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문제 정의
- 따라서 본 실험은 천연 항산화, 항 미생물 활성 을 나타내는 화합물을 분리 이용할 목적으로 국내 자원식물 86 종의 MeOH 추출물에 대 하여 일부 항산화 및 항미 생물 활성을 보이는 생 약자 원을 검색하였기에 그 결과를 보고한다.
제안 방법
- 1.5X10%! DPPH MeOH 용액 1ml를 첨가한 후, 30분간 실온에서 방치 후 UV spectrophotometer(517nm) 로 흡광도를 측정하였다. 시료를 첨가하지 않은 대조군의 흡광도를 1/2로 감소시키는데 필요한 시료의 양 (㎍) 을 RC50으로 나타냈으며 , 대조구로는 α-tocopherol 및 BHA를 사용하였다.
- 소실된다. 그러므로 식물 추출물의 항산화 활성 을 간단하게 측정할 수 있을 뿐만 아니 라실제 항산화활성과도 연관성이 매우 높으므로 이 방법을 적용하여 국내에서 자생하는 86종의 식물을 대상으로 MeOH 추출물을 이용하여 DPPH free radical 소거 활성 을 지 표로 항산화 활성을 검토한 결과를 Table 1에 나타낸 바와 같다. 전반적으로 활성이 있는 식물이 많이 발견되었으나 이 중 밤의 내피의 MeOH 추출물(RC50 = 5.
- 5X10%! DPPH MeOH 용액 1ml를 첨가한 후, 30분간 실온에서 방치 후 UV spectrophotometer(517nm) 로 흡광도를 측정하였다. 시료를 첨가하지 않은 대조군의 흡광도를 1/2로 감소시키는데 필요한 시료의 양 (㎍) 을 RC50으로 나타냈으며 , 대조구로는 α-tocopherol 및 BHA를 사용하였다.
- 역병은 각각 3일과 4일 후에 병반면적율을 조사하였다. 식물 병을 접종하여 병이 유발된 식물체에 2000㎍/ml 농도의 식물체 추출물을 고루 살포하여 발생 억제 효과를 조사하였다.
- 토마토 . 역병은 2엽기 토마토 유묘에 Phytophthora infestans의 유주자낭 현탁액 (105 유주자낭/ml)에서 나출된 유주자 현탁액을 분무, 접종한 후 20℃ 습실상에서 발병을 유도하였다. 한편 토마토 .
- 흰가루병은 7일 후 벼 · 잎집무늬마름병은 8일 후에, 그리고 토마토 잿빛곰팡이병과 토마토.역병은 각각 3일과 4일 후에 병반면적율을 조사하였다. 식물 병을 접종하여 병이 유발된 식물체에 2000㎍/ml 농도의 식물체 추출물을 고루 살포하여 발생 억제 효과를 조사하였다.
- .포자를 접종하고 항온실에서 발병시켰다. 대조구로는 1%의 DMSO를 혼합하고 있는 Tween 20 용액 (250 ㎍/ml) 30 ml을 사용하였다.
- 한편 작물에 발생하는 식물병 원균 (Table 2) 에 대한 병발생 억제 효과를 in vivo방법으로 조사하였다. 병의 발생을 억제한 방제가로서 다음의 공식으로 계산하였다.
- , 1993) 의 방법에 의한 DPPH free radical 소거법 에 의해 항산화 활성을 측정하였다. 흡광도는 MeOH 용액에 대하여 200~800nm에서 흡광도를 측정하여 최대 흡수파장(517nm) 을 결정하였고, 농도는 이 파장에서 각 농도별로 흡광도를 측정하여 활성검정에 가장 적합한 농도(1.5 × 10-4M) 를 결정 하였다.
- 녹병 {Pucdnia recondita), 보리 . 흰가루병 [Ery&phae graminis) 의 6가지 식물병에 대하여 in vivo 항 미생물 활성 검정을 실시하였다.
대상 데이터
- DPPH (1, 1 -diphenyl-2-picrylhydrazyl), α-tocopherol과 BHA는 Sigma사 제품, Methanol은 Junsei사 제품을 사용하였고, 시료 농축에 사용한 Rotary evoporater는 Yamato사 제품을 사용하였으며, 흡광도는 MILTON ROY COMPANY의 SPECTRONIC 20D를 사용하여 측정 하였다.
- 포자를 접종하고 항온실에서 발병시켰다. 대조구로는 1%의 DMSO를 혼합하고 있는 Tween 20 용액 (250 ㎍/ml) 30 ml을 사용하였다. 벼 .
- 본 실험에 사용한 시료는 1999년 9월 초순 광양 백운산 일대와 순천 조비마을에서 채취, 음건 후 잘게 부수고 MeOH로 실온에서 7일간 2회 냉침 추출하였다. 추출물을 여과지로 여과한 다음 rotary evaporator로 감압 농축하여 냉동고 (-20℃) 에 보관하면서 시료로 사용하였다.
이론/모형
- 각 시료는 최 등 (Choi et al., 1993) 의 방법에 의한 DPPH free radical 소거법 에 의해 항산화 활성을 측정하였다. 흡광도는 MeOH 용액에 대하여 200~800nm에서 흡광도를 측정하여 최대 흡수파장(517nm) 을 결정하였고, 농도는 이 파장에서 각 농도별로 흡광도를 측정하여 활성검정에 가장 적합한 농도(1.
