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Green Fluorescent Protein(GFP)의 Fluorescence-Activated Cell Sorter(FACS) 분석을 통한 유전자 이입의 최적화
Optimization of Gene Transfection Using Fluorescence-Activated Cell Sorter(FACS) Analysis of Green Fluorescent Protein(GFP) 원문보기

한국생물공학회지 = Korean journal of biotechnology and bioengineering, v.14 no.3, 1999년, pp.377 - 379  

김태경 (한국과학기술원 생물과학과) ,  박민태 (한국과학기술원 생물과학과) ,  이균민 (한국과학기술원 생물과학과)

초록
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CHO/dhfr- 세포에 대해 LipofectAmine$^{TM}$을 이용한 유전자 이입 효율을 증가시키기 위하여 지질과 DNA의 최적 농도를 구하였다. Reporter 유전자로서 GFP 유전자를 이용하였으며, 여러 농도의 지질 DNA로 유전자 이입된 각 세포군에서 나타나는 green fluorescence intensity를 FACS 분석함으로써 유전자 이입 효율을 정량화 할 수 있었다. 그 결과 24-well plate에서 $2.0{\mu}L$LipofectAmine$^{TM}$$0.4{\mu}g$ DNA를 조합하여 사용했을 때 최적의 유전자 이입 효율이 나타남을 알 수 있었다. 또한, GFP는 유전자 이입 최적화를 수행하는 데에 여러가지 면에서 유용한 수단이 될 수 있음을 확인할 수 있었다.

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In order to improve the transfection efficiency of CHO/dhfr- cells using cationic lipid, optimal concentrations of the cationic lipid($LipofectAmine^{TM}$) and DNA(pEGFP-C1) need to be determined. The use of green fluorescent protein(GFP) gene as a reporter gene facilitated the quantifica...

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