정원줄기세포는 고환의 세정관에서 자가 재생산과 분화를 하며 정자의 생성을 유지하여 남성의 생식 과정을 유지하는데 전문화된 줄기세포이다. 정원줄기세포를 분리하는 것은 암치료나 질병으로 인한 남성 불임을 위한 치료에 사용되기 위해 필수적이다. 일반적으로, 세포 표면 단백질이 정원줄기세포의 마커로써 세포의 분리에 사용된다. CD9, Thy-1.2, CD49f와 GFRɑ1등의 표면 마커들이 보고되어 현재 정원줄기세포를 분리하는데 사용되고 있다. 그러나 적은 수와 낮은 ...
정원줄기세포는 고환의 세정관에서 자가 재생산과 분화를 하며 정자의 생성을 유지하여 남성의 생식 과정을 유지하는데 전문화된 줄기세포이다. 정원줄기세포를 분리하는 것은 암치료나 질병으로 인한 남성 불임을 위한 치료에 사용되기 위해 필수적이다. 일반적으로, 세포 표면 단백질이 정원줄기세포의 마커로써 세포의 분리에 사용된다. CD9, Thy-1.2, CD49f와 GFRɑ1등의 표면 마커들이 보고되어 현재 정원줄기세포를 분리하는데 사용되고 있다. 그러나 적은 수와 낮은 특이성으로 인해 정원줄기세포의 분리는 여전히 해결해야할 숙제로 남아있다. 이 논문에서는 새로운 생쥐 정원줄기세포를 발굴하기 위한 연구를 진행하였다. 314개의 항체로 배양 생쥐 정원줄기세포를 검사하여, 최종적으로 8개의 단백질을 정원줄기세포의 표면 마커 후보로 선정하였다. 8개의 후보 마커들은 생쥐의 고환에서 분리한 세포에서도 발현을 보였으며, 또한 알려진 정원줄기세포 마커인 GFRɑ1, CD49f와 Thy-1.2와 공동 발현을 하는 것이 배양 생쥐 정원줄기세포와 생쥐 고환 세포에서 모두 관찰되었다. 8개의 후보 마커 중에서도 가장 좋은 공동 발현을 보이는 CD71에 대한연구를 진행하였다. CD71은 트랜스페린 수용체로, 초기의 생식 세포에서 발현하며 철분을 세포 내부로 이동시킨다. 정원줄기세포에서의 CD71의 역할을 연구하기 위해, 배양 생쥐 정원줄기세포에서 CD71 유전자의 발현을 억제하였다. 그 결과, 배양 생쥐 정원줄기세포에서 CD71의 발현이 60% 억제되었을 때, 일부 줄기세포와 분화 관련 유전자들, Pou5f1, Bcl6b, Stra8, Dazl의 발현이 유의미하게 감소하였다.
정원줄기세포는 고환의 세정관에서 자가 재생산과 분화를 하며 정자의 생성을 유지하여 남성의 생식 과정을 유지하는데 전문화된 줄기세포이다. 정원줄기세포를 분리하는 것은 암치료나 질병으로 인한 남성 불임을 위한 치료에 사용되기 위해 필수적이다. 일반적으로, 세포 표면 단백질이 정원줄기세포의 마커로써 세포의 분리에 사용된다. CD9, Thy-1.2, CD49f와 GFRɑ1등의 표면 마커들이 보고되어 현재 정원줄기세포를 분리하는데 사용되고 있다. 그러나 적은 수와 낮은 특이성으로 인해 정원줄기세포의 분리는 여전히 해결해야할 숙제로 남아있다. 이 논문에서는 새로운 생쥐 정원줄기세포를 발굴하기 위한 연구를 진행하였다. 314개의 항체로 배양 생쥐 정원줄기세포를 검사하여, 최종적으로 8개의 단백질을 정원줄기세포의 표면 마커 후보로 선정하였다. 8개의 후보 마커들은 생쥐의 고환에서 분리한 세포에서도 발현을 보였으며, 또한 알려진 정원줄기세포 마커인 GFRɑ1, CD49f와 Thy-1.2와 공동 발현을 하는 것이 배양 생쥐 정원줄기세포와 생쥐 고환 세포에서 모두 관찰되었다. 8개의 후보 마커 중에서도 가장 좋은 공동 발현을 보이는 CD71에 대한연구를 진행하였다. CD71은 트랜스페린 수용체로, 초기의 생식 세포에서 발현하며 철분을 세포 내부로 이동시킨다. 정원줄기세포에서의 CD71의 역할을 연구하기 위해, 배양 생쥐 정원줄기세포에서 CD71 유전자의 발현을 억제하였다. 그 결과, 배양 생쥐 정원줄기세포에서 CD71의 발현이 60% 억제되었을 때, 일부 줄기세포와 분화 관련 유전자들, Pou5f1, Bcl6b, Stra8, Dazl의 발현이 유의미하게 감소하였다.
