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문제 정의
- 따라서 본 연구는 한우에 있어서 생체내 난자 채취 기술과 체외수정 기술을 접목하여 고능력 한우로부터 수정란을 대량 생산하기 위한 기초 연구로서, 발정주기에 따른 난소의 크기와 난포의 발육 양상을 초음파 진단기를 이용하여 조사하였으며, 여러 마취 . 진정제를 조합 이용하여 마취효과를 조사하였다.
- 따라서 본 연구는 한우에 있어서 생체내 난자 채취 기술과 체외수정 기술을 접목하여 고능력 한우로부터 수정란을 대량 생산하기 위한 기초 연구로서, 발정주기에 따른 난소의 크기와 난포의 발육 양상을 초음파 진단기를 이용하여 조사하였으며, 여러 마취 . 진정제를 조합 이용하여 마취효과를 조사하였다.
제안 방법
- 한우 난소의 특징을 조사하기 위해서, 미경산 도축 암소의 난소를 좌우측 구분을 하고 육안적 관찰에 의하여 캘리퍼스로 크기를 측정하였으며, 초음파진단기에 의한 난소의 크기 및 발정주기중의 난포의 발육양상은 축산기술연구소에서 사육하고 있는 미경산우 10 두를 이용하여 2회의 발정주기 동안 3일 간격으로 6. 5MHz 탐촉자가 부착된 Sonoace 600 (Medison 사, 한국)기기를 이용하여 발정주기에 따른 난소의 크기 및 난포의 발달수를 조사하였다. 난포는 크기에 따라 직경 2〜3 mm 난포는 소난포로, 4~7 mm 난포는 중 난포로, 8 mm 보다 큰 난포는 대난포로 분류하여 조 사를 하였다.
- 5MHz 탐촉자가 부착된 Sonoace 600 (Medison 사, 한국)기기를 이용하여 발정주기에 따른 난소의 크기 및 난포의 발달수를 조사하였다. 난포는 크기에 따라 직경 2〜3 mm 난포는 소난포로, 4~7 mm 난포는 중 난포로, 8 mm 보다 큰 난포는 대난포로 분류하여 조 사를 하였다.
- 7ml의 2% xylazine hydrochloride (Rompun ®, Bayer, Korea)을 근육주사하고 , 부가적으로 5, 10 또는 20ml의 lidocaine HC1 (광명, 한국)을 이용 경막외 마취를 하였다. 또한 OPU 시술시 직장 주변의 평활근을 이완시켜 난소의 조직을 용이하게 하기 위하여 vetrabutin hydrochloride (Monzal , BASF Labiana, Spain) 을 5ml 또는 10ml를 근육주사하거나 detomidine hydrochloride (Domosedan: Smit- h- Kline Beecham Animal Health. Finland)을 체중 100 kg당 0.1 ml를 정맥주사하였다. 또한 자궁경부 주변에 마취를 유도하여 주사바늘 통과시 고통을 줄이기 위해 lidocaine HC1 을 2 ml을 도포하여 OPU 시술시 난소를 자유롭게 만질 수 있는 정도의 차이로서 마취효과의 수준을 조사하였다.
- 1 ml를 정맥주사하였다. 또한 자궁경부 주변에 마취를 유도하여 주사바늘 통과시 고통을 줄이기 위해 lidocaine HC1 을 2 ml을 도포하여 OPU 시술시 난소를 자유롭게 만질 수 있는 정도의 차이로서 마취효과의 수준을 조사하였다. 채란자의 주관적인 판단으로 마취효과를 조사하였는 데 이는 생체로부터 난포란을 채란하는 연구자가 아니면 체내에서 느끼는 마취의 정도를 정확히 알 수 없으나, 최대한으로 객관적으로 판단하려고 노력하였다.
- 채란자의 주관적인 판단으로 마취효과를 조사하였는 데 이는 생체로부터 난포란을 채란하는 연구자가 아니면 체내에서 느끼는 마취의 정도를 정확히 알 수 없으나, 최대한으로 객관적으로 판단하려고 노력하였다. 마취효과는 공란우가 채란시 서 있으면서 요동이 있는 수준의 차이로 진정 효과의 정도를 나타내고, 공란우가 채란용 바늘 천자 시 움직이거나 통증(후구요동)을 보이는 정도로서 후 구의 마취 정도를 조사하였고, 공란우에 대해 채란자의 손이 직장내에 들어가서 난소를 촉지하기가 자유로운 정도로서 직장의 이완 정도를 조사하였다. 만약 마취제를 과량 사용한 경우는 채란을 실패하는 경우가 있을 수도 있다.
