말초신경 손상 후 측측문합을 이용한 신경이식시 신경이식의 수에 따른 신경재생 및 근육 기능 회복에 관한 비교 연구 Peripheral Nerve Regeneration After Various Conditioned Side to Side Neurorrhaphy in Rats원문보기
Recovery of nerve injury is conditioned by various factors including physical state, injured site, cause of injury, and neurorrhaphy Many researchers have reported on regeneration of nerve using end to side neurorrhaphy. The purpose of this study was to examine regeneration of nerve in various condi...
Recovery of nerve injury is conditioned by various factors including physical state, injured site, cause of injury, and neurorrhaphy Many researchers have reported on regeneration of nerve using end to side neurorrhaphy. The purpose of this study was to examine regeneration of nerve in various conditioned side to side neurorrhaphy. Total of 25 male Sprague-Dawley rats weighing 220 to 250 gm were divided into five groups of five rats each. The group 1, sham group, composed of dissection only without nerve transaction. The group 2, control group, composed of nerve division only without neurorrhaphy or sural nerve graft. The group 3 composed of one segmental sural nerve graft between the tibial and peroneal nerve after division. Group 4 had two segment graft, and the group 5 with three segment graft, each segment being 6mm long and 5 mm apart. The side to side neurorrhaphy was performed between peroneal nerve and tibial nerve using segmental sural nerve graft in rats. We exposed the sciatic nerve, tibial nerve, peroneal nerve, and sural nerve on left side with prone position. The peroneal nerve was cut on the bifurcation site from tibial nerve and the side to side epineurial neurorrhaphy was performed between peroneal nerve and tibial nerve through 6 mm sural nerve segment graft with 11-0 nylon under operating microscope. The electromyography and the weight from ipsilateral tibialis anterior muscle was performed at one month after neurorrhaphy Peroneal and tibial nerve was examined at distal and proximal to the neurorrhaphy site by methylene blue stain under light microscope for histologic appearance. The number of nerve fibers were counted using the image analyzer. Statistically, both in electromyography and number of nerve fibers, the differences in values between the groups were significant.
Recovery of nerve injury is conditioned by various factors including physical state, injured site, cause of injury, and neurorrhaphy Many researchers have reported on regeneration of nerve using end to side neurorrhaphy. The purpose of this study was to examine regeneration of nerve in various conditioned side to side neurorrhaphy. Total of 25 male Sprague-Dawley rats weighing 220 to 250 gm were divided into five groups of five rats each. The group 1, sham group, composed of dissection only without nerve transaction. The group 2, control group, composed of nerve division only without neurorrhaphy or sural nerve graft. The group 3 composed of one segmental sural nerve graft between the tibial and peroneal nerve after division. Group 4 had two segment graft, and the group 5 with three segment graft, each segment being 6mm long and 5 mm apart. The side to side neurorrhaphy was performed between peroneal nerve and tibial nerve using segmental sural nerve graft in rats. We exposed the sciatic nerve, tibial nerve, peroneal nerve, and sural nerve on left side with prone position. The peroneal nerve was cut on the bifurcation site from tibial nerve and the side to side epineurial neurorrhaphy was performed between peroneal nerve and tibial nerve through 6 mm sural nerve segment graft with 11-0 nylon under operating microscope. The electromyography and the weight from ipsilateral tibialis anterior muscle was performed at one month after neurorrhaphy Peroneal and tibial nerve was examined at distal and proximal to the neurorrhaphy site by methylene blue stain under light microscope for histologic appearance. The number of nerve fibers were counted using the image analyzer. Statistically, both in electromyography and number of nerve fibers, the differences in values between the groups were significant.
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문제 정의
본 연구의 목적은 측측문합을 이용한 신경이식시 신경이 재생될 수 있음을 알아보고 신경이식수와 신경재생 양을 비교 분석하여 나온 실험적 결과를 기초 삼아 신경 절단 손상 후 근위단을 찾을 수 없거나 너무 넓은 신경 결손부가 있을 시 조기에 측측문합을 이용하여 신경이식을 시행함으로써 기능적 회복의 가능성을 최대화하기 위한 데 있다.
