[국내논문]저장 감귤의 부패에 관여하는 Penicillium spp.에 대한 Iminoctadine tris(albesilate)와 Kresoxym-methyl의 방제 효과 Protective Effect of Iminoctadine tris(albesilate) and Kresoxim-methyl Fungicides to Citrus Postharvest Diseases caused by Penicillium spp.원문보기
본 연구는 감귤을 부패시키는 Penicillium spp.에 대한 kresoxim-methyl 과 iminoctadine tris(albesilate)의 방제효과를 검정하기 위하여 실시하였다. P. italicum과 P. digitatum의 균사생장에 대한 iminoctadine tris(albesilate)의 $EC_{50}$값은 각각 0.01-0.02와 $0.01{\mu}g$ a.i./mL이었지만, 아직 미동정인 새로운 유형의 Penicillium spp.균은 iminoctadine tris(albesilate)가 $0.64{\mu}g$ a.i./mL들어 있는 PDA배지에서도 거의 균사생장이 억제되지 않았다. 또한 P. italicum과 P. digitatum의 발아와 발아관의 생장에 대한 iminoctadine tris(albesilate)의 $EC_{50}$값은 $0.0013-0.0025{\mu}g$ a.i./mL이었지만 새로운 유형치 Penicillium spp.는 $0.2{\mu}g$ a.i./mL 농도에서도 포자 발아가 거의 억제되지 않았다. P. italicum과 P. digitatum 그리고 미동정 Penicillium spp.의 균사생장에 대한 kresoxim-methyl의 $EC_{50}$은 각각 0.08-0.16, 0.04 그리고 $0.16{\mu}g$ a.i./mL이었으며 P. italicum과 새로운 유형의 Penicillium spp.의 포자 발아 및 발아관 생장에 대한 $EC_{50}$이 $0.04{\sim}0.08{\mu}g$ a.i./mL이며 P. digitatum에 대해서는 $0.01{\sim}0.02{\mu}g$ a.i./mL였다. Kresoxim-methyl과 iminoctadine tris(albesilate)의 저장병에 대한 방제효과를 알아보기 위하여 이들 약제를 각각 $155{\mu}g$ a.i./mL과 $200{\mu}g$ a.i./mL의 농노로 수상살포하고 7일 후 수확하여 90일간 저장한 결과 무처리구와 thiophanate-methyl $700{\mu}g$ a.i./mL을 처리한 대조구에서의 부패율은 각각 $20.3{\pm}10.0%\;and\;19.5{\pm}9.6%$으로 높은데 반하여 tresoxim-methyl과 imonoctadine tris(albesilate) 처리구에서의 부패율은 각각 $3.6{\pm}1.8%$ 과 $5.9{\pm}1.8%$로써 방제효과가 높았다. 이들 처리로부터 저장 후 0, 30, 60, 90일에 각각 iminoctadine tris(albesilate)와 kresoxim-methyl의 잔류량을 조사해본 결과 각 조사 기간 중 iminoctadine tris(albesilate)의 최대잔류량은 0.10 ppm이었고 kresoxlm-methyl의 최대 잔류량은 0.45 ppm이었다.
본 연구는 감귤을 부패시키는 Penicillium spp.에 대한 kresoxim-methyl 과 iminoctadine tris(albesilate)의 방제효과를 검정하기 위하여 실시하였다. P. italicum과 P. digitatum의 균사생장에 대한 iminoctadine tris(albesilate)의 $EC_{50}$값은 각각 0.01-0.02와 $0.01{\mu}g$ a.i./mL이었지만, 아직 미동정인 새로운 유형의 Penicillium spp.균은 iminoctadine tris(albesilate)가 $0.64{\mu}g$ a.i./mL들어 있는 PDA배지에서도 거의 균사생장이 억제되지 않았다. 또한 P. italicum과 P. digitatum의 발아와 발아관의 생장에 대한 iminoctadine tris(albesilate)의 $EC_{50}$값은 $0.0013-0.0025{\mu}g$ a.i./mL이었지만 새로운 유형치 Penicillium spp.는 $0.2{\mu}g$ a.i./mL 농도에서도 포자 발아가 거의 억제되지 않았다. P. italicum과 P. digitatum 그리고 미동정 Penicillium spp.의 균사생장에 대한 kresoxim-methyl의 $EC_{50}$은 각각 0.08-0.16, 0.04 그리고 $0.16{\mu}g$ a.i./mL이었으며 P. italicum과 새로운 유형의 Penicillium spp.의 포자 발아 및 발아관 생장에 대한 $EC_{50}$이 $0.04{\sim}0.08{\mu}g$ a.i./mL이며 P. digitatum에 대해서는 $0.01{\sim}0.02{\mu}g$ a.i./mL였다. Kresoxim-methyl과 iminoctadine tris(albesilate)의 저장병에 대한 방제효과를 알아보기 위하여 이들 약제를 각각 $155{\mu}g$ a.i./mL과 $200{\mu}g$ a.i./mL의 농노로 수상살포하고 7일 후 수확하여 90일간 저장한 결과 무처리구와 thiophanate-methyl $700{\mu}g$ a.i./mL을 처리한 대조구에서의 부패율은 각각 $20.3{\pm}10.0%\;and\;19.5{\pm}9.6%$으로 높은데 반하여 tresoxim-methyl과 imonoctadine tris(albesilate) 처리구에서의 부패율은 각각 $3.6{\pm}1.8%$ 과 $5.9{\pm}1.8%$로써 방제효과가 높았다. 이들 처리로부터 저장 후 0, 30, 60, 90일에 각각 iminoctadine tris(albesilate)와 kresoxim-methyl의 잔류량을 조사해본 결과 각 조사 기간 중 iminoctadine tris(albesilate)의 최대잔류량은 0.10 ppm이었고 kresoxlm-methyl의 최대 잔류량은 0.45 ppm이었다.
