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문제 정의
- 본 실험은 이러한 경제적인 손실과 생체에 불리한 기능 저하를 경감시킬 수 있는 방법을 확인하기 위하여 전해질과 무기물을 투여하였다. 그리고 이러한 물질의 투여로 인한 수송 자극에 대한 생체반응의 경감 효과를 확인하기 위하여 단기자극에 분비하는 cortisol과 부신수질에서 분비되는 epineiWne, 그리고 active biotelemetry 방법을 이용한 심박 수와 체온의 원격측정을 통하여 분석하였다.
- 본 연구는 소의 수송 스트레스에 따른 생체의 여러 반응과 이를 측정할 수 있는 여러 paiameter에 대하여 관찰하였고 특히 수송자극 전에 전해질의 투여를 통해 수송 자극에 의한 스트레스를 감소시킬 수 있는 방안을 모색하였다. 실험 결과는 다음과 같다.
제안 방법
- 공시동물은 4주간 동안 축사내의 칸막이(stanchian)에 24 시간 보정하였고, 1일 3회 농후사료와 조사료, 그리고 음수를 급여하였다. 또한 실험기간동안 자연 발정에 의한 생리적 변화요인을 배제하기 위해 progesterse제제인 사료 첨가제 (MGA-100®, Upjohn, melen-gestrol acetate 220 i理/kg) 를 2 g/head/day씩 농후사료 급여시 첨가하였다.
- 무기물을 투여하였다. 그리고 이러한 물질의 투여로 인한 수송 자극에 대한 생체반응의 경감 효과를 확인하기 위하여 단기자극에 분비하는 cortisol과 부신수질에서 분비되는 epineiWne, 그리고 active biotelemetry 방법을 이용한 심박 수와 체온의 원격측정을 통하여 분석하였다.
- 급여하였다. 또한 실험기간동안 자연 발정에 의한 생리적 변화요인을 배제하기 위해 progesterse제제인 사료 첨가제 (MGA-100®, Upjohn, melen-gestrol acetate 220 i理/kg) 를 2 g/head/day씩 농후사료 급여시 첨가하였다.
- 印nephrine 분석은 혈장 1皿에 4N perchloric acid 125以를 가하여 15 분간방치 후 3, 000rpm에서 10분간 원심분리하여 제단백한 후, 그 상층액 500以에 Tris EDTA(pH 8.6) buffer 1血!를 첨가하고 난 다음 acid washed alumina를 가하여 10분간 rolling mix한 후, 증류수에 3회 세척하고, IN acetic acid 100 ul로 추출하여 전처리한 후 HPLC systenXWatas, USA)을 사용하여 분석하였다.
- 수송 자극은 대조군과 치료군 모두 5시간동안 평균 50km/h의 속도로 총 274km를 주행하였고 수송중 같은 조건을 유지하기 위하여 경사도가 거의 없는 평탄한 아스팔트 도로를 주행하였다. 수송거리 총 274km중 수송개시 후 135km(출발 후 2시간 20분)에서 정차하여 채혈한 후 회차하여 139km(회차 후 2시간 40분)를 주행하였다.
- 수송 자극은 대조군과 치료군 모두 5시간동안 평균 50km/h의 속도로 총 274km를 주행하였고 수송중 같은 조건을 유지하기 위하여 경사도가 거의 없는 평탄한 아스팔트 도로를 주행하였다. 수송거리 총 274km중 수송개시 후 135km(출발 후 2시간 20분)에서 정차하여 채혈한 후 회차하여 139km(회차 후 2시간 40분)를 주행하였다. 실험 당일 오전과 오후에는 절식과 절수를 실시하였고 수송자극 종료 후 농후사료, 조사료, 음수를 급여하였다.
- 수송차량은 소 수송용 트럭을 사용하였고, 승차시 대조군과 치료군 모두에 있어 개체별로 h成ter를 착용하여 고정용 파이프에 로프로 보정하였으며, 개체와 개체사이에는 50cm 이상의 공간을 확보하여 약간의 활동성을 확보하였다. 수송 자극은 대조군과 치료군 모두 5시간동안 평균 50km/h의 속도로 총 274km를 주행하였고 수송중 같은 조건을 유지하기 위하여 경사도가 거의 없는 평탄한 아스팔트 도로를 주행하였다.
- 수송거리 총 274km중 수송개시 후 135km(출발 후 2시간 20분)에서 정차하여 채혈한 후 회차하여 139km(회차 후 2시간 40분)를 주행하였다. 실험 당일 오전과 오후에는 절식과 절수를 실시하였고 수송자극 종료 후 농후사료, 조사료, 음수를 급여하였다.
