선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 감마선 조사기 술을 이 요하여 새 무 알러 지 를 감소시키기 위해 본 연구를 실시하뗬다. 감마선 조사구(A), 감마선 조사 후 가열 처리 구(B), 가열 처리 후 감마선 조사 구(C)로 실 험 구를 설정 하고 1, 3, 5, 7, 10 kGy의 감마선을 조사하여 실험에 사묭하였다.
- 본 연구는 방사선 조사기술을 이용하여 새우자체와 가열 처리한 세우의 알러지성을 감소시키고 적정 조사 선량의 탐색을 위해 실시하였다
제안 방법
- A 처리구로부터 세우의 근혈장 단백질 용액과 근섬유 단백질 용액을 준비하였고. B와 C 처리구에서도 각각의 단백질 용액을 준비하였다 각 단백질 용액에 대한 횐자 IgE와 £也比 4.9.5의 결합력을 ELISA 로 조사하였다. 두 항체 모두 감마선 조사구의 단백실 용엑과의 결합력이 감마선 조사선량이 증가할수록낮게 나타났고, 감마선 조사후 가열처리가 항체의 결합력을 감소 시 키는데 더 효과석 이 었다.
- Lacmmli(12)의 방법에 따라 김마선 조사된 새우로부더 추출한 SSPF와 SMPF에 대한 SDS-PAGE(5~15% gradient acrylamide gel)를 하여 새우 단백질의 전기 영동적 분리 형태의 년화를 관칠하였다. 표준분자량 marker는 Pharmacia Biotech.
- 위해 본 연구를 실시하뗬다. 감마선 조사구(A), 감마선 조사 후 가열 처리 구(B), 가열 처리 후 감마선 조사 구(C)로 실 험 구를 설정 하고 1, 3, 5, 7, 10 kGy의 감마선을 조사하여 실험에 사묭하였다. A 처리구로부터 세우의 근혈장 단백질 용액과 근섬유 단백질 용액을 준비하였고.
- 5)를 분먕 받아 사욤하였다 환자의 혈청은 시]우 알러지 병력이 있고 새우 allergen 추출물과 주요 새우 allergen인 Pen a 1에 대한 prick sldn wst에 양성 인 猊명의 환자에게 삶은 새우를 급여하여 과민반응을 유도한 후 즉시 혈액을 채취하고 혈청을 분리하여 실험에 사용하였다. 또한 비교구는 새 우 알러 지가 없는 5명 으로부터 혈액을 채취 하여 그 혈청을 사묭하였디..
- Kamstrup, Denmark)에 100 虬를 첨가하여 建C에서 하룻밤 동안 well 에 고정시켰고, 1%의 gelatine 용액 120 此를 첨가하여 blocking하였다. 일정하게 희석된 단빅질 용액 또는 표준 HSF용익과 적절히 희석한 항체용액을 가각의 well이] 50 UL 첨가하고 반응시킨 후 0.1 lig/mL로 희석한 2차 항체 mouse anti-human [gE/IgG에 horseradish peroxidase (HRP. Southem Biotechnologj- Associates, Inc. Binningham, AL, USA)를 공액 결합한 2차항체 용액 (흰자 IgE의 경우) 100 μL를 첨가하여 반음시킨 후, 이o-pheny-lenediamine(OPD, Sigma Chemical Co , St Lotus, MO, USA) 기짐욤액을 사용하여 발신!을 유도하고 2.0 M 压SCL 용액으로 반응을 종결시킨 후 492 nm로 고정한 ELISA Reader(CERES UV-900C, BIO-TEK Instruments Inc., NY, USA) 이]서 흡광도를 측성하여 microwell에 고정한 HSF와 항체의 반응정도를 구하여 HSP를 이엄■한 표준 곡선에서 각 단빅짙 용액에 존재하는 HSP를 정량하였다. 각 단계별 반응 후 well을 0.
- 구입하여 실험에 사묭하였다. 처리 조건에 따른 알러 지 억 제 효과를 비교하기 위해 실험구를 감마선 조사구(A), 감마선 조사후 가열처 리구(B), 가열처리 후 감마선 조사구(C)로 구분하였다.
