Anti-Progesterone Monoclonal Antibody에 대한 Anti-Idiotype 항체의 불임효과에 관한 연구 Antifertility Effect of Anti-Idiotypic Antibody Against Anti-Progesterone Monoclonal Antibody
프로제스테론에 대한 단일클론항체(15A)를 항원으로 토끼의 anti-idiotypic antibody(anti-Id)를 생산한 후 분리 정제하였다. 또한 단일클론성 anti-Id를 분비하는 세포주를 개발하기 위해 15A를 Balb/c 생쥐에 면역주사 하였다. 그 후 항체를 생산하는 B lymphocyte와 myeloma 세포를 융합시켜 하이브리도마 세포를 만든 뒤 이들 중 anti-Id를 생산하는 3종류의 클론(G2, G9, H6)을 선별하였다. Anti-Id의 효소 면역측정법은 horseradish peroxidase(HRP)를 활성화시킨 후, 15A와 반응시켜 만든 15A-HRP를 사용하였다. Anti-Id의 불임에 미치는 효과를 control과 비교하여 본 결과, control로서 anti-mouse IgG를 투여한 그룹은 임선율이 86.7%로 높게 나타났으나, progesterone-BSA를 투여한 후 그룹은 임신율이 30.4%로 임신이 억제되었고, anti-Id를 주사한 그룹은 임신율이 45.5%이었다. 이 때 각 그룹에 속한 개체들의 프로제스테론에 대한 항체농도를 측정한 결과는 각각 $0.25{\mu}g/ml$, $3,500{\pm}950{\mu}g/ml$, 그리고 $31.3{\pm}7.4{\mu}g/ml$로 나타났다. 또한 anti-Id를 주사한 경우 임신한 쥐들의 경우($10.1{\pm}1.3{\mu}g/ml$) 보다도 임신하지 않은 쥐들에서 프로제스테론에 대한 항체 농도가 $43.8{\pm}6.1{\mu}g/ml$로 4배가량 높게 나타났다. 이와 같은 결과에서 anti-Id를 주사한 쥐들의 그룹에서 프로제스테론에 대한 항체의 농도와 임신억제 효과는 상관관계가 있음을 알 수 있었다. 본 실험의 결과를 종합해 볼 때 anti-Id를 주사한 그룹의 쥐들이 progesterone-BSA를 능동면역한 그룹의 쥐들보다 임신율은 높게 나타났으나, control 그룹의 임신율 86.7%와 비교할 때 현저한 피임효과를 나타냄으로써 anti-Id를 피임백신으로 사용할 수 있는 가능성을 보여 주었다.
프로제스테론에 대한 단일클론항체(15A)를 항원으로 토끼의 anti-idiotypic antibody(anti-Id)를 생산한 후 분리 정제하였다. 또한 단일클론성 anti-Id를 분비하는 세포주를 개발하기 위해 15A를 Balb/c 생쥐에 면역주사 하였다. 그 후 항체를 생산하는 B lymphocyte와 myeloma 세포를 융합시켜 하이브리도마 세포를 만든 뒤 이들 중 anti-Id를 생산하는 3종류의 클론(G2, G9, H6)을 선별하였다. Anti-Id의 효소 면역측정법은 horseradish peroxidase(HRP)를 활성화시킨 후, 15A와 반응시켜 만든 15A-HRP를 사용하였다. Anti-Id의 불임에 미치는 효과를 control과 비교하여 본 결과, control로서 anti-mouse IgG를 투여한 그룹은 임선율이 86.7%로 높게 나타났으나, progesterone-BSA를 투여한 후 그룹은 임신율이 30.4%로 임신이 억제되었고, anti-Id를 주사한 그룹은 임신율이 45.5%이었다. 이 때 각 그룹에 속한 개체들의 프로제스테론에 대한 항체농도를 측정한 결과는 각각 $0.25{\mu}g/ml$, $3,500{\pm}950{\mu}g/ml$, 그리고 $31.3{\pm}7.4{\mu}g/ml$로 나타났다. 또한 anti-Id를 주사한 경우 임신한 쥐들의 경우($10.1{\pm}1.3{\mu}g/ml$) 보다도 임신하지 않은 쥐들에서 프로제스테론에 대한 항체 농도가 $43.8{\pm}6.1{\mu}g/ml$로 4배가량 높게 나타났다. 이와 같은 결과에서 anti-Id를 주사한 쥐들의 그룹에서 프로제스테론에 대한 항체의 농도와 임신억제 효과는 상관관계가 있음을 알 수 있었다. 본 실험의 결과를 종합해 볼 때 anti-Id를 주사한 그룹의 쥐들이 progesterone-BSA를 능동면역한 그룹의 쥐들보다 임신율은 높게 나타났으나, control 그룹의 임신율 86.7%와 비교할 때 현저한 피임효과를 나타냄으로써 anti-Id를 피임백신으로 사용할 수 있는 가능성을 보여 주었다.
