선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 일반적으로 세균성 질환에 비해 진균성질환은 항진균제 사용시에도 단시일 내에 치료되지 않아, 장기간약을 투여해야 하는 경우가 많기 때문에 부작용, 독성의 문제가 타 약품에 비해 가중되어 부각되고 있으므로, 이미 수 천년 식용 및 약용되어온, 독성의 우려가 비교적 천연물로부터 항진균제를 개발하려는 목적으로, 본 연구에서는 갓의 재배품종인 청갓, 반청갓,돌산갓으로부터 정유를 추출하여 GC-MS로 분석, 비교하였으며, 또한 액체배지 희석법과 디스크법으로 추줄정유의 Candida albicans등 10종의 진균류에 대한 항진균력을 측정하였다.
제안 방법
- - 실험에 사용한 3 종 갓의 정유를 위의 실험에서와 같은 방법으로 용매에 현탁시켜 50 mg/ml 용액으로 제조한 후, 무균여과하여 각 시료마다 50|11씩을 취하여 8mm 항생물질 측정용 paper disc(Advantec, Toyo Rochi Kaisha)에 흡수시켜서 위에서 제조한 배지 위에 부착시키고, 25°C에서 3-5일간 배양한 후 disc 주변의 투명한 영역의 직경(mm)을 측정하여 비교하였다. 대조물질로는 eugenol 2% 액을 시료와 같은 방법으로 만들어서, 50㎕씩을 여지에 흡수시켜 실험하였다.
- 대조물질로는 eugenol 2% 액을 시료와 같은 방법으로 만들어서, 50㎕씩을 여지에 흡수시켜 실험하였다.
- 0㎍/ml에 이르도록 단계적으로 희석하였다. 비교물질로 사용한 ketoconazol (Sigma)도 같은 방법으로 희석하여 시료를 96 well plate에 가로 방향으로 한 줄에 각각한 농도의 sample을 각 well 마다 100㎕씩 주입한 다음 세로 방향으로 한 줄씩 1(종의 균 희석액 100 ㎕씩을 주입하고, 25°C에서 3-7일간 배양한 후, 육안으로 관찰하여 균의 성장이 억제된 최저농도를 판별하였다. 사용한 용매와 Tween 80이 시료의 항균력에 영향을 미치지 않았음을 대조실험을 통해 확인하였다.
대상 데이터
- - 반청갓은 경기도 일산에서 재배한 것을, 돌산갓은 전남 여천군에서 재배한 것을 구입하여 신선한 상태로 약 800g 씩 SDE(simultaneous steam distillation-extraction)장치에서 ether를 주출 용매로 하여 5시간 동안 수증기 증류하여 ether층을 분리하고 수충은 ether로 다시 2회 추출하여 앞의 ether 층과 합하여 무수 MgSQ로 탈수한 후, 증발 농축하고, 다시 ether를 용매로 하여 각 정유의 1%용액을만들어 GC-MS의 sample로 사용하였다.
- - 본 실험에 사용한 10종의 진균은 모두 한국미생물보존센터에서 분양받은 것이며, Aspergillus niger KCCM 11239, A. flavus KCCM 11453, Trichoderma viride KCCM 11246은 malt extract agar(Blakeslee's Fonnula) 배지에, Candida albicans KCCM 11282, C. utilis KCCM 11356, C. tropicalis KCCM 12578, Cryptococcus neoformans KCCM 50564, Trichosporon mucoides KCCM 50570, Trichophyton tonsurans KCCM 11866, Geotrichum capitatum KCCM 50270은 YM agar(Difco 0712)배지에 이식하여 24~27°C에서 배양한 후, 각각의 액체배지에 다시 분주하여 3일간 배양하여, McFarland 0.5 standard와 같은 탁도로 조정된 균액을 배지로 다시 100배 희석하여 균의 농도가 약 1X104 CFU/ml가 되게 만들어서 액체배지 희석법과 디스크법에 의한 항균력 실험에 사용하였다.
데이터처리
- 측정된 각 peak의 mass spectrum은 computer에 저장된 Mass data(PBM Search of Library file: Data: Wiley L.)와 비교하여 구조를 동정하였다.carrier gas: He(l ml/min), column: HP-5(30 mX 0.
성능/효과
- 반청갓, 청갓, 돌산갓의 정유는 Aspergillus niger.A. flavus, Trichosporon mucoides 에 대해서 모두 78.1pig/ml의 MIC를 나타내었고, Trichoderma viride에 대한 MIC는 156.1 ㎍/ml로 Aspergillus속 균들에 대해서 보다 낮은 억제효과를 보였다. 그 외 Candida albicans, C.
- Disc 확산법으로 갓 정유의 진균 억제력을 실험한 결괴. Aspergillus nigei; A. flavus, Trichosporon 에서 억제반경이 가장 컸고, 전반적으로 반청갓과 돌산갓의 정유에 의한 억제효과가 청갓의 정유에 비해 전반적으로 높게 나타났다(Table HI). 이결과는 위에서 실험한 액체배지 희석법에서의 결과와 상통한다.
