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문제 정의
- 따라서 본 연구자들은 흑진주벼로부터 안토시아닌 색소 cyanidin 3-glucoside(C3G)분획을 대량으로 추출 및 분리하여 안정성에 대한 동물 실험한 결과를 보고한다.
제안 방법
- 동물실험을 위한 색소는 흑진주벼 10 kg를 이용, 도정한 후 부산물로 나오는 쌀겨를 이용하여 Fig. 1과 같이 추출하여 사 용하였으며 추출물의 C3G의 순도는 96%로 45 g을 확보하였다. 추출물을 4℃에 보관하면서 사용하였으며, 이 추출물은 1% CMC에 현탁하여 시험물질로 사용하였다.
- ICR계 생쥐를 본 연구소에서 분양받아 실험동물실에서 1주일이상 적응시킨 다음 실험에 사용하였다. 동물실 내의 명암은 12시간씩으로 자동조절 시켰으며, 온도는 22~25℃를 유지토록 하였고, 삼양유지(주)의 사료와 정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다.
- 순화기간 중 건강하다고 판정된 생쥐에 대하여 체중을 측정 하고 암수 각 24수를 암수별로 구분하고 투여용량별로 각각 6 수씩 군 분리를 하였다. 동물의 개체식별은 Tag 표시법으로 하여 경구로 투여하였다.
- 동물의 개체식별은 Tag 표시법으로 하여 경구로 투여하였다. 투여용량의 설정은 색소추출물을 최대 용량을 9000㎎/㎏으로 하여, 3개 용량군과 대조군으로 나누어 Table 1과 같이 실시하였다. 실험동물의 체중범위는 수 컷 21g~27g 및 암컷 18 g~24 g이었다.
- 사용된 mice는 하룻밤 절식시킨 다음, 시험물질을 체중 kg 당 10 ml씩 투여되도록 1% CMC 용액에 색소추출물을 현탁하여 제조하였으며, 대조군은 1% CMC용액만을 경구로 투여하였다. 시험물질의 제조는 투여직전에 하였으며, 투여액량은 투여직전의 체중에 따라 산출하였고 1회 투여하였다.
- 모든 시험동물에 대한 상태는 투여 당일은 투여 후 6시간까지 매시간 관찰하였으며, 투여 익일부터는 14일까지 매일 1회씩 동물의 사망 발현 유무를 관찰하였다.
- 모든 시험동물에 대한 상태는 투여 당일은 투여 후 6시간까지 매시간 관찰하였으며, 투여 익일부터 14일까지 매일 1회씩 동물의 일반상태의 변화, 중독증상 및 사망 발현 유무를 관찰하였다.
- 경구 투여한 동물에 대해서는 시험물질 투여 직전과 투여 후 2일 간격인 2일, 4일, 6일, 8일, 10일, 12일 및 14일째에 체중을 측정하였다.
- 관찰기간 종료 후 모든 동물을 에테르로 마취하여 치사시킨 다음, 외관 및 내부 장기의 이상 유무를 육안적으로 상세히 관찰하였다.
- 사용된 mice는 하룻밤 절식시킨 다음, 시험물질을 체중 kg 당 10 ml씩 투여되도록 1% CMC 용액에 색소추출물을 현탁하여 제조하였으며, 대조군은 1% CMC용액만을 경구로 투여하였다. 시험물질의 제조는 투여직전에 하였으며, 투여액량은 투여직전의 체중에 따라 산출하였고 1회 투여하였다.
대상 데이터
- 시험구역은 서울대학교 천연 물과학연구소 실험 동물실에서 실시하였다. ICR계 생쥐를 본 연구소에서 분양받아 실험동물실에서 1주일이상 적응시킨 다음 실험에 사용하였다.
- 시험구역은 서울대학교 천연 물과학연구소 실험 동물실에서 실시하였다. ICR계 생쥐를 본 연구소에서 분양받아 실험동물실에서 1주일이상 적응시킨 다음 실험에 사용하였다. 동물실 내의 명암은 12시간씩으로 자동조절 시켰으며, 온도는 22~25℃를 유지토록 하였고, 삼양유지(주)의 사료와 정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다.
데이터처리
- 체중측정의 결과 표시는 평균과 표준편차로 나타내었으며, 유의성 검정은 Student's t-test 및 Dunnett's t-test를 사용하였다.
이론/모형
- 순화기간 중 건강하다고 판정된 생쥐에 대하여 체중을 측정 하고 암수 각 24수를 암수별로 구분하고 투여용량별로 각각 6 수씩 군 분리를 하였다. 동물의 개체식별은 Tag 표시법으로 하여 경구로 투여하였다. 투여용량의 설정은 색소추출물을 최대 용량을 9000㎎/㎏으로 하여, 3개 용량군과 대조군으로 나누어 Table 1과 같이 실시하였다.
성능/효과
- 검체를 생쥐에 1회 경구 투여한 결과는 Table 2와 같으며 대조군 및 전체 시험물질 투여군의 암수 모든 동물군에서 사망 예는 발견되지 않았다. 따라서 중간 치사량을 계산할 필요가 없었으며 최소치사량은 9000 ㎎/㎏ 이상의 경구 용량임을 알 수 있었다. 본 시험물질의 경구 투여시 중간치사량(LD50)은 암수 모두 9000 ㎎/㎏ 이상이었다.
- 따라서 중간 치사량을 계산할 필요가 없었으며 최소치사량은 9000 ㎎/㎏ 이상의 경구 용량임을 알 수 있었다. 본 시험물질의 경구 투여시 중간치사량(LD50)은 암수 모두 9000 ㎎/㎏ 이상이었다.
- 이상의 실험결과를 요약하면, 흑진주벼 색소추출물의 급성 독성 실험에서 생쥐의 암수 모두 9000 ㎎/㎏의 대량 경구 용량에서도 사용한 6마리가 모두 사망하지 않았으며, 투여군 모두의 경구 용량에서 14일간 측정한 체중변화는 대조군과 유의성 있는 변화를 관찰할 수 없었으며, 증상의 이상도 관찰할 수 없었다.
- 또한 부검 결과도 특별한 외견상 이상도 발견되지 않았다. 따라서 생체내에서 안전성이 높은 물질임을 알 수 있었다.
후속연구
- , 1998) 등 다양한 연구결과가 보고되고 있다. 따라서 anthocyanine 색소로써의 효용가치뿐만 아니라 BHT, BHA와 같은 합성항산화제를 대체하여 사용될 수 있는 것으로 보인다. 그러나 유색미 추출 색소의 항산화기능은 일부 밝혀지고 있으나, 이들 물질의 섭취량에 따른 안전성에 대한 연구결과는 발표된 바가 없다.
- 검체 투여 14일 후에 실시한 부검결과, 전투여군에서 본 시험물질의 투여에 기인한다고 사료되는 어떠한 유의할 만한 병변을 관찰하지 못하였다.
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