- 환자 IgE와 mAb 4.95의 각 단백질 용액 에 대한 항체 반응성은 새우 HSP를 항원으로 하는 competitive indirect ELISA(Ci-ELISA)를 사용하여 측정하였다. HSP를 basic coating buffer©] M sodium carbonate, pH 9.
대상 데이터
- 표준분자량 marker는 Pharmacia Biotech. (Uppsala, Sweden)로부터 구입하여 사용하였고, marker는 phosphorylase b(94 KD), albumin(67 KD), ovalbumin(43 KD), carbonic anhydrase(30 KD). trypsin inliibitor(20, l KD) 및 a -lactalbuiiiin(l-L4 KD)이었다.
- 감마선 조사구(A), 감마선 조사 후 가열 처리 구(B), 가열 처리 후 감마선 조사 구(C)로 실 험 구를 설정 하고 1, 3, 5, 7, 10 kGy의 감마선을 조사하여 실험에 사묭하였다. A 처리구로부터 세우의 근혈장 단백질 용액과 근섬유 단백질 용액을 준비하였고. B와 C 처리구에서도 각각의 단백질 용액을 준비하였다 각 단백질 용액에 대한 횐자 IgE와 £也比 4.
- 전보(9)와 같은 방법으로 환자의 혈칭과 Jeoung 등(10) 의 연구에서 사용된 mouse 단클론 항체 (inAb 4.9.5)를 분먕 받아 사욤하였다 환자의 혈청은 시]우 알러지 병력이 있고 새우 allergen 추출물과 주요 새우 allergen인 Pen a 1에 대한 prick sldn wst에 양성 인 猊명의 환자에게 삶은 새우를 급여하여 과민반응을 유도한 후 즉시 혈액을 채취하고 혈청을 분리하여 실험에 사용하였다. 또한 비교구는 새 우 알러 지가 없는 5명 으로부터 혈액을 채취 하여 그 혈청을 사묭하였디.
- 지역 수산시장으로무터 냉장 갈색세우(尸ewEi/s oa-馄cus)를 구입하여 실험에 사묭하였다. 처리 조건에 따른 알러 지 억 제 효과를 비교하기 위해 실험구를 감마선 조사구(A), 감마선 조사후 가열처 리구(B), 가열처리 후 감마선 조사구(C)로 구분하였다.
이론/모형
- A, B, C의 단백질 추출은 Lee 등(11)의 방법을 이욤하였다. A는 껍실을 벗기고 머리 부위를 제거한 시료 20 g에 PBS 완충액 (0.
성능/효과
- B-ICSF와 같이 C-CISF에 대한 IgE와 mAb 4.9.5 항체 의 반응은 감마선 조사선 량이 즘가할수록 감소되 었으나, 결합력의 감소는 B-ICSF의 경우보다는 다소 적게 나타났다(Fig. 4). 이 겸과는 새우 단백질 특히, HSP의 경우 갑마선 조사 후 열처리 하였을 때 말러 젠의 구조변화에 더 효과적임을 나타냈다.
- mAb 4 9 5를 이용한 감마선 조사된 새 우로부터 추출한 SSFS와 SMPS 에 존재하는 HSP와의 반뭉성 을 비교한 결과(Fig 2), SSPS에서는 항원-항체 반응이 발견되지 않았으나, SMPS에서는 aiAb49.S와의 반믐이 뫂게 나타났다.
- 감마선 조사후 가열처리하여 준비한 B-ICSP에 대한환지-IgE와 mAb 4.9.5의 항체 반응성은 조사선랑이 증가할수록 감소되었다(Fig. 3). 새우 알러지는 원인 알터 센인 tropomyosin0] 열에 미]우 안정하기 때문에 가열 후에도 알러 지 성 을 jz대로 유지한디.
- 결론적으로, 새우 알러지 억제를 위한 감마선 조사기숲의 사용은 새우의 가공방법과 특성에 맞게 적절한 방사선 조사선량과 가공 처리에 의해 바람직한 효과를 얻을 수 있다. 현재 본 연구의 결과와 기타 연구자료(16)를 기초로 하여 10kGy 이상의 고선량에서 새우 알러지 억제 효과와 동물 임상시험 및 이 선량에서 王사된 새우의 독성학적, 영양학적 동물실험을 진행 중에 있다.