제안 방법
모의군인 1군은 신경절단없이 신경박리만 시행 후 피부 봉합을 시행하였고, 2군부터 5군까지 동일하게 비골신경을 좌골신경에서 분지되는 지점에서 절단하였다. 2군은 절단 후 신경이식을 시행하지 않고 피부 봉합하여 대조군으로 하였으며, 3군에서 5군까지 비복신경을 약 20 mm 채취한 후 6 mm 길이 3개로 절단하였다. 3군에서는 경골 신경분지 원위부 5 mm 거리에서 6 mm 길이의 한 개 비복신경 이식을 경골신경과 비골신경사이에 측측문합을 통해 시행하였으며, 4군에서는 3군과 동일하되 한 개의 신경이식 부위 하방 5 mm 간격으로 또 하나의 6 mm 길이의 비복신경 이식을 측측문합을 통해 시행하여 총 2개의 신경 이식을 시행하였다.
2군은 절단 후 신경이식을 시행하지 않고 피부 봉합하여 대조군으로 하였으며, 3군에서 5군까지 비복신경을 약 20 mm 채취한 후 6 mm 길이 3개로 절단하였다. 3군에서는 경골 신경분지 원위부 5 mm 거리에서 6 mm 길이의 한 개 비복신경 이식을 경골신경과 비골신경사이에 측측문합을 통해 시행하였으며, 4군에서는 3군과 동일하되 한 개의 신경이식 부위 하방 5 mm 간격으로 또 하나의 6 mm 길이의 비복신경 이식을 측측문합을 통해 시행하여 총 2개의 신경 이식을 시행하였다. 5군에서는 4군과 동일하되 또 하나의 6 mm 길이의 신경이식을 마지막 신경이식 부위의 하방 5 mm 지점에서 측측문합을 통해 시행하여 총 3개의 신경이식을 시행하였다(Fig.
3군에서는 경골 신경분지 원위부 5 mm 거리에서 6 mm 길이의 한 개 비복신경 이식을 경골신경과 비골신경사이에 측측문합을 통해 시행하였으며, 4군에서는 3군과 동일하되 한 개의 신경이식 부위 하방 5 mm 간격으로 또 하나의 6 mm 길이의 비복신경 이식을 측측문합을 통해 시행하여 총 2개의 신경 이식을 시행하였다. 5군에서는 4군과 동일하되 또 하나의 6 mm 길이의 신경이식을 마지막 신경이식 부위의 하방 5 mm 지점에서 측측문합을 통해 시행하여 총 3개의 신경이식을 시행하였다(Fig. 1).
소독 후 백서의 자세를 복와위로 위치시킨 후 좌측부의 둔근 피부 절개 및 근육 절제 후 좌골신경을 노출하고 확인하였다. 그 후 미세현미경하에서 좌골신경에서 비골신경 및 경골신경의 분지를 확인한 후 원위부로 노출하여 박리하였다. 모의군인 1군은 신경절단없이 신경박리만 시행 후 피부 봉합을 시행하였고, 2군부터 5군까지 동일하게 비골신경을 좌골신경에서 분지되는 지점에서 절단하였다.
근전도 측정을 시행하였다. 그 후 절개 시행 후 신경봉합 근위부의 경골신경과 신경봉합 원위부의 비골신경 표본을 채취하여 methlyene bluestain 을 실시하고 광학 현미경하에서 관찰을 시행하였고, Image analyzer (SiS GmbH, Germany)를 이용하여 신경섬유의 수를 확인하였으며 전경골근의 중량을 측정하였다.
모든 신경봉합은 미세 현미경하에서 11-0 nylon을 이용하여 신경외막 봉합 방법 (epineurial neurorrhaphy) 시행하였고 창상 봉합은 5-0 nylon으로 봉합하였다. 감염의 예방을 위해 항생제를 50mg/kg/day 씩 7일간 주사하였다.
하였다. 모의군(Group 1), 대조군(Group 2), 1개의 신경이식군(Group 3), 2개의 신경이식군(Group 4), 3개의 신경이식군(Group 5)으로 각각 5마리씩 5개군으로 분류하였다.
그 후 미세현미경하에서 좌골신경에서 비골신경 및 경골신경의 분지를 확인한 후 원위부로 노출하여 박리하였다. 모의군인 1군은 신경절단없이 신경박리만 시행 후 피부 봉합을 시행하였고, 2군부터 5군까지 동일하게 비골신경을 좌골신경에서 분지되는 지점에서 절단하였다. 2군은 절단 후 신경이식을 시행하지 않고 피부 봉합하여 대조군으로 하였으며, 3군에서 5군까지 비복신경을 약 20 mm 채취한 후 6 mm 길이 3개로 절단하였다.
준비를 하였다. 소독 후 백서의 자세를 복와위로 위치시킨 후 좌측부의 둔근 피부 절개 및 근육 절제 후 좌골신경을 노출하고 확인하였다. 그 후 미세현미경하에서 좌골신경에서 비골신경 및 경골신경의 분지를 확인한 후 원위부로 노출하여 박리하였다.