The active immunization of progesterone produces high titer antibodies. However, the progesterone itself binds to the receptor sites and produces the side effect on the contraceptive activities of the antibodies. Therefore, the anti-idiotypic antibody (anti-Id) was studied whether it had the same ef...
The active immunization of progesterone produces high titer antibodies. However, the progesterone itself binds to the receptor sites and produces the side effect on the contraceptive activities of the antibodies. Therefore, the anti-idiotypic antibody (anti-Id) was studied whether it had the same effect as the active immunization of progesterone to prevent pregnancy or not. If it has antifertility effect, it could be utilized as a contraceptive vaccine. The passive immunization of antibody to mice was previously studied and found that anti-progesterone monoclonal antibody prevents pregnancy by degenerating the embryos in the oviduct and uterus (Yoon et al., 1989). The polyclonal anti-Id was obtained by immunizing anti-progesterone monoclonal antibody (15A) to rabbit and then purified using affinity column chromatography. Furthermore, three different clones (G2, G9, H6) of monoclonal anti-Ids have been raised against anti-progesterone monoclonal antibody. The relationships between the antifertility effects and anti-progesterone antibody level were studied by the active immunization of anti-Id and progesterone-BSA. The results showed that a higher antifertility effect was observed with progesterone-BSA immunization (70%) than with anti-Id immunization (55%). The plasma level of anti-progesterone was as high as $3,500{\mu}g/ml$ with progesterone-BSA immunization. The comparison study of the antibody levels between pregnant ($10{\mu}g/ml$) and non-pregnant mice ($44{\mu}g/ml$) after immunization with the anti-Id indicates that antibody formation at a certain level prevents pregnancy. However, the antibody level is not proportional to the antifertility effect in mice.
The active immunization of progesterone produces high titer antibodies. However, the progesterone itself binds to the receptor sites and produces the side effect on the contraceptive activities of the antibodies. Therefore, the anti-idiotypic antibody (anti-Id) was studied whether it had the same effect as the active immunization of progesterone to prevent pregnancy or not. If it has antifertility effect, it could be utilized as a contraceptive vaccine. The passive immunization of antibody to mice was previously studied and found that anti-progesterone monoclonal antibody prevents pregnancy by degenerating the embryos in the oviduct and uterus (Yoon et al., 1989). The polyclonal anti-Id was obtained by immunizing anti-progesterone monoclonal antibody (15A) to rabbit and then purified using affinity column chromatography. Furthermore, three different clones (G2, G9, H6) of monoclonal anti-Ids have been raised against anti-progesterone monoclonal antibody. The relationships between the antifertility effects and anti-progesterone antibody level were studied by the active immunization of anti-Id and progesterone-BSA. The results showed that a higher antifertility effect was observed with progesterone-BSA immunization (70%) than with anti-Id immunization (55%). The plasma level of anti-progesterone was as high as $3,500{\mu}g/ml$ with progesterone-BSA immunization. The comparison study of the antibody levels between pregnant ($10{\mu}g/ml$) and non-pregnant mice ($44{\mu}g/ml$) after immunization with the anti-Id indicates that antibody formation at a certain level prevents pregnancy. However, the antibody level is not proportional to the antifertility effect in mice.
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