- 실험군은 공시 전 4주일에 좌겸부를 절개하여 심부 체온측정을 위한 active bicTelenBtiy의 체온송신기(temperature transmitter)를 복강내 좌측복벽에 장착하였고 심박수송신기 (heart rate transmitter)는 소의 전흉부에서 최대 심전도 파형이 얻어지는 곳에 두 개의 gold electrode를 피부조직내에 장착하였고 복대를 하여 고정한 후 일반적인 술후처치를 하였다.
- 심부체온과 심박수는 수송자극 30분 전에서 즉정을 시작하여 30분 간격으로 측정하였고 수송자극 종료 18시간 후까지 측정 기록하였다.
- 채혈 및 sample 처리 : 채혈을 위해 실험 1일전 경정맥에 Centracath®(130mm, 17G, Vygcn, 묘ance)를 삽입한 후, 경부 피부에 봉합하여 밀착 고정하였고 heparinized saline(15IU/ml)으로 flushin咯하여 카테터의 내강을 확보하였다. 채혈은수송자극 전(출발 1시간 전)에 실시하였고 수송자극 중간지점인 135km에서 채혈하였고, 수송자극 종료시점에서 채혈한 후, 수송 자극 종료 1시간, 6시간, 그리고 18시간 후에 각각 채혈하였다.
- 채혈은수송자극 전(출발 1시간 전)에 실시하였고 수송자극 중간지점인 135km에서 채혈하였고, 수송자극 종료시점에서 채혈한 후, 수송 자극 종료 1시간, 6시간, 그리고 18시간 후에 각각 채혈하였다. 채혈은 혈장분리를 위해 3ml용량의 EDTA VACUTAI-NER®(Becton Dickinson, USA)를 사용하여 각각 3砒씩 채혈하였다. 혈장분리를 위한 samplee 채혈 즉시 3, 500qpm에서 20분간 원심분리하여 바로 혈장을 분리하여 다른 tube에 분주한 후 실험실 분석 전까지 -7CTC 에서 냉동 보관하였다
- 채혈은수송자극 전(출발 1시간 전)에 실시하였고 수송자극 중간지점인 135km에서 채혈하였고, 수송자극 종료시점에서 채혈한 후, 수송 자극 종료 1시간, 6시간, 그리고 18시간 후에 각각 채혈하였다. 채혈은 혈장분리를 위해 3ml용량의 EDTA VACUTAI-NER®(Becton Dickinson, USA)를 사용하여 각각 3砒씩 채혈하였다.
- 치료군에 있어서는 대조군과 달리 균형 전해질 및 무기물이 첨가된 rehydrating 제제인 Lodevil®(Vetoquinol, France) 을 치 료군 4두에서 수송 1시간 전 채혈 후 즉시 IV infusion set, KRUUSE®, Denmark)를 이용하여 각 개체마다 1,000 ml 씩 20분에 걸쳐 정맥주사하였다(Table 1).
- 혈중 호르몬 검사 : Cortisol 의 분석은 혈장을 Coat-A-Count ®(DPC, USA) kit를 사용하여 처리한 후 /-Counter-Cobran ®(Packard, USA)를 사용하여 분석하였다. 印nephrine 분석은 혈장 1皿에 4N perchloric acid 125以를 가하여 15 분간방치 후 3, 000rpm에서 10분간 원심분리하여 제단백한 후, 그 상층액 500以에 Tris EDTA(pH 8.
대상 데이터
- 각각의 송신기의 신호를 수신하기 위해서 수신기는 150~ 151MHz 주파수를 수신할 수 있는 Receiver 2000®(ATS, USA)을 사용하였고, 이러한 receiver의 신호를 변환하여 출력하고 저장할 수 있는 장치로는 DCCn®(ATS, USA)를사용하였다. 심부체온과 심박수는 수송자극 30분 전에서 즉정을 시작하여 30분 간격으로 측정하였고 수송자극 종료 18시간 후까지 측정 기록하였다.
- 본 실험에 공시된 동물은 건강한 Holstein 종으로 대조군과 치료군으로 나누어 각군을 4두씩(각각 경산우 1두, 미경산우 3두) 총 8두를 공시하였다. 대조군의 평균 연령과 체중은 18.
- 심부체온을 측정하기 위하여 150.6~ 150.9MHz 대의 8개의 체온송신기(Sirtrack, New Zeala响률 사용하였고 심박 수의 측정을 위해서는 150.1 ~ 150.5MHz대의 8개의 심 박수 송신기 (Sirg比 New Zealand)를 사용하였다.
데이터처리
- 본 실험을 통하여 얻어진 자료의 시간대별 통계학적 유의성 및 군간의 통계학적 유의성은 SAS package의 Gmrnl linear Model(GLM) Procedute(SAS v«. 6.12, SAS hs血te) 을이 용하여 Duncan's multiple range test에 의해 검정하였고 P<0.05이하의 유의성만을 통계학적 차이로 인정하였다.