The biological effects of the iminoctadine tris (albesilate) and kresoxim-methyl for the protection of citrus postharvest diseases caused by penicillium spp. were assayed. In vitro tests, $EC_{50}$ values of iminoctadine tris(albesilate) were $0.01{\sim}0.02\;and\;0.01{\mu}g$ a...
The biological effects of the iminoctadine tris (albesilate) and kresoxim-methyl for the protection of citrus postharvest diseases caused by penicillium spp. were assayed. In vitro tests, $EC_{50}$ values of iminoctadine tris(albesilate) were $0.01{\sim}0.02\;and\;0.01{\mu}g$ a.i./mL against mycelial growth of P. italicum and P. digitatum, respectively, but iminoctadine tris(albesilate) at $0.64{\mu}g$ a.i. /mL inhibited a little mycelial growth of unknown Penicillium sp. which produced another symptom different to blue and green mold caused by P. italicum and P. digitatum, respectively. And against germination and growth of germ tube of P. italicum and P. digitatum, $EC_{50}$ value of iminoctadine tris(albesilate) was $0.0013{\sim}0.0025{\mu}g$ a.i./mL. But spore germination of unknown Penicillium spp. was not nearly inhibited at $0.2{\mu}g$ a.i./mL. $EC_{50}$ values of kresoxim-methyl were $0.08{\sim}0.16$, 0.04 and $0.16{\mu}g$ a.i./mL against mycelial growth of P. italicum, P. digitatum and unknown Penicillium sp., respectively, and $0.04{\sim}0.08{\mu}g$ a.i./mL and $0.01{\sim}0.02{\mu}g$ a.i./mL against germination and growth of germ tube of P. italicum and unknown Penicillium sp., and P. digitatum, respectively. Iminoctadine tris(albesilate) and kresoxim-methyl were markedly effective to control the postharvest disease by 7 days spray prior to harvest. When the fruits were sprayed with iminoctadine-tris(albesilate) ($200{\mu}g$ a.i./mL) and kresoxim-methyl ($155{\mu}g$ a.i./mL) 7 days prior to harvest and subsequently stored for 90 days, the percentage of diseased fruit by Penicillium spp. was $3.6{\pm}1.8%$ in treatment of kresoxim-methyl and $5.9{\pm}1.8%$ in iminoctadine-tris(albesilate), respectively. On the other hand, tile percentage of diseased fruit was relatively high, $20.3{\pm}10.0%\;and\;19.5{\pm}9.6%$ in thiophanate-methyl ($700{\mu}g$ a.i./mL) and non-treatment, respectively. Maximum residue amount (ppm) among fruits (flesh and peel) assayed 0, 30, 60 and 90 days after storage was 0.45 and 0.10 ppm in treatment of kresoxim-methyl and iminoctadine, respectively.
