면역세포치료제는 항암 치료에서 중요한 역할을 하고 있다. CAR-T 등의 면역치료제가 혈액암에서 훌륭한 치료 효과를 보이는 가운데, 고형암에는 적용이 어렵다는 한계점을 가진다. 다양한 암에 적용 가능한 효과적인 항암 치료제로 자연살해세포나 대식세포를 이용한 면역치료제가 제시되고 있다. 본 논문에서는 대식세포를 이용하여 효과적으로 암세포를 제거하고자 하였다. 이를 위해 먼저 형질전환이 어려웠던 대식세포에 효율적으로 유전자를 전달하는 방법을 고안하였다. CpG 서열이 제거된 pCGfd-GFP ...
면역세포치료제는 항암 치료에서 중요한 역할을 하고 있다. CAR-T 등의 면역치료제가 혈액암에서 훌륭한 치료 효과를 보이는 가운데, 고형암에는 적용이 어렵다는 한계점을 가진다. 다양한 암에 적용 가능한 효과적인 항암 치료제로 자연살해세포나 대식세포를 이용한 면역치료제가 제시되고 있다. 본 논문에서는 대식세포를 이용하여 효과적으로 암세포를 제거하고자 하였다. 이를 위해 먼저 형질전환이 어려웠던 대식세포에 효율적으로 유전자를 전달하는 방법을 고안하였다. CpG 서열이 제거된 pCGfd-GFP 플라스미드를 microporation으로 형질 전환하였고, 80% 이상의 세포에서 GFP가 발현되는 것을 확인하였다. 이러한 효율적인 유전자 전달 방법을 이용하여 대식세포가 암세포를 제거하는 능력을 증가시키고자 하였다. 대식세포와 암세포의 공동 배양을 통해서, Anti-EGFR-scFv-Fc를 분비 발현하는 대식세포가 EGFR이 과발현된 A431와 HT-29 암세포를 대식작용을 통해서 효과적으로 제거하는 것을 확인하였다. 또한, A431 세포를 이용한 마우스 xenograft 모델 실험에서 종양의 성장이 유의미하게 억제되는 것을 확인하였다. 결론적으로, 본 논문에서는 CpG 서열을 제거한 플라스미드를 이용하여 대식세포의 형질전환 효율을 높이는 시스템을 개발하였으며, 이를 이용하여 재조합 EGFR 항체를 분비발현 하는 대식세포를 제작하여, 암세포를 효율적으로 제거하는 방법을 제시하였다.
면역세포치료제는 항암 치료에서 중요한 역할을 하고 있다. CAR-T 등의 면역치료제가 혈액암에서 훌륭한 치료 효과를 보이는 가운데, 고형암에는 적용이 어렵다는 한계점을 가진다. 다양한 암에 적용 가능한 효과적인 항암 치료제로 자연살해세포나 대식세포를 이용한 면역치료제가 제시되고 있다. 본 논문에서는 대식세포를 이용하여 효과적으로 암세포를 제거하고자 하였다. 이를 위해 먼저 형질전환이 어려웠던 대식세포에 효율적으로 유전자를 전달하는 방법을 고안하였다. CpG 서열이 제거된 pCGfd-GFP 플라스미드를 microporation으로 형질 전환하였고, 80% 이상의 세포에서 GFP가 발현되는 것을 확인하였다. 이러한 효율적인 유전자 전달 방법을 이용하여 대식세포가 암세포를 제거하는 능력을 증가시키고자 하였다. 대식세포와 암세포의 공동 배양을 통해서, Anti-EGFR-scFv-Fc를 분비 발현하는 대식세포가 EGFR이 과발현된 A431와 HT-29 암세포를 대식작용을 통해서 효과적으로 제거하는 것을 확인하였다. 또한, A431 세포를 이용한 마우스 xenograft 모델 실험에서 종양의 성장이 유의미하게 억제되는 것을 확인하였다. 결론적으로, 본 논문에서는 CpG 서열을 제거한 플라스미드를 이용하여 대식세포의 형질전환 효율을 높이는 시스템을 개발하였으며, 이를 이용하여 재조합 EGFR 항체를 분비발현 하는 대식세포를 제작하여, 암세포를 효율적으로 제거하는 방법을 제시하였다.
In recent year, immune cell therapy has been regarded as an effective anti-tumor therapy. Immune cell therapy including CAR-T has showed excellent therapeutic effects on acute leukemia and B cell lymphoma, while it has been hard to apply on solid tumor. Recently, immune cell therapy using natural ki...
In recent year, immune cell therapy has been regarded as an effective anti-tumor therapy. Immune cell therapy including CAR-T has showed excellent therapeutic effects on acute leukemia and B cell lymphoma, while it has been hard to apply on solid tumor. Recently, immune cell therapy using natural killer cells or macrophages have been proposed as an effective anti-tumor therapeutic method to various tumors including solid tumor. In this paper, we tried to effectively remove tumor cells using macrophages. Firstly, we developed a method for efficiently transferring genes to macrophages. The pCGfd-GFP plasmid in which the CpG sequence and the S/MAR sequence were removed was transfected into macrophages by microporation. Interestingly, macrophages expressing GFP were increased up to 80% by this method. Next, we would like to enhance the phagocytic ability of macrophages on tumor cells using this efficient gene delivery method. We confirmed that Raw 264.7 cells expressing anti-EGFR-scFv-Fc effectively induced antibody-dependent cellular phagocytosis to A431, A673, and HT-29, EGFR overexpressed or mutated cell lines. Anti-EGFR-scFv-Fc secreting macrophages significantly inhibited the growth of A431 tumor in the mouse xenograft model. In this study, we developed a new method to enhance transfection efficiency of macrophages and suggested a new therapeutic approach for anti-tumor therapy using antibody-secreting macrophages expressed of anti-EGFR-scFv-Fc by this method.
In recent year, immune cell therapy has been regarded as an effective anti-tumor therapy. Immune cell therapy including CAR-T has showed excellent therapeutic effects on acute leukemia and B cell lymphoma, while it has been hard to apply on solid tumor. Recently, immune cell therapy using natural killer cells or macrophages have been proposed as an effective anti-tumor therapeutic method to various tumors including solid tumor. In this paper, we tried to effectively remove tumor cells using macrophages. Firstly, we developed a method for efficiently transferring genes to macrophages. The pCGfd-GFP plasmid in which the CpG sequence and the S/MAR sequence were removed was transfected into macrophages by microporation. Interestingly, macrophages expressing GFP were increased up to 80% by this method. Next, we would like to enhance the phagocytic ability of macrophages on tumor cells using this efficient gene delivery method. We confirmed that Raw 264.7 cells expressing anti-EGFR-scFv-Fc effectively induced antibody-dependent cellular phagocytosis to A431, A673, and HT-29, EGFR overexpressed or mutated cell lines. Anti-EGFR-scFv-Fc secreting macrophages significantly inhibited the growth of A431 tumor in the mouse xenograft model. In this study, we developed a new method to enhance transfection efficiency of macrophages and suggested a new therapeutic approach for anti-tumor therapy using antibody-secreting macrophages expressed of anti-EGFR-scFv-Fc by this method.
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