성능/효과
- 1. 혈중의 CBtisol의 농도의 변화는 대조군과 치료군 모두에서 수송개시 2시간 2S분에서 유의성 있는 증가(p<0.05)를나타내었고, 치료군은 수송 자극에 의한 cortisol 농도의 증가반응이 대조군 보다 경감되었다.
- 2. 혈중의 印inephrine의 농도는 대조군과 치료군 모두에서 유의성 있는 변화가 나타나지 않았지만 Epineftoe의 농도가 대조군에 비해 치료군이 낮게 나타났다(평균 181.25pg/ m£).
- 3. 심박동수는 수송개시와 함께 치료군에서는 유의성 있는 변화饵<0.05)를 나타내었고, 대조군에 있어서는 수송 시점에서 수송개시 150분 후까지 유의성 있는 변화(P<0.05)를나타내었다.
- 4. 심부체온은 수송개시 30분 후부터 수송종료 1시간 후까지 치료군에서 유의성 있는 변화(P<0.Q5)를 나타내었고, 대조군에서는 유의성이 나타나지 않았다.
- 05)를 나타내었다. 그리고 수송 종료 후 1시간과 6시간 및 18시간에서는 0.79±0.724 0.29±0.16 및 0.93±0.79 /ug/dl로 수송전과 거의 유사한 수준으로 회복되었다.
- Georgiev"는 rat에 있어서 소음이나 낮선 환경이 체온을 평균 L4℃ 증가 시킬 수 있슴을 보고하였다. 본 실험에서 체온의 변화는 수송개시 2시간 20분에 있어 다소 증가되고 안정상태의 체온보다 다소 상승된 수치가 수송 중에 나타났다. 이는 Truckfield와 Branii0이 수송 중 부신피질의 활성화에 의해 체온이 상승된다는 보고와 일치하는 결과를 보이고 있다.
- 병발하는 유력한 측정 수단으로 제시된다. 본 실험에서는 두 실험군 모두에 있어서 수송자극 개시와 더불어 급격하게 증가하여 일정수준이 유지된 다음 수송자극 180분 후에서 감소를 나타내었다. 이는 급격한 육체운동에 의한 스트레스 반응으로 나타나는 변화에 대한 연구들並8"과 일치하는 결과를 나타내었으나 수액의 투여효과가 심 박수의 안정에는 큰 도움이 되지 못하는 것으로 사료된다.
- 본 실험의 epinephrine 농도의 변화에서 시간대 별 유의성이 존재하거나 군간의 유의 수준이 존재하지는 않았지만, 수송개시후 2시간 20분에서부터 수송종료 후 6시간까지 대조군이 치료군보다 전체적으로 평균 181.25pg/ml최고 214.88pg/ml)의 높은 증가를 나타내었다. Francesco et al'과 Rulofeon et al저의 연구에 따르면 수송자극 전과 후의 비교에서 각각 50pg/m£ 이상의 증가와 133.
- 소를 23초 동안 뒤집어 보정한 연구에서는 수치가 극도로 상승한 93ng/ mC의 값을 나타내었고20, 이에 비교하여 동일한 연구자가 직립 자세에서 보정한 경우 이에 거의 반의 수준인을 나타내었다. 본 연구에서 cortsd농도의 대조군과 치료군의 최고값이 위에서 서술한 Gran血의 분류에 따르면 중간 정도의 스트레스를 받고 있는 것으로 사료된다.
- 수송자극에 의한 혈중 cortisol의 농도는 Fig 1에서 보는 바와 같이 대조군에서 수송 전 Q8O±O.56“g/dC에 대해 수송개시 2시간 20분에서 5.28±1.32您/教, 수송 종료 시점에서 4.37土 L14“g/dC로 나타났고 수송개시 2시간 20 堰에서는 최고치를 나타내 수송 전에 대해 6.6배, 수송 종료 시점에서는 수송 전에 대해 5.46배의 높은 유의성 있는 증가(P<0.05) 를 나타내었다. 그리고 수송 종료 1시간과 6시간 및 18시간 후에서는 각각 1.
- 위의 결과들을 통해서 수송 자극에 의한 스트레스를 줄이기 위한 방안으로 전해질과 무기물이 포함된 수액의 투여는 자극에 대한 신체의 과도한 반응을 경감시키는 효과가 있는 것으로 사료된다.
- 이상의 결과에서 비록 심박수와 심부체온에서는 수액의 투여에 의한 어떤 유효성을 확인하지는 못하였으나 cortisol 과 ejinegne에서 나타난 유의한 결과와 경향을 비추어 볼 때, 수송 자극에 의한 스트레스를 줄이기 위한 방안으로 전해질과 무기물이 포함된 수액의 투여는 수송에 대한 신체의 과도한 반응을 경감시키는 효과가 있는 것으로 사료된다.
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