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문제 정의
- 있지 않은 실정이다. 따라서 본 연구에서는 인류의식 생활에서 널리 이용되고 있는 부추를 과량 섭취시 개의 혈액 상에 어떠한 영향을 미치는지를 관찰하고자 본 실험을 실시하였다.
- 이와 달리 같은 백합과 식물에 속하는 양파의 경우 과량 섭취로 인한 용혈성 빈혈의 발생이 Sebrell'5에 의해 개에서 최초로 보고된 이후 Harvey 등5 Ogawa 등14의 여러