Spermatogonial stem cells (SSCs) are specialized stem cells that can self-renewal and differentiation into sperm at testis to maintain male reproduction. Sorting of SSCs is critical for the therapeutic application of male infertility caused by cancer treatment or diseases. Mostly, cell surface prote...
Spermatogonial stem cells (SSCs) are specialized stem cells that can self-renewal and differentiation into sperm at testis to maintain male reproduction. Sorting of SSCs is critical for the therapeutic application of male infertility caused by cancer treatment or diseases. Mostly, cell surface proteins are used as a marker for SSCs to isolate. Several surface markers such as CD9, Thy-1.2, CD49f, and GFRɑ1 are reported and currently used in the sorting of SSCs. But because of the small population and indistinguishable characteristics, the isolation of SSCs still remains to be solved. Here, I investigated novel mouse cell surface markers for SSCs. By analysis of cultured mouse germ cell enriched for SSCs (GCESs) with 314 antibodies, I identified eight proteins as new candidate surface markers for SSCs. Eight candidates also expressed on primary mouse testes cells and co-localized with SSCs markers, GFRɑ1, CD49f, and Thy-1.2 in both GCESs and primary mouse testes cells. These results implicated that eight candidates were expressed on the SSCs likewise known certified markers. From candidates, CD71 showed well co-localization with SSCs surface markers. CD71 is a transferrin receptor, which is known to express on the early spermatocytes and transport iron into cells. To study the functional role of CD71 on spermatogonial stem cells, knockdown of CD71 on GCES cells was performed. As a result, when CD71 was 60% knockdown on GCESs, expression level of some stemness and differentiation-related genes, Pou5f1, Bcl6b, Stra8, and Dazl were decreased.
Spermatogonial stem cells (SSCs) are specialized stem cells that can self-renewal and differentiation into sperm at testis to maintain male reproduction. Sorting of SSCs is critical for the therapeutic application of male infertility caused by cancer treatment or diseases. Mostly, cell surface proteins are used as a marker for SSCs to isolate. Several surface markers such as CD9, Thy-1.2, CD49f, and GFRɑ1 are reported and currently used in the sorting of SSCs. But because of the small population and indistinguishable characteristics, the isolation of SSCs still remains to be solved. Here, I investigated novel mouse cell surface markers for SSCs. By analysis of cultured mouse germ cell enriched for SSCs (GCESs) with 314 antibodies, I identified eight proteins as new candidate surface markers for SSCs. Eight candidates also expressed on primary mouse testes cells and co-localized with SSCs markers, GFRɑ1, CD49f, and Thy-1.2 in both GCESs and primary mouse testes cells. These results implicated that eight candidates were expressed on the SSCs likewise known certified markers. From candidates, CD71 showed well co-localization with SSCs surface markers. CD71 is a transferrin receptor, which is known to express on the early spermatocytes and transport iron into cells. To study the functional role of CD71 on spermatogonial stem cells, knockdown of CD71 on GCES cells was performed. As a result, when CD71 was 60% knockdown on GCESs, expression level of some stemness and differentiation-related genes, Pou5f1, Bcl6b, Stra8, and Dazl were decreased.
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