[국내논문]한우에 있어서 초음파기기를 이용한 생체내 난자 채취에 관한 연구 II.난포란의 반복 채취가 난자 회수 및 발정주기에 미치는 영향 Studies on the Ultrasound-guided Transvaginal Retrieval of Oocytes in Korean Native, Hanwoo Heifers II. Effects of Repeated Ovum Pick-up on Oocyte Recovery and Estrous Cycle원문보기
본 연구는 한우에 있어서 초음파기기를 이용하여 반복적으로 생체내 난자를 회수시 난자회수에 미치는 영향과 시술후의 난소 유착과 같은 부작용을 조사하기 위하여 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 난포란의 채란빈도에 따른 채란수에서는 주 2회 시술시 난포수는 8.7$\pm$4.2개로 주 1회 시술의 10.2$\pm$6.1개보다 다소 적었으나 유의적인 차이는 인정되지 않았으며, 채란수도 각각 4.1$\pm$3.4개 및 4.3$\pm$2.9개로 유의적인 차이가 인정이 되지 않았다(P＜0.05). 2. 반복적으로 9회 난포란을 채란한 경우 40개의 난소중 8개 (20%)가 유착이 발생하였으며 1~3 채란시 3개 (37.5%), 4~6 채란시 4개 (50%) 7~9회 채란시 1개(12.5%)가 유착이 발생하였다. 3. 반복적인 난포란 채란후 난소의 유착 여부에 따른 공란우의 발정주기를 조사한 결과 난소 유착을 보인 공란우의 8두중 7두(87.5%) 25일 이상의 장발정주기를 보였으며, 유착이 일어나지 않은 12두 중 정상 발정주기는 6두(50.0%), 단 발정주기는 1두(8.3%), 장발정주기는 5두(41.7%)였다.
본 연구는 한우에 있어서 초음파기기를 이용하여 반복적으로 생체내 난자를 회수시 난자회수에 미치는 영향과 시술후의 난소 유착과 같은 부작용을 조사하기 위하여 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 난포란의 채란빈도에 따른 채란수에서는 주 2회 시술시 난포수는 8.7$\pm$4.2개로 주 1회 시술의 10.2$\pm$6.1개보다 다소 적었으나 유의적인 차이는 인정되지 않았으며, 채란수도 각각 4.1$\pm$3.4개 및 4.3$\pm$2.9개로 유의적인 차이가 인정이 되지 않았다(P＜0.05). 2. 반복적으로 9회 난포란을 채란한 경우 40개의 난소중 8개 (20%)가 유착이 발생하였으며 1~3 채란시 3개 (37.5%), 4~6 채란시 4개 (50%) 7~9회 채란시 1개(12.5%)가 유착이 발생하였다. 3. 반복적인 난포란 채란후 난소의 유착 여부에 따른 공란우의 발정주기를 조사한 결과 난소 유착을 보인 공란우의 8두중 7두(87.5%) 25일 이상의 장발정주기를 보였으며, 유착이 일어나지 않은 12두 중 정상 발정주기는 6두(50.0%), 단 발정주기는 1두(8.3%), 장발정주기는 5두(41.7%)였다.
This study was conducted to determine the effect of repeated ultrasound-guided transvaginal retrieval of oocytes recovery, estrous cycle and ovarian adhesion in Korean native, Hanwoo heifers. Heifers were at unknown stages of the estrous cycle at the start of experiments in which all follicles ...
This study was conducted to determine the effect of repeated ultrasound-guided transvaginal retrieval of oocytes recovery, estrous cycle and ovarian adhesion in Korean native, Hanwoo heifers. Heifers were at unknown stages of the estrous cycle at the start of experiments in which all follicles $\geq$6mm in diameter were ablated. The results obtained in this study were as follows; Follicle developing number and oocytes collected number were no effected to repeated OPU to nine session, 4 e.a range oocytes collected to repeated OPU session. Oocytes were observated follicles were 8.7$\pm$4.2 e.a, collected oocytes were 4.1$\pm$3.4 e.a to two times collected per week and observated follicles was 10.2$\pm$6.1 e.a, collected oocytes were 4.3$\pm$2.9 e.a to one times collected per week, but no difference significantly(P＜0.05). Ovaries adhesive percentage to repeated OPU was eight ovaries adhisived(20%) of forty ovaries, three ovaries(7.5%) to 1~3 times oocytes collected, four ovaries(l0%) to 4~6 times, one ovaries(2.5%) to 7~9 times oocytes collected session. To repeated OPU effection, ovaries adhisive heifers were long estrous cycle(＞25 day) to 7 heads(87.5%) of 8 head, non-adhesive ovaries heifers were 5 heads(41.7%) were long estrous cycle to repeated OPU 12 heads. Although, now unknown about the dynamics of follicles wave and about functional changes to repeated OPU ovaries, more question about ovaries adhesive cause remain.