The biological effects of the iminoctadine tris (albesilate) and kresoxim-methyl for the protection of citrus postharvest diseases caused by penicillium spp. were assayed. In vitro tests, $EC_{50}$ values of iminoctadine tris(albesilate) were $0.01{\sim}0.02\;and\;0.01{\mu}g$ a.i./mL against mycelial growth of P. italicum and P. digitatum, respectively, but iminoctadine tris(albesilate) at $0.64{\mu}g$ a.i. /mL inhibited a little mycelial growth of unknown Penicillium sp. which produced another symptom different to blue and green mold caused by P. italicum and P. digitatum, respectively. And against germination and growth of germ tube of P. italicum and P. digitatum, $EC_{50}$ value of iminoctadine tris(albesilate) was $0.0013{\sim}0.0025{\mu}g$ a.i./mL. But spore germination of unknown Penicillium spp. was not nearly inhibited at $0.2{\mu}g$ a.i./mL. $EC_{50}$ values of kresoxim-methyl were $0.08{\sim}0.16$, 0.04 and $0.16{\mu}g$ a.i./mL against mycelial growth of P. italicum, P. digitatum and unknown Penicillium sp., respectively, and $0.04{\sim}0.08{\mu}g$ a.i./mL and $0.01{\sim}0.02{\mu}g$ a.i./mL against germination and growth of germ tube of P. italicum and unknown Penicillium sp., and P. digitatum, respectively. Iminoctadine tris(albesilate) and kresoxim-methyl were markedly effective to control the postharvest disease by 7 days spray prior to harvest. When the fruits were sprayed with iminoctadine-tris(albesilate) ($200{\mu}g$ a.i./mL) and kresoxim-methyl ($155{\mu}g$ a.i./mL) 7 days prior to harvest and subsequently stored for 90 days, the percentage of diseased fruit by Penicillium spp. was $3.6{\pm}1.8%$ in treatment of kresoxim-methyl and $5.9{\pm}1.8%$ in iminoctadine-tris(albesilate), respectively. On the other hand, tile percentage of diseased fruit was relatively high, $20.3{\pm}10.0%\;and\;19.5{\pm}9.6%$ in thiophanate-methyl ($700{\mu}g$ a.i./mL) and non-treatment, respectively. Maximum residue amount (ppm) among fruits (flesh and peel) assayed 0, 30, 60 and 90 days after storage was 0.45 and 0.10 ppm in treatment of kresoxim-methyl and iminoctadine, respectively.
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문제 정의
따라서 감귤 저장병 방제 약제를 선발하기 위하여 본 시험에 앞서 thiophanate-methyl 을 포함한 8개 약제들에 대한 효과를 검정하였으며 그들 중에서 방제효과가 우수한 Iminoctadine tris(albesilate) 고} kresoxim-methyl 을 선발하였다
있는 Penicilliiim spp.에 의한 감귤 부패병을 방제하기 위하여 예비 선발된 iminoctadine tris(albesilate)와 kresoxim-methy.l의 기내 및 포장조건에서의 방제 효과를검정하기 위하여 실시하였다.
제안 방법
Iminoctadine tris(albesilate) 2,000배 (200 μg a.i./mL) 와 kresoxim-methyl 3, 000배 (155 μg a.i./mL)을 살포하고 7일 후 수확한 과실과 수확 후 30, 60, 90일 동안 저장한 과실 중 잔류농약을 분석하였다. Iminoctadine을 분석하기 위하여 각각의 처리로부터 껍질이 포함된 과실을 마쇄하고 7%의 guanidine hydrochloride가 포함된 methanol 로 유화하고 2 N NaOH 를 첨가한 후 chloroform 로 3회 분배추출하였다.
/mL)을 살포하고 7일 후 수확한 과실과 수확 후 30, 60, 90일 동안 저장한 과실 중 잔류농약을 분석하였다. Iminoctadine을 분석하기 위하여 각각의 처리로부터 껍질이 포함된 과실을 마쇄하고 7%의 guanidine hydrochloride가 포함된 methanol 로 유화하고 2 N NaOH 를 첨가한 후 chloroform 로 3회 분배추출하였다. 유기 용매층에 2 N H2SO4 2 mL 를 가하고 증류수로 분배 후 약 2 mL까지 감압농축하고그 농축액에 sodium acetate를 첨가하여 pH를 3.
또한 농약이 포자발아에 미치는 영향을 조사하기 위하여 iminoctadine tris (albesilate) 이 0.0000, 0.0007, 0.0013, 0.0025, 0.0050, 0.0100, 0.0200 μg a.i./mL 과 kresoxim-methyl 0.00, 0.01, 0.02, 0.04, 0.08, 0.16, 0.32 μg a.i./mL로 들어있는 감자한천배지에 포자를 도말하고 12시간 후 발아관의 길이를 광학현미경하에서 조사하였다.