실험군의 각 백서의 마취는 Ketamine hydrochloride를 5 mg/kg 용량으로 복강내 주사하고 백서의 좌측 둔부 및 하지부에 제모제를 이용하여 피부절개 준비를 하였다. 소독 후 백서의 자세를 복와위로 위치시킨 후 좌측부의 둔근 피부 절개 및 근육 절제 후 좌골신경을 노출하고 확인하였다.
저자들은 단단문합과 단측문합에 있어서 각각의 가능성 및 예측결과를 고려할 때 측측문합의 장점을극대화하고 표적 세포로부터 neurotrophic factor의 경로를 다 경로로 하는 신경 이식수에 따른 신경재생양을 측정하였다. 우리는 신경재생의 적정 조정시기는 정확히 알 수가 없었다.
평가는 수술 1개월 후 상기 마취 방법으로 마취한 후 피부의 실험준비 후 각군 백서의 좌측 하지 전경골근에 근전도 측정을 시행하였다. 그 후 절개 시행 후 신경봉합 근위부의 경골신경과 신경봉합 원위부의 비골신경 표본을 채취하여 methlyene bluestain 을 실시하고 광학 현미경하에서 관찰을 시행하였고, Image analyzer (SiS GmbH, Germany)를 이용하여 신경섬유의 수를 확인하였으며 전경골근의 중량을 측정하였다.
대상 데이터
실험동물은 체중 220 gm에서 250 gm의 Sprague-Dawley계의 백서 25마리를 대상으로 하였다. 모의군(Group 1), 대조군(Group 2), 1개의 신경이식군(Group 3), 2개의 신경이식군(Group 4), 3개의 신경이식군(Group 5)으로 각각 5마리씩 5개군으로 분류하였다.
성능/효과
우리는 신경재생의 적정 조정시기는 정확히 알 수가 없었다. 정량적 근전도 검사에서 대조군(Group 2)과 1개의 신경이식을 측측문합한 Group 3의 경련은 별 차이가 없는 것으로 나타났으나, Group 4와 Group 5에서는 유의있게 증가하여 신경이식수어"경련의 변화가 관계있음을 보였다. 신경섬유의 총수는 neurotrophism의 영향으로 생각되는데 경골신경 근위부 및 비골신경 원위부의 실험표본 신경섬유수는 경골신경의 군간 차이는 의미가 없었으나 비골신경의 재생에 따른 신경 섬유수가 Group 4와 Group 5에서 의미있게 증가하였다.
더 나아가 Yüksei 등은 문합부를 성공적으로 자라 들어간 적은 양의 유수초 섬유(myelinate fiber)의 기능적 결과를 보고하기도 하였다.6) 이러한 결과는 신경재생에 neurotrophism 영향의 결과로 축삭의 생장으로 설명되어지지만 신경섬유의 기능적 표현은 아직 밝혀지지 않았다.7,10)
모의군과 대조군 Group 2에서 신경이식군 Group 5까지 기대정도의 근전도 검사결과를 보였다(Fig. 2. ) 반응빈도의 차이는 구별할 수 없었으나 복합 활동전위차 (compound action potential, CAMP) 에 대한 전경골근의 경련은 Group 4와 5에서 유의있게 증가하였다.
신경봉합 근위부의 경골 신경과 신경봉합 원위부의 비골신경의 신경 섬유수는 Group 4와 5에서 유의있게 증가하였다(Fig. 3). 각 Group간의 신경섬유수의 차이는 유의하였다.
정량적 근전도 검사에서 대조군(Group 2)과 1개의 신경이식을 측측문합한 Group 3의 경련은 별 차이가 없는 것으로 나타났으나, Group 4와 Group 5에서는 유의있게 증가하여 신경이식수어"경련의 변화가 관계있음을 보였다. 신경섬유의 총수는 neurotrophism의 영향으로 생각되는데 경골신경 근위부 및 비골신경 원위부의 실험표본 신경섬유수는 경골신경의 군간 차이는 의미가 없었으나 비골신경의 재생에 따른 신경 섬유수가 Group 4와 Group 5에서 의미있게 증가하였다. 이것은 신경재생이 신경이식 수에 어느정도 비례함을 보인다고 여겨진다.
이 실험은 말초신경 수술시 신경 이식수에 따른 측측문합의 일차 실험보고로서 기능적 평가는 이루어지지 않았으나 측측문합부를 통한 축삭의 생장과 재생능력의 가능성이 신경 이식수에 비례함을 보였다.
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