- 갓 정유는 MIC를 ketoconazole과 비교했을 때 진균 억제력이 4배 이하였고, disc법에 있어서도 균 억제 반경이 10-21mm로 기존의 항진균제보다 약한 것으로 나타났으나, 항진균력이 기존 항진균제의 부작용을 감안할 때, 우리가 일상적으로 식용하는 식물에서 이 정도의 항진균력이 있는 성분을 확인한 것은 새로운 우수한 항진균제 개발의 측면에서 의미있는 결과인 것으로 사료된다.
- 그 외 allyl isothiocyanate, 2-phenyl ethyl isothiocyanate, 4-isothio-cyanato-l -butene, 5-methyl isothiazole, ben zene acetaldehyde, benzene propane nitrile, beta-ionone은 반청갓, 청갓, 돌산갓 정유에 공통적으로 함유되어 있었으나 함유비율에 있어서는 큰 차이가 있었다. 또한 반청 갓 정유에는 2, 4-bis-(l, l-dime- thylethyl)-phenol 등 다수의 phenol 화합물이 함유된 것이 특징이었고, 돌산갓 정유에서는 특유의 방향이 강한 beta-cylclocitral이 확인되었다.
- 또한 정유는 식물의 대표적인 항균성분이며, 특히 isothiocyanate 등 갓의 주성분이 이미 강력한 항균작용이 있음이 입증되었고, 또한 isothiocyanate 종류에 따라 항균 spectrum, 항균활성 등에 있어서 차이를 나타낸다는 이미 보고된 사실 등을 종합한 결과, 갓에 있어서 정유의 조성은 풍미뿐만 아니라 항균력의 차이를 결정하는데 중요한 요인이 될 것이 예상되므로 항균성분의 차이는 갓의 품종에 따른 항진균 spectrum 및 강도의 차이를 결정할 것으로 예측되었다.
- 이결과는 위에서 실험한 액체배지 희석법에서의 결과와 상통한다. 본 실험에서 갓의 정유는 모든 경우에 비교물질로 사용한 eugenol에 비해서는 낮은 효과를 나타내었으나, eugenol은 전체 정유성분 중 대표적인 강력한 항균성분이므로 eugenol 보다 항진균력이 약하다는 것으로, 갓정유의 항진균제로서의 가치가 부정될수 없으J겨, 또한 두 성분의 물리화학적 특성이 다르므로, 이후의 개발 방법 및 방향에 따라, 갓 정유로부터 진균성 질환 치료 및 식품방부제 등으로 활용될수 안전성 높은 천연 항진균제 개발의 가능성을 나타낸 결과로 생각된다. 15)
- 비교물질로 사용한 ketoconazol (Sigma)도 같은 방법으로 희석하여 시료를 96 well plate에 가로 방향으로 한 줄에 각각한 농도의 sample을 각 well 마다 100㎕씩 주입한 다음 세로 방향으로 한 줄씩 1(종의 균 희석액 100 ㎕씩을 주입하고, 25°C에서 3-7일간 배양한 후, 육안으로 관찰하여 균의 성장이 억제된 최저농도를 판별하였다. 사용한 용매와 Tween 80이 시료의 항균력에 영향을 미치지 않았음을 대조실험을 통해 확인하였다.
- GC-MS의 결과 190개의 성분이 갓의 정유에서 확인되었는데, 그중 항균력이 예상되는 수종 성분을 발췌하여 Table I에 정리하여 비교하였다. 실험에 사용된 3종 정유는 각기 다른 조성을 나타냈는데, 특히 경엽의 색을 제외하고는 외형의 차이가 적은 청갓과 반청갓도 정유의 조성에 있어서 현저한 차이점을 나 타냈다. 그러나 이 두 종류의 갓은 공통적으로 2- phenyl ethyl isothiocyanate# 주성분으로 다량 함유하고 있었고, 함량도 반청갓에 20.
- 액체배지 희석법으로 MIC를 측정했을 때 비교물질로 사용한 ketoconazole은 본 실험에서 사용한 최저농도인 19.5 ㎍/ml에서도 사용한 모든 10개의 진균에 대해 억제작용을 나타내었다. 반청갓, 청갓, 돌산갓의 정유는 Aspergillus niger.
- 이상의 결과를 종합하여 전보에 이어서 갓의 정유조성 및 함량에 있어서 재배품종 사이에 뚜렷이 구분될 수 있는 차이가 있었으며, 외부로 나타난 형태의 차이가 클수록 정유의 차이도 현저히 다르다는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 아직까지 분류학적 위치가 확립되지 않은 갓의 재배품종 구별 및 확인에 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
후속연구
- 수 있었다. 이러한 결과는 아직까지 분류학적 위치가 확립되지 않은 갓의 재배품종 구별 및 확인에 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.