Iminoctadine을 분석하기 위하여 각각의 처리로부터 껍질이 포함된 과실을 마쇄하고 7%의 guanidine hydrochloride가 포함된 methanol 로 유화하고 2 N NaOH 를 첨가한 후 chloroform 로 3회 분배추출하였다. 유기 용매층에 2 N H2SO4 2 mL 를 가하고 증류수로 분배 후 약 2 mL까지 감압농축하고그 농축액에 sodium acetate를 첨가하여 pH를 3.0 이하로조절한 후 증류수로 5 mL 정용하여 HPLC (모델 HP 1050)로 분석하였다. 이때 사용된 컬럼은 LiChrosorb RP-18 (12.
로 분류하였다. 이들에 대한 병원성을 검정하기 위하여 완전히 착색된 과실을 수확한 후 0.5% sodium hypochlorite 용액에 5분간 침지하여 표면살균한 후 수돗물로 3회 세척하고 실내에서 풍건시켰다. 고I-실 표면에 있는 물기가 완전히 제거된 후 0.
1)로 현탁된 포자현탁액에 접종침을 담갔다가 과피의 유포 (oil grand)부분을 약 1 mm 깊이로 침지종 하였다. 접종된 과일은 30 X 40 cm의 비닐지퍼백에 10개 씩 넣고 15℃에 보관하면서 매일 병발생여부와 병반의 크기를 조사하였다.
대상 데이터
이때 사용된 분석기기로는. GLC/NPD (HP 6890)이었으며, 컬럼은 HP-5 (30 m X 0.25 mm, film thickness 0.25 ㎛)를 사용하였다. 한편 detector 온도는 280℃, injector 온도는 250℃, 그리고 oven 온도는 초기온도를 230 ℃ 에서 시작하여 1분 후에분당 4℃씩 조절하여 270℃ 까지 올리고 270℃에서 8분간유지하였다.
시험 약제는 (주)미성으로 부터 제공받은 Iminoctadine tris(albesilate) 수화제(40%) (상표명 : 벨쿠트) 와 성보화학주식회사로 부터 제공받은 kresoxim-methyl 입상수화제 (47%)(상표명 : 해비치)를 사용하였다.
에의한 부패율(%)을 조사하였다. 이때 무처리 대조구는 동일포장에서 아무런 약제를 살포하지 않은 과실을 수확하여동일 조건으로 저장한 감귤을 사용하였다.
이론/모형
Penicillium spp.에 의해 부패된 감귤로부터 접종침을 사용하여 0.05% 의 Triton X-100이 첨가된 멸균수에 포자를 현탁하여 1/2 감자한천배지 (PDA, potato dextrose agar)상에서 평판희석법으로 단포자를 분리하여 사용하였다. 분리된 병원균들은 PDA 배지, 또는 Silica gel에 이식하여 4 ℃ 또는 -20 ℃ 에보관하였다.
성능/효과
Iminoctadine tris(albesilate)가 균사생장에 미치는 영향을 조사한 결과 P. italicum에 대해서는 0.01-0.02 ㎍ a.i./mL 농도에서 균사생장을 50% 억제시켰으며 P. digitatum기에 대해서는 0.005 a.i./mL부터 억제시키기시작하여 0.01 ㎍ a.L/mL의 농도에서 균사생장을 약 50% 억제시켰다.
Iminoctadine tris(albesilate)가 포자발아에 미치는 영향을 조사한 결과 P. itulicwn과 P. digihmm에 대해서는 EC50값이 0.0013-0.0025 ㎍ a.i./mL이었으며, 0.0050 ㎍ a.i./mL의 농도에서는 접종 12시간 내에 전혀 발아를 하지못했다. 이에 비해서 Penicillium sp.
/mL의 농도에서도 균사생장을 거의 억제 시키지 못하였다 (그림 3A). P. italicum의 균사생장에 대한 kresoxim-methyl의 효과를 조사한 결과 0.005 p. g a.
각각의 약제를 살포하고 7일 후 수확하여 저장한 결과저장 후 30일이 지난 과실에 대해서는 각 처리 공히 매우낮은 부패율을 보였으며, 60일 동안 저장한 과실에서의부패율은 무처리구에서 5.0 ±3.6%, thiophanate-methyl 처리구에서 2.6 ± 1.8%/ 그리고 iminoctadine tris(albesilate) 와 kresoxim-methyl 처리구에서 각각 1.1 ±0.6%, 0.6 ±0.5%이였다 저장 90일째는 농약 무처리구와 thiophanate-methyl 처리구에서 부패율이 급격하게 증가하여, 무처리구에서의 부패율은 19.5 ±9.6%, thiophanatemethyl 처리구의 부패율은 20.3 ± 10.0%로 부패율이 높은데 반하여 kresoxim-methyl 처리구에서의 부패율은 3.6 ± 1.8%로써 가장 낮았으며, 또한 iminoctadine 처리구에서도 5.9 ± L8%로 낮은 부패율을 보였다 (표 1).