- 따라서 본 연구는 한우에 있어서 생체내 난자 채취 기술과 체외수정 기술을 접목하여 고능력 한우로부터 수정란을 대량 생산하기 위한 기초 연구로서, 발정주기에 따른 난소의 크기와 난포의 발육 양상을 초음파 진단기를 이용하여 조사하였으며, 여러 마취 . 진정제를 조합 이용하여 마취효과를 조사하였다.
- 한우 난소의 특징을 조사하기 위해서, 미경산 도축 암소의 난소를 좌우측 구분을 하고 육안적 관찰에 의하여 캘리퍼스로 크기를 측정하였으며, 초음파진단기에 의한 난소의 크기 및 발정주기중의 난포의 발육양상은 축산기술연구소에서 사육하고 있는 미경산우 10 두를 이용하여 2회의 발정주기 동안 3일 간격으로 6. 5MHz 탐촉자가 부착된 Sonoace 600 (Medison 사, 한국)기기를 이용하여 발정주기에 따른 난소의 크기 및 난포의 발달수를 조사하였다.
- 한우에 있어서 발정주기중 난포수의 발달수를 조사하기 위하여 정상발정 주기를 보이는 한우 10두를 공 시하여 3일마다 초음파진단기기를 이용하여 조사한 결과는 Fig. 1과 같다.
대상 데이터
- 공란우의 체중은 390± 10kg 이었으며, 공란우는 보정틀에 보정시킨 후 진정을 유도하기 위해 0.3, 0.5 또 는 0.7ml의 2% xylazine hydrochloride (Rompun ®, Bayer, Korea)을 근육주사하고 , 부가적으로 5, 10 또는 20ml의 lidocaine HC1 (광명, 한국)을 이용 경막외 마취를 하였다. 또한 OPU 시술시 직장 주변의 평활근을 이완시켜 난소의 조직을 용이하게 하기 위하여 vetrabutin hydrochloride (Monzal , BASF Labiana, Spain) 을 5ml 또는 10ml를 근육주사하거나 detomidine hydrochloride (Domosedan: Smit- h- Kline Beecham Animal Health.
데이터처리
- 모든 자료는 -분석법과 Student t-test 검정법으 로분석하였다.
성능/효과
- 1. 한우의 난소의 크기는 도축 난소의 실측치와 생 체에서 초음파진단기를 이용한 측정치간에 유의 적인 차이가 인정되지 않았으며, 발정주기중 난포기때와 황체기때 크기를 비교해도 유의적인 차는 인정되지 않았다.
- 2. 한우의 발정주기중 난소내 발육하는 소난포와 중 난포의 수는 3일과 12일 째에 증가하는 한 발정 주기에 2회의 난포발육기가 있었다.
- 3. 한우의 최적 마취조합은 0.3ml의 Rompun®을 근육주사하고 5ml의 lidocaine을 경막외 마취한 후 lidocaine 2㎖을 자궁경에 도포하는 경우였다.
- 만약 마취제를 과량 사용한 경우는 채란을 실패하는 경우가 있을 수도 있다. 다시 말해서, 진정효과에 대한 기준은 공란우가 채란자에 대해 공포감을 표시하거나 공란우가 요동이 있는 상태를 가지고 등급을 나누었으며, 후구의 마취 정도는 공란우에 채란용 바늘이 자궁경 옆 근육으로 천자될 때 움찔하거나 움직여서 통증을 나타 내는 정도로서 점수를 나타내었는데 바늘의 천자시 움직이지 않거나 통증을 나타내지 않으면 높은 점수를 주었다.
- 이러한 보고자간의 차이가 품종간의 차이에서 기인된 것인지는 더 많은 두수를 이용 구명할 필요가 있다고 사료된다. 또한 본 연구에서 얻어진 E처리구에서 가장 좋았던 결과는 소량의 Rompun®에 의하여 진정이 된 후 lid ocaine 경막외 마취로 후구의 마취효과를 유도하며, 동시에 이 개체를 자궁경관 주변에 도포하여 줌으로써 경부 주변의 표면마취의 효과로 인하여 생체내 난자 채취를 위한 마취반응이 나타난 것으로 사료된다.