This study was conducted to determine the effect of repeated ultrasound-guided transvaginal retrieval of oocytes recovery, estrous cycle and ovarian adhesion in Korean native, Hanwoo heifers. Heifers were at unknown stages of the estrous cycle at the start of experiments in which all follicles $\geq$6mm in diameter were ablated. The results obtained in this study were as follows; Follicle developing number and oocytes collected number were no effected to repeated OPU to nine session, 4 e.a range oocytes collected to repeated OPU session. Oocytes were observated follicles were 8.7$\pm$4.2 e.a, collected oocytes were 4.1$\pm$3.4 e.a to two times collected per week and observated follicles was 10.2$\pm$6.1 e.a, collected oocytes were 4.3$\pm$2.9 e.a to one times collected per week, but no difference significantly(P＜0.05). Ovaries adhesive percentage to repeated OPU was eight ovaries adhisived(20%) of forty ovaries, three ovaries(7.5%) to 1~3 times oocytes collected, four ovaries(l0%) to 4~6 times, one ovaries(2.5%) to 7~9 times oocytes collected session. To repeated OPU effection, ovaries adhisive heifers were long estrous cycle(＞25 day) to 7 heads(87.5%) of 8 head, non-adhesive ovaries heifers were 5 heads(41.7%) were long estrous cycle to repeated OPU 12 heads. Although, now unknown about the dynamics of follicles wave and about functional changes to repeated OPU ovaries, more question about ovaries adhesive cause remain.
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문제 정의
본 연구는 한우에 있어서 초음파기기를 이용하여 반 복적으로 생체내 난자를 회수시 난자회수에 미치는 영 향과 시술후의 난소 유착과 같은 부작용을 조사하기 위하여 실시한 결과는 다음과 같다. 1.
본 연구에서는 한우에 있어서 초음파기기를 이용하여 반복적으로 생체내 난자를 회수시 난자 회수에 미치는 영향과 시술후의 난소 유착과 같은 부작용올 조사하기 위하여 실시하였다.
제안 방법
유도흐! 기 위해 0.3ml /300kg 기준으로 2% xylazine hy drochloride (Rompun®, Bayer, 한국)를 근육 주사하고, 부가적으로 5ml의 lidocaine HC1 (광명, 한국) 을 이용 경막외 마취를 하였다. 또한 자궁경부 주변에 마취를 유도하여 주사바늘 통과시 고통을 줄이기 위해 lidocaine HC1 을 2 ml을 도포하였다.
난소를 조작하여 난포가 초음파진단기의 바늘 유도선에 위치하도록 하여 채취바늘을 자궁경부 옆을 통과하여 화면상의 난포(흑점)로 삽입하였다. 난포내로 주사바늘이 안으로 들어가면 화면에 채취 바늘의 선단에 있는 반향부에 의하여 횐점으로 나타나며 이를 기준으로 micro suction-pump를 작동시켜 난포액을 흡인하였다.
난포내로 주사바늘이 안으로 들어가면 화면에 채취 바늘의 선단에 있는 반향부에 의하여 횐점으로 나타나며 이를 기준으로 micro suction-pump를 작동시켜 난포액을 흡인하였다. 난포액이 모두 흡입된 경우는 음압의 발생에 장애를 받는 느낌이 오고 화면상에 난포 의혹 점이 없어지므로 이때를 난포액의 흡인 완료 시점이라고 단정하고 다른 난포를 채란하기 위해 난소를 조작하였다. 난자회수시 음압은 80mmHg를 이용하였다.
대상 데이터
축산기술연구소 축산기술부에서 사육하고 있는 번식기관이 정상이고 발정이 주기적으로 반복되는 3~4 세의 미경산 한우 20두를 공시하였는 데, 공란우의 체중은 300± 10kg으로 체중의 차가 많이 나지 않도록 개체를 이용하였고 총 224회의 난자채란에 이용하였다.
난포액의 흡입은 음압조절이 가능한 micro-suction pump (WISAP®, 독일)를 이용하였으며 채취용 바늘은 55cm 길이의 17 Gauge 또는 18 Gauge의 바늘 끝에 초음파 반향부가 있고 50ml 원심분리관과 연결된 Echo-Tip® (Cook Co., 호주)을 사용하였다.
데이터처리
모든 자료는 J-분석법과 Student t-test 검정법으로 분석하였다.
성능/효과
본 연구에서 얻어진 반복 OPU 시술의 결과는 Has ler 둥(1995) 이 보고한 6두의 공란우를 24주에서 111 주간 16회에서 78회 시술을 한 결과 회수난자수는 평균 1.5~ 10.9개로 개체간의 변이가 심하였으나 유의적인 차는 보고하지 않았다. 따라서 초음파기기에 의한 생체 내 난자채취 기술이 점차 발전한다면 다배란처리법올 이용한 수정란의 생산 기술올 대체할 수 있을 것이라 사료된다.
난포란을 1주에 1회 시술과 2회 시술과는 유의적인 차이가 인정되지 않았으며, 주 1회 채란시는 10.2 ±6.1 개의 난포중 4.3±2.9개를 채란하였고, 주 2회 채란한 경우는 8.7±4.2개의 난포중 4.1±3.4개를 채란하였으며, 주당 2회 연속 채란시는 난소로 부터 약간 의연 질감을 느낄 수 있었다.