균들이 발생하였는데 Iminoctadine tris(albesilate)를 처리한 구에서 분리한 총 34개의 새로운유형의 Penicillium sp. 균주들은 thiophanate-methyl 이나 kresoxim-methyl, 그리고 iminoctadine tris(albesilate) 에대해서 모두 저항성을 보였다. 하지만 병원성 시험 결과새로운 유형의 Penicilium 균은 P.
2 ppm으로 설정되어 있다(The Official Gazette of Japen, 1985). 따라서 본 연구결과 배량인 1, 000배의 iminoctadine tris(albesilate)를 처리 히였을 경우에도 최대 잔류량이 0.13 ppm으로 잔류에는 문제가 없을 것으로 여겨진다. 우리나라에서 밀감에 대한 Kresoxim-methyl잔류허용량은 2.
또한 예비 시험 결과 iminoctadine tris(aibesilate) 와 kresoxim-methyl여러 포장에서 분리한 P. italicum과 P. digitatum의 80개 모든 균주들에 대해서 균사생장 억제 효과를 가지고 있어서 아직까지 이들 약제에 대한 저항성 균주가 출현하지 않은 것으로 생각되지만 몇몇 균주들은 생장이 억제된 균총의한 부분에서 자라나는 것으로 보아 앞으로 저항성 균주로 바뀔 가능성이 있는 것으로 여겨진다.
ulaiense는 발견되지 않았다. 반면에 iminoctadine tris(albesilate)kresoxim-methyl를 처리한 구에서는 주로 위 3종의 Penicillium균들과는 다른 유형의 Penicillium 균들이 발견되었는데, 병원성 검정 결과 P. italicum이나 P. digitatum에 비해 병진전 속도가 매우 느렸고 또한 병반이진녹색의 포자로 뒤덮히는 특징으로 보아 위 3종의 Penicilium균들과는 다른 종으로 생각되어진다. 무처리구나 thiophanate-methyl을 처리 한 구에 서는 청색 곰팡이 병 (P.
(Brown 과 Eckert, 2000; Holmes 등, 1994). 본 연구에서 조사되어진 것으로는 P. digitatum과 P. italicum이 주종을 이루었고 P. ulaiense는 발견되지 않았다. 반면에 iminoctadine tris(albesilate)kresoxim-methyl를 처리한 구에서는 주로 위 3종의 Penicillium균들과는 다른 유형의 Penicillium 균들이 발견되었는데, 병원성 검정 결과 P.
42 ppm이 검출되었다고 보고하였다. 본 연구에서는 iminoctadine tris(albesilate) 2,000배를 살포하고 7일 후에수확하여 90일까지 저장한 과실의 과피와 과육에서 최대로 0.10 ppm의 iminoctadine 이 검출되었으며 또한 1, 000배살포한 과실에서도 최대 잔류량이 0.13 ppm이였다. 일본과실의 농약잔류허용기 준량에 따르면 과피에서는 2.
약제처리에 의한 효과 검정에서 각 처리 모두 저장 후 60일까지는 부패율이 높지 않았지만 저장 후 90일째 조사에서는 부패율이 큰 폭으로 증가하였다. 따라서 2개월 이상감귤을 저장하기 위해서는 특별히 주의를 해야 할 것으로생각되어진다.
본 연구에서는 Penicillium spp. 에 의한 부패병 다음으로 많이 발생한 저장병은 Diaporthe citri에 의한 꼭지썩음병과 Alternaria citri 에 의한 검은 썩음병이었는데 이들을 포함한 모든 저장병에 대한 약제의 효과를 조사해본 결과 iminoctadine tris(albesilate)를 처리한 구에서의 총 부패율은 12.8 ± 3.5%, kresoxim-methyl 처리구에서는 8.4 ± 2.7%로써 무처리의 29.0 ± 8.9%나 tliiophanate-methyl 처리구의 22.9 ± 10.2%에 비하여 방제 효과가 월등하였다. Thiophanate-methyl 처리구에서의 Penicillium spp.
후속연구
따라서 이상의 결과들을 고찰 해볼 때 감귤저장병을 방제하기 위하여 iminoctadine tris(albesilate)와 kresoximmethyl의 수상처리는 효과적인 방법이 될 수 있을 것으로생각되어진다.
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