- 3ml의 Rompun®을 근육주 사하고 10ml의 lidocaine을 경믹외 마취한 후 10ml의 Monzal®을 근육주사하는 경우였다. 마취반응을 살펴 보면 모든 마취제 조합에서 전신마취는 효과적이었으나 척추마취와 직장의 이완 정도는 마취제 조합간에 유의적인 차이가 있었다(P<0.05).
- 직장의 이완 정도는 채란자가 난소를 자유롭게 만질 수 있는 수준의 차이로서 점수를 나타내었는 데, 각 항목에서 점수가 높을수록 공란우에 대해 채란이 쉬웠다는 것을 나타냈다. 자궁경부 주변의 마취는 국소마취 제인 Lidocaine HC1 의 표면 마취효과를 이용하였는데, 마취제의 도포는 인공수정용 sheathe를 이용하여 경부 주변에 도포를 하고 경부 주변을 손으로 주물러서 마취범위를 넓혔다.
- 채란작업에서 마취의 정도를 계수화하여 합한 값을 total score에 나타내었는데 점수의 크기는 생체내로 부터 미성숙난포란을 채란하기가 용이하였다는 것을 의미한다. 점수가 높은 조합은 다른 마취제 조합에 비해 채란이 용이하였다는 것을 의미 한다.
- 한우의 난소를 초음파기기로 측정하는 값과 실제 계측기와의 실측치에 차이가 있는지를 알아보기 위해서, 동일한 난소를 가지고 난소를 측정해 본 결과 난소를 캘리퍼스로 실측한 결과와 초음파기기를 이용 측정한 측정치간에 유의적인 차이가 없었다. 그리고 좌측 또는 우측 난소 그리고 발정주기 중의 난포기 또는 황체기에 따른 크기에 있어서도 유의적인 차이(P<0.
- 한우의 발정주기중 난소내 직경 8 mm 이상의 대난포수는 1〜 1.5개로 발정주기중 차이가 없었으나, 직경 4~7 mm의 중난포와 2〜3 mm의 소난포수는 발정주기 3일째와 12일째에 2번의 정점이 조사되었으며, 2~3 mm의 소난포 수의 경우 발정주기 18일에 증가하는 경향을 보였다. 이와 같이 한우는 한 발정주기에 2희의 난포 발육주기를 보였다.
후속연구
- 이러한 차이는 조사하는 난소의 발정주기중의 시기, 즉 황체기 또는 난포기에 있는 비율, 도축되는 암소의 연령, 질병 유무, 영양상태 둥의 난소의 크기에 영향을 미치는 여러 요인들의 차이에서 기인된 것으로 사료된 다. 또한 본 연구에서 얻어진 도축 난소를 이용한 실측 치와 초음파기기를 이용한 측정치간에 차이가 없었던 결과는 금후 한우를 이용 생체내 난자채취에 관한 연 구에 중요한 기초 자료가 될 것으로 사료된다.
- 또한 Ginther 둥(1989)은 발정주기 중의 난포발육기를 조사한 결과 2회의 발육기를 가진 개체의 경우에 1회는 배란일(발정 주기 0일) 그리고 2 회째는 발정주기 10일째에 난포의 발육이 시작이 되 며, 3회의 발육기를 가진 경우는 발정주기 0, 9 및 16 일째에 시작된다고 하여 본 연구에서 얻어진 소난포와 중난포의 수가 3일째와 12일째에 증가하는 주기가 조사되어 다소 다른 경향을 나타내었다. 이와 같은 다소의 차이는 Bo 등(1995)이 보고한 난포 발육주기가 개체간의 변이가 있으며 특히 2회째 발육시작기에 심하다는 결과로 미루어 볼 때, 한우 품종의 특성으로 사료 되며, 본 연구에서 얻어진 한우의 발정주기 중 난포 발 육주기에 관한 결과는 금후 난포란의 채란시나 수정 란 이식 기술의 문제점의 일부분인 과배란처리시 다난포의 발육이 부진한 문제점을 해결할 수 있는 기초 결과 로 활용될 수 있을 것이라 사료된다.
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