- 5의 결합력을 ELISA 로 조사하였다. 두 항체 모두 감마선 조사구의 단백실 용엑과의 결합력이 감마선 조사선량이 증가할수록낮게 나타났고, 감마선 조사후 가열처리가 항체의 결합력을 감소 시 키는데 더 효과석 이 었다. SDS-PAGE 결과 감마선 조사된 새우 단백질의 전기 영동적 분리 pattern에는 변화가 없었다 이 결과는 적절한 선량의 감마선 조사가 새우 알러지를 감소시킬 수 있다는 것을 시사한다
- . 따라서 가공적인 측면에서 볼 때 감마선 조사 후 가열처리한 새우의 알러지성이 감소된다는 결과는 감마신 조사에 의해 HSP를 포함한 알러젠의 구조가 면화하고 가열처리 에 의해 다시 복원되지 않는다는 것을 나타내며, 가열처리한 새우의 항원성 및 알러지성을 효과적으로 억제시키기 위해서는 10kGy이상의 선량이 요구된다.
- 전보(9)의 결과에서 지적 했듯이 HSP의 감마선 감수성과 감마선 조사된 새우 알러 젠의 감마선 감수싱 의 비 교는 임상적으로메우 중요하다. 새우 근육에 대한 감마선 조사의 효과는 IgE 결합력이 선랑에 의존하며 감소되는 것으로 나타났다. 흥미 있는 것은 IgE-specific 알러 젠이 두 용액에 모두 존재 한다는 것이다.
- 본 연구에서 사용한 환자 IgE는 근섬유 단백질 인 tropomyosin(13) 뿐만 아니라 수용성 인 새우의 다른 알러 젠도 인식 하였다(D. 이 결과로 볼 때 감마선 조사에 의해 새우 근육애 존재하는 다른 알러 젠의 구조도 변화된 것으로 추측할 수 있다. 한편, 이 결과는 새우를 이용한 스넥, 라면류 등의 가공식품에도 알러진이 존재한다는 것을 나타내며, 새우 알러지의 적절한 저감화 없이 제조된 식품에서 알러치가 유발된다는 의학계의 보고를 뒷받침 한다.
- 특히 새우와 같은 종류의 식품은위에서 소개한기술을 이용하기는거의 뷸가능하다. 전보(9)에서 보고한 바와 같이 새우 발러지를억제할 방법으로 방사선 조사기 술의 이 용을 평가한 결과 새 우의 HSP는 감마선 에 대해 감수성 이 매우 높은 것을 확인할 수 있었다.
- 이 결과로 볼 때 감마선 조사에 의해 새우 근육애 존재하는 다른 알러 젠의 구조도 변화된 것으로 추측할 수 있다. 한편, 이 결과는 새우를 이용한 스넥, 라면류 등의 가공식품에도 알러진이 존재한다는 것을 나타내며, 새우 알러지의 적절한 저감화 없이 제조된 식품에서 알러치가 유발된다는 의학계의 보고를 뒷받침 한다. 새우 알러 지를 효과적으로 억 제하기 위해서는 10 kGy이싱-의 감마선 조사선량이 요구된다.
- 환자 IgE는 갈색 새우로부터 추출한 SSPS와 SMPS 모두이서 알러 젠을 인식 하였고, 각 분획 에 대한 IgE의 반음 성은 감마선 조사선량이 증가할수록 감소되었다(Fig. 1). 10 kGy 조사구에 대한 환자 也E의 결합력은 두 용액 모두 비조사구에 비헤 30% 이하로 나타났다.
후속연구
- 있다. 현재 본 연구의 결과와 기타 연구자료(16)를 기초로 하여 10kGy 이상의 고선량에서 새우 알러지 억제 효과와 동물 임상시험 및 이 선량에서 王사된 새우의 독성학적, 영양학적 동물실험을 진행 중에 있다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.