[논문]황색포도상구균의 Capsular Polysaccharide (CPS)의 생산 및 정제에 관한 연구

한홍율; 박희명

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황색포도상구균의 Capsular Polysaccharide (CPS)의 생산 및 정제에 관한 연구
Studies on the Production and Purification of Capsular Polysaccharide (CPS) of Staphylococcus aureus 원문보기

韓國臨床獸醫學會誌= Korean journal of veterinary clinical medicine, v.17 no.1, 2000년, pp.145 - 151

한홍율 (서울대학교 수의과학대학 내과학교실) , 박희명 (서울대학교 수의과학대학 내과학교실)

초록
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황색포도상구균이 Capsular polysaccharide (CPS)는 백혈구의 탐식에 저항하기 때문에 젖소의 유방염 발생의 중요한 병원상 인자로 오랫동안 연구자들의 관심이 집중되어 왔다. 따라서 CPS는 젖소의 유방염을 최소화시키기 위한 유방염 백신개발에 있어 잠재적인 백신 항원물질로 알려져 왔다. 본 연구의 복적은 황색포도상구균의 CPS 항원물질을 좀더 효과적으로 발현시키고 향후 백신항원으로 사용시 좀 더 간편하게 정제하는 방법을 찾아보고자 본 연구를 수행하였다. CPS는 락토스와 덱스트로스를 첨가한 brain heart infusion media 에서도 부분적으로 발현되었지만 CPS가 가장 잘 발현되는 배지 조건은 젖소 유래의 유청을 10% 첨가한 조건에서 가장 발현율이 높았다. 또한 CPS발현은 salt agglutination test, india ink법 및 투과전자현미경을 이용하여 확인하였으며 균체표면의 hydrophobicity에서는 락토스, 덱스트로스 및 젖소 유래의 유청을 첨가한 배지조건에서 다른 조건에 비해 높았다. CPS의 가장 손쉬운 검사법은 균체를 절편하지 않고 직접 투과전자현미경상에서 염색없이 관찰하는 것이 가장 간편한 방법이었다. CPS정제는 상층액을 농축시킨후 이온교환크로마토그라피와 젤 여과법을 이용하여 정제하였으며 CPS의 분자량은 대부분 97kDa이상이었다. CPS 회수율은 배지와 균체 1리터당 1.5mg이었다. 결론적으로 CPS를 백신항원으로 포함하고자 할 경우, CPS의 최적 발현조건은 젖소 유래의 유청을 10% 첨가한 Brain heart infusion 배지에서 배양하여 사용하는 것이 가장 좋은 방법이라고 생각된다.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

The purpose of this study was to find the optimal conditions for production and purification of CPS with simple, efficient and large scale.

대상 데이터

5 M NaCl. The eluted materials were analyzed by a GeneQuant II(Pharmacia Biotech) at 260, 280 nm and 615 nm (Skan Soft I). Elutes con taining CPS were pooled and concentrated with PEG 8000 (Sigma).

이론/모형

The absorbance was measured at 615 nm after 10 min. Determination of CPS concentration was measured by the colorimetric method of Sandford et al.19. Two ml of CPS solution was pippeted into a glass tube.

성능/효과

Conclusionally, when CPS was included in mastitis vaccine, optimal growth medium of CPS expression was BHI broth supplemented with 10% bovine milk whey.

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