.55% for 6 weeks after the use. The improvement rate(%) of epidermal thickness and epidermal density of the experimental group were increased to 9.09% (3 weeks after of use) and 27.96% (6 weeks), and 5.99% (3 weeks) and 13.19% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of dermal thickness and dermal density of the experimental group were increased to 7.96% (3 weeks after the use) and 14.50% (6 weeks), and 5.82% (3 weeks) and 13.57% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of crow's feet Ra value, crow's feet length, and crow’s feet area of the experimental group were increased to 17.27% (3 weeks after the use) and 19.83% (6 weeks), 15.29% (3 weeks) and 28.18% (6 weeks), and 13.52% (3 weeks) and 25.59% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of right side under eye wrinkle and left side under eye wrinkle of the experimental group increased to 14.15% (3 weeks after the use) and 30.19% (6 weeks), and 7.35% (3 weeks) and 35.29% (6 weeks), respectively. The improvement rate(%) of skin elasticity of the experimental group were increased to 9.81% (3 weeks after the use) and 20.15% (6 weeks). Such results show that PhS1P and EGF have effect on improving the skin moisture, thickness, density, wrinkles and elasticity of the skin. Therefore, PhS1P and EGF are effective in the skin anti-aging through synergism, and it is considered that PhS1P and EGF have indefinite value of use as anti-aging cosmetics ingredients in the future.
주제어
#Epidermal growth factor Phytosphingosine-1-phosphate Aging normal human dermal fibroblast
학위논문 정보
저자
권승빈
학위수여기관
건국대학교 대학원
학위구분
국내박사
학과
생물공학 향장생물학
지도교수
안성관
발행연도
2014
총페이지
77
키워드
Epidermal growth factor Phytosphingosine-1-phosphate Aging normal human dermal fibroblast
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