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문제 정의
- 따라서, 본 연구에서는 인류의 식생활에 널리 이용되는 미나리의 과량 투여시 어떠한 혈액학적 변화가 나타나는지를 관찰하고자 건강한 성견에 미나리 생즙을 20일간 연속 투여 하여 실험을 실시하였다.
- 따라서 본 연구에서는 과량의 미나리 생즙을 소형견에 장기간 투여하면서 용혈성 빈혈의 발생 유무를 관찰하였다.
- 본 연구에서는 인류의 식생활에 널리 이용되고 있는 미나리의 장기간 섭취가 개의 혈액상에 어떠한 영향을 미치는지를 관찰하고자 미나리 생즙을 투여한 결과 다음과 같은 성적을 얻었다.
제안 방법
- ) 1 kg을 녹즙기 (PHILIPS Juice mixer HR 1840)를 통하여 추출한 결과 1Z의 미나리 생즙이 추출되었다. 추출한 미나리 생즙을 냉동 보관하여 매일 투여 전 37。。의 water bath에서 가온한 후 위관을 사용하여 1일 1회 20일간 체중kg당 5 ml의 용량으로 연속 투여하였다.
- 채혈은 요골측 피하정맥(cephalic vein)에서 실시하였으며 투여 후 7일간은 연속적으로, 이후 10, 12, 15, 20 및 30 일째 채혈하였다. 채혈한 혈액은 EDTA(35 blood) 처리된 eppendorf tube에 분주하여 즉시 분석에 이용하였다.
- 채혈은 요골측 피하정맥(cephalic vein)에서 실시하였으며 투여 후 7일간은 연속적으로, 이후 10, 12, 15, 20 및 30 일째 채혈하였다. 채혈한 혈액은 EDTA(35 blood) 처리된 eppendorf tube에 분주하여 즉시 분석에 이용하였다.
- 즉, 900 |11의 3차 증류수와 시료 혈액 100)11를 혼화시킨 후 metaphosphate 1500 pl를 첨가하여 vortex mixer에서 충분히 mix하였다. 이후 3, 000 rpm의 저온 원심분리기에서 15분간 원침한 후 이 상층액 1000 卩1를 취하여 다른 시험관에 분주하였으며 여기에 0.3M PB 4000 [11 및 DTNB(5, 5'- dithiobis-2-nitrobenzoate derivatives) 500 )11를 첨가한 후 완전히 혼화시킨 용액을 412 nm의 UV spectrophotometer (Metertek SP-870, USA)에서 그 흡광도를 산정하였다.
대상 데이터
- 실험 동물은 임상적으로 건강한 체중 6kg 미만(평균3.67 kg)의 소형견 10두를 암수 구별없이 사용하였으며 시판되는 생 nl Qs] (Oenanthe javanica DC.) 1 kg을 녹즙기 (PHILIPS Juice mixer HR 1840)를 통하여 추출한 결과 1Z의 미나리 생즙이 추출되었다. 추출한 미나리 생즙을 냉동 보관하여 매일 투여 전 37。。의 water bath에서 가온한 후 위관을 사용하여 1일 1회 20일간 체중kg당 5 ml의 용량으로 연속 투여하였다.
데이터처리
- Met-Hb(Met-hemoglobin) 함량은 Nakamura 등"의 방법에 따라 측정하였으며 reticulocyte는 new methylene blue 염색후 현미경 상에서 그 수치를 판정하였다. 실험 결과, 각 군간의 유의성 검증은 student's t-test로 분석하였다.
이론/모형
- 검사 항목으로는 자동혈구계산기 (HEMA网T. 600 USA)를 사용하여 RBC, WBC, Hemoglobin(Hb), Mean coi-puscular volume(MCV), Mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) 함량을 측정하였으며, packed ceU volume(PCV)는 Microhematocrit법을 이용하여 측정하였다.
- 또한 적혈구내 reduced gluthathione(GSH) 함량은 Beutler 등2의 방법에 따라 측정하였다.
- Met-Hb(Met-hemoglobin) 함량은 Nakamura 등"의 방법에 따라 측정하였으며 reticulocyte는 new methylene blue 염색후 현미경 상에서 그 수치를 판정하였다. 실험 결과, 각 군간의 유의성 검증은 student's t-test로 분석하였다.
