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제안 방법
- 1压 및 13C-NMR spectrume Brucker AMX500 spectrometer로, MS spectrume VG70-VSEQ(VG Analytical, UK)으로 측정하였다. 추출 및 column 산iromatography용 용매는 1급시약을, 기타 시약은 1급 또는 특급을 사용하였다.
- 5 kg을 methanol (MeOH)로 상온에서 5회 반복추출하고 60℃에서 3회 추출하여 얻어진 추출액을 감압농축하여 120g의 MeOH 추출물을 얻었다. 이를 증류수에 현탁시킨후 hexane (800m/x3), chlorofonn(800mix2) 및 butanol(800 rWx2)로 분획하여 각각 55g, 6g 및 30g의 용매 분획물을 얻었다. 이 중 hexane분획은 drag endo 曲']약에 대하여 양如반응을 보였으며, 발색강도로 보아 alkaloid 함량이 많을 것으로 추측되었다.
- 91). 이상의 자료를 기초로 하여 화합물 1 을 N-methylleucinyl-a-hydroxy-isovaleryl amide를 기본 unit로 한 cyclode-psipeptide로 추정하였다. 분자량을 (M+ m/z 908) 통해 화합물 1이 tetramer이고 48개의 탄소로 구성되어 있다고 추정할 수 있다.
- IR 스펙트럼에서 1663와 1746 cmT에서 amide carbonyl group과 ester carbonyl group에 의한 흡수 band를 관찰할 수 있었고, EI-MS 스펙트럼에서 m/z 908의 분자이온 피크 (M+) 가 관찰되었다. 이상의 자료와 NMR 스펙트럼의 양상을 기초로 하여 화합물 1은 cyclopeptide 유도체로 추정하였다.心)1H-NMR 스펙트럼과 HOMO 2D Jresolved 1H-NMR 스펙트럼에서 60.
- D 본 연구의 시료인 백강잠 101A는 농촌진흥청잠사곤충부에서 백강균의 아종인 Beatiberia bassiana 101A를 새로이 개발하여 유충의 피부에 접종하여 일정조건하에서 사육하여 얻은 것으로서, 농업과학기술원 및 생 명 공학연구소에서 기존의 백강균인 Beauberia bassianct와 새로운 균주인 Beauberia bassiana 101AI DNA sequence 연구결과 염기서열이 동일하다고 입증하였다. 저자등은 이 균주에 의하여 형성된 백강잠 101A의 메탄올 엑기스에서 2종의 세포독성 steroid물질을 보고한 바 있으며, 2)계속적인 활성성분에 대한 연구의 일환으로 alkaloid 성분연구를 수행하여 핵산분획으로부터 2종의 cyclodepsipeptide 물질인 bassianolide (1)과 beaubericin (2)을 분리하여 구조를 동정하였다. 화합물 1과 2는 5종의 암세포주에 대하여 139-1.
- 6)이상의 자료로부터 화합물 1은 methylleucinyl-a-hydroxy-isovaleryl amide의 cyclic tetramer ester형태의 bassianolideS. 추정하였고, 기존문헌6)과 비교하여 그 구조를 확인 동정하였다.
대상 데이터
- 추출 및 column 산iromatography용 용매는 1급시약을, 기타 시약은 1급 또는 특급을 사용하였다. Column chromatography용 silica g아은 Kiesel gel 60 (70—230 and 230—400 mesh, ASTM Art. 7734 and 9385, Merck)을 사용하였고, reverse phase column chromatography용 충진제는 LiChroprep RP-18 (40-63 gm, Art. 13900, Merck)> 사용하였다. LPLC는 LiChroprep Si60 Lobar®-B column (Art.
- 13900, Merck)> 사용하였다. LPLC는 LiChroprep Si60 Lobar®-B column (Art. 10401, Merck)을 사용하였다. TLC plate는 Kiesel gel precoated plate (Art.
- 백강잠 lelMPombycis corpus, 1.5 kg)은 농촌진흥청 잠사곤충부에서 공급받아 사용하였다.
- 실험에 사용한 암세포주들은 A549 (non small cell lung carcinoma), SK-OV-3 (ademoncarcinoma, ovary malignant ascites), SK-MEL-2 (malignant melanoma, metastasis to skin of thigh), XF-498 (central nerve system tumor) 및 HCT-15 (conlon ademocarcinoma) 등이다.
이론/모형
- 세포독섬실험 - 세포독성 실험은 Sulforhodamin B Bioassay (SRB) 방법‘埋 응용하여 한국화학연구소에서 수행하였다. 실험에 사용한 암세포주들은 A549 (non small cell lung carcinoma), SK-OV-3 (ademoncarcinoma, ovary malignant ascites), SK-MEL-2 (malignant melanoma, metastasis to skin of thigh), XF-498 (central nerve system tumor) 및 HCT-15 (conlon ademocarcinoma) 등이다.
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