성능/효과
- 또한 대표적인 식물병원균 중 6종의 균주를 사용하여 in vivo 방법으로 항미생물 활성을 검정한 결과 굴피나무, 비목나무, 산국, 소리쟁이, 가막사리, 아왜나무에서 90% 이상 의식 물병 원균의 생육 저해 효과를 보였다.
- 8㎍) 에서 a- tocopherol (RC50=12㎍) 과 BHA (RC50=14㎍) 에 비해 강한 활성을 보였고 느릅나무 (RC50= 12㎍) 에서도 활성이 비교적 강한 활성 을 보였고 개머루 (RC50=17㎍) , 사방오리(RC50=19㎍) 에서도 높은 항산화 활성을 보였다. 이상의 결과 항산화 활성이 확인된 15종의 식물 중 항산화 활성이 높았던 밤의 내피와 느릅나무를 대상으로 활성물질을 추적 분리하고 있다. 본 연구의 결과로 최근 인체의 질병의 대부분이 독성이 강한 활성산소종이 직 · 간접적으로 관여 한다고 하는데 (Wiseman, 1996) 밤은 예로부터 조상들이 즐겨먹던 식품으로 밤 껍질에 대한 항산화성에 대한 더욱 구체적인 실험을 수행하여 건강식품, 의약품 등의 소재로의 활용이 기대된다.
- 그러므로 식물 추출물의 항산화 활성 을 간단하게 측정할 수 있을 뿐만 아니 라실제 항산화활성과도 연관성이 매우 높으므로 이 방법을 적용하여 국내에서 자생하는 86종의 식물을 대상으로 MeOH 추출물을 이용하여 DPPH free radical 소거 활성 을 지 표로 항산화 활성을 검토한 결과를 Table 1에 나타낸 바와 같다. 전반적으로 활성이 있는 식물이 많이 발견되었으나 이 중 밤의 내피의 MeOH 추출물(RC50 = 5. 8㎍) 에서 a- tocopherol (RC50=12㎍) 과 BHA (RC50=14㎍) 에 비해 강한 활성을 보였고 느릅나무 (RC50= 12㎍) 에서도 활성이 비교적 강한 활성 을 보였고 개머루 (RC50=17㎍) , 사방오리(RC50=19㎍) 에서도 높은 항산화 활성을 보였다. 이상의 결과 항산화 활성이 확인된 15종의 식물 중 항산화 활성이 높았던 밤의 내피와 느릅나무를 대상으로 활성물질을 추적 분리하고 있다.
- 천연물유래의 안전하고 효과적인 항산화 화합물을 찾기 위하여 채취한 86종의 다양 한식 물체로부터 얻은 MeOH 추출물을 DPPH free radical 소거법을 이용하여 항산화활성을 검정한 결과 밤껍 질(RC50=5.8㎍) 과 느릅나무 (RC50=12㎍) 에서 대조구인 a-tocopherol (RC50=12㎍) 과 BHA(RC50=14㎍) 에 비해 강한 활성을 보였고 그 외 13종에서도 비교적 강한 활성을 나타내었다.
후속연구
- 따라서 이들의 항미생물 활성의 결과를 토대로 하여 약용 식물 및 주요 작물의 병 발생을 효과적으로 방제할 수 있고 동식물 및 환경에 해가 되지 않는 천연 항미생물제 개발을 위한 기초자료로 이용될 수 있으며 현재 구체적인 실험을 수행 중에 있다.
- 활성물질 탐구는 천연물로부터라는 인식이 보편화되어 있고 또한 대통령령에 의한 천연물 신약연구 개발 촉진법 시행령이 공포 (대통령 령 제 16952호, 2000)되면서 천연물로부터 활성 신물질 탐색연구는 더욱 활발하게 진행될 것이다. 따라서 자원식물을 생약으로 직접 이용하는 것보다 이들이 함유하고 있는 활성화합물을 탐색하여 신물질로서 개발 이용된다면 자원식물의 이용가치는 더욱 높아지게 될 것이 다.
- 이상의 결과 항산화 활성이 확인된 15종의 식물 중 항산화 활성이 높았던 밤의 내피와 느릅나무를 대상으로 활성물질을 추적 분리하고 있다. 본 연구의 결과로 최근 인체의 질병의 대부분이 독성이 강한 활성산소종이 직 · 간접적으로 관여 한다고 하는데 (Wiseman, 1996) 밤은 예로부터 조상들이 즐겨먹던 식품으로 밤 껍질에 대한 항산화성에 대한 더욱 구체적인 실험을 수행하여 건강식품, 의약품 등의 소재로의 활용이 기대된다.
- 활성물질 탐구는 천연물로부터라는 인식이 보편화되어 있고 또한 대통령령에 의한 천연물 신약연구 개발 촉진법 시행령이 공포 (대통령 령 제 16952호, 2000)되면서 천연물로부터 활성 신물질 탐색연구는 더욱 활발하게 진행될 것이다. 따라서 자원식물을 생약으로 직접 이용하는 것보다 이들이 함유하고 있는 활성화합물을 탐색하여 신물질로서 개발 이용된다면 자원식물의 이용가치는 더욱 높아지게 될 것이 다.
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