성능/효과
- 총 적혈구수는 투여 전의 평균 621X104/1“에 비하여 투여 6일째부터 감소 경향을 나타내었으며 투여 후 10일째는 평균 466X104/(11 로서 최저치를 나타낸 후 30일째 투여 전 수치로 환원되었다.(Fig 1)
- 혈구 용적은 투여 후 15일째 평균 35%로서 최저치를 나타내었으나, 투여 전의 39%에 비하여 유의한 변화는 나타나 지 않았으며 20일째는 투여 전 수치로 환원되었다.(Fig 2)
- 총 백혈구수는 투여 전의 평균 14, 000/卩1에 비하여 투여 후 2일째 최고 19, 717仙1까지 증가 경향을 나타내었다.(Fig 3)
- 혈색소 함량은 투여 전의 평균 12.6mg/dl에 비하여 투여 후 7일째 평균 11.4mg/dl로서 유의한(PC0.01) 감소 경향을 나타내었으며 20일째는 투여 전 수치로 환원되었다. (Fig 4)
- 평균 적혈구 용적은 실험 전 기간동안 유의성은 인정되지 않았으나 투여 후 10일째 평균 86 fl로서 투여 전의 64 fl에 비하여 최고치를 나타낸 후 15일째는 투여 전 수치로 환원되었다.(Fig 5)
- 평균 혈구혈색소 농도 역시 실험 전 기간동안 유의한 변화가 인정되지 않았으며 투여 후 4일째 28.4g/dl로서 투여 전의 평균 32g/dl에 비해 최저치를 나타내었다.(Fig 6)
- GSH 함량은 투여 전의 평균 2.5mg/dl에 비하여 투여 후 7일째 평균 3.49mg/dl로서 유의한(P<0.05) 증가를 나타낸 후 투여 후 10일째 평균 4.49mg/dl로서 최고치를 나타내었으며 20일째는 투여 전 수치로 환원되었다.(Fig 7)
- Reticulocytes 수치는 투여 전의 1.48%에 비하여 투여 후 5일째 2.86%로서 유의한(P<0.01) 증가를 나타내었다.(Fig 9)
- 본 실험 결과 체중 kg당 5 g의 함량으로 미나리 생즙을 투여한 결과 총 적혈구수는 유의성은 인정되지 않았으나 투여 전의 평균 621X 104/|iM] 비하여 투여 후 10일째는 평균 466X104仙로서 25%의 빈혈상을 나타내었다.
- 혈색소 함량 역시 투여 전의 평균 12.6mg/dl에 비하여 투여 후 7일째의 평균이 11.4mg/dl로서 유의성은(P<0.01) 인정되었으나 역시 정상 범위에서의 변화로 생각되며, 평균 적혈구 용적 및 평균 혈구혈색소 농도도 유의성은 인정되지 않았으나 정상 범위 내에서의 변화를 나타내었다. 이러한 결과 역시 Harvey와 Racker12, Ogawa등25, 이 등49 그리고 장등53이 과량의 양파와 마늘을 개에 투여 한 후의 보고와 일치하는 결과로 생각된다.
- 본 실험 결과 GSH 함량은 투여 전의 평균 2.5mg/dl에 비하여 투여 후 10일째는 평균 4.49mg/dl로서 유의한 (P<0.01) 증가를 나타낸 바 이러한 결과 역시 과량의 양파와 마늘의 투여시 GSH 함량이 증가된다는 Harvey와 Racker12, Yamato등53 이 등49, 장 등53의 보고와 일치하는 결과로 생각된다.
- Reticulocytes 수치는 투여 전의 평균 1.48%에 비하여 투여 후 5일째 2.86%로서 유의한(PC0.01) 증가를 나타내었으며 이러한 결과는 과량의 미나리 생즙을 장기간 투여시 빈혈이 유발된다는 사실을 뒷받침하는 결과로 생각된다.
- 1. RBC 수치는 투여 후 6일째부터 감소 경향을 나타낸 후 10일째 최저치를 나타내었으며 30일째는 투여 전 수치로 환원되었다. PCV 수치는 투여 후 15일째 평균 35%로서 최저치를 나타내었으나 투여 전의 39%에 비하여 유의한 변화는 나타나지 않았으며 20일째는 투여 전 수치로 환원되었다.
- RBC 수치는 투여 후 6일째부터 감소 경향을 나타낸 후 10일째 최저치를 나타내었으며 30일째는 투여 전 수치로 환원되었다. PCV 수치는 투여 후 15일째 평균 35%로서 최저치를 나타내었으나 투여 전의 39%에 비하여 유의한 변화는 나타나지 않았으며 20일째는 투여 전 수치로 환원되었다.
- 2. WBC 수치는 투여 후 2일째 유의한(P<0.01) 증가를 나타내었다.
- 3. 평균Hb 함량은 투여 후 7일째 유의한(P<0.01) 감소 경향을 나타내었으며 20일째는 투여 전 수치로 환원되었다.
- 4. MCV 수치는 전 실험기간 동안 유의성은 인정되지 않았으나 투여 후 10일째 최고치를 나타낸 후 15일째 투여 전 수치로 환원되었으며, MCHC 수치는 전 실험기간 동안 유의성은 인정되지 않았으나 투여 후 4일째 최저치를 나타내었다.
- 5. GSH 함량은 투여 후 7일째 유의한(P<0.05) 증가가 인정된 후 10일째 최고치를 나타내고 20일째는 투여 전 수치로 환원되었으며, Met-Hemo이obin(Met-Hb) 농도는 투여후 4일째 최고치를 나타내었다.
- 6. Reticulocytes 수치는 투여 전의 평균 1.48%에 비하여 투여 후 5일째 2.86%로서 유의한(Pv 0.01) 증가를 나타내었다.
후속연구
- 이상의 결과 개에 있어서 과량의 미나리 생즙을 장기간 투여 시에는 양파와 마늘의 과량 투여시와 같은 용혈성 빈혈이 유발되는 것으로 확인되었으나 본 실험 결과만으로는 미나리에 함유된 어떠한 성분에 의하여 용혈성 빈혈이 유발되는지를 해석하기 곤란하며 앞으로도 지속적인 연구가 이루어져야 할 것으로 생각된다.
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