주 1회 채란 성적과주 2회 채란 성적을 비교하였을 때 유의적인 차이를 나타내지 않았지만, 단시간에 많은 수의 난포란을 얻고자 할 경우 주 2회 채란법을 실시하는 것이 효과적이라 사료되며, 연속적으로 장기간공란우로 선정되어 실험에 공시될 경우는 주 1회에 채란하는 것이 효과적으로 이용할 수 있을 것으로 사료된다. Gibbons 둥(1994)은 주 2회 채란하는 것이 주 1회 채란하는 것보다 난포란의 채란수가 많았다고 하였고, Pieterse 둥(1991)은 발정주기 중 3회 채란을 실시하였을 때 1회 평균 5.
본 연구에서 얻어진 OPU빈도에 따른 난자 회수에 차이가 없었던 결과는 Simon 등(1993)이 보고한 65 일동안 48시간 또는 96시간 간격으로 시술한 결과 난자 회수율은 차이가 인정되지 않았다는 결과와 Gib bons 둥(1994)이 보고한 발정주기 3~4일에 시술을 시작하여 5주 동안 1주에 1회 또는 2회 OPU시술을한 결과 시술당 회수 난자수는 차이가 없었다는 결과와 일치하는 결과였다. 이와 같이 난포란의 채란 간격이 난자회수 성적에 차이를 나타내지 않는 결과는 시술빈도가 짧은 경우 난포의 고갈의 발생보다는 난포들이 대난포나 우위난포로의 발달까지 진행되기 이전에 채란하기 때문에 우위난포로 부터 분비하는 inhibin의작용을 덜 받아 소난포의 발육에 큰 장애를 나타내지 못했기 때문이라고 사료된다.
본 연구에서 얻어진 회수빈도에 따른 난자회수 성적에 차이가 인정되지 않은 결과는 1주에 2회 시술하는 것이 주당 총 회수난자수를 중가시킬 수 있다는 것을 의미한다.
난포란 채란 공란우 20두의 난소 40개에 대하여 초음파 진단기를 이용하여 난포란 채란후 난소의 유착상태를 조사한 결과 반복채란 9회까지 8개 (20.0%) 의 난소에서 유착이 확인되었으며, 반복채란 회수에 따른 난소의 유착 발생은 1~3회 채란에서는 3두, 4~6회에서는 4두, 9회에서 1두가 발생하였다. 유착의 판단은채란시 직장을 통하여 난소를 촉지하였을 때 정상적인 난소는 손바닥내에서 채란이 자유로우나, 손바닥 내에서 채란이 불편하면 유착으로 판단하였다.
본 연구에서 얻어진 난포란의 반복 채란에 따라20%의 난소에서 유착이 나타난 결과는 초음파 유도에 의하여 반복적으로 난포란을 채란하는 경우에 공란 우의 난소로 부터 출혈 및 난포액이 유출되어 유착이 발생하는 것으로 사료된다. 그러나 Reinders와 van Wagtendonk-de Leeuw(1997) 는 동일한 공란 우에 대하여 초음파 유도로 3~17회에 걸쳐 반복 채란하여도 난소의 유착이 발생하지 않았다고 보고하여 본 연구의 결과와는 일치하지 않았는데, 이러한 차이는 시술자의 숙련도, 공시축의 마취 .
본 연구는 한우에 있어서 초음파기기를 이용하여 반 복적으로 생체내 난자를 회수시 난자회수에 미치는 영 향과 시술후의 난소 유착과 같은 부작용을 조사하기 위하여 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 난포란의 채란빈도에 따른 채란수에서는 주 2회 시술시 난포수는 8.7±4.2개로 주 1회 시술의 10.2±6.1개보다 다소 적었으나 유의적인 차이는 인정되지 않았으며, 채란수도 각각 4.1土3.4개 및 4.3±2.9 개로 유의적인 차이가 인정이 되지 않았다(P<0.05). 2.
05). 2. 반복적으로 9회 난포란을 채란한 경우 40개의 난 소중 8개 (20%)가 유착이 발생하였으며 1~3회 채란시 3개(37.5%), 4~6회 채란시 4개(50%), 7~9회 채란시 1개(12.5%)가 유착이 발생하였 다. 3.
5%)가 유착이 발생하였 다. 3. 반복적인 난포란 채란후 난소의 유착 여부에 따 른 공란우의 발정주기를 조사한 결과 난소 유착을 보인 공란우의 8두중 7두(87.5%)가 25일 이 상의 장발정주기를 보였으며, 유착이 일어나지 않은 12두중 정상 발정주기는 6두 (50.0%), 단 발정주기는 1두(8.3%), 장발정주기는 5두(41.7 %) 였다.
후속연구
9개로 개체간의 변이가 심하였으나 유의적인 차는 보고하지 않았다. 따라서 초음파기기에 의한 생체 내 난자채취 기술이 점차 발전한다면 다배란처리법올 이용한 수정란의 생산 기술올 대체할 수 있을 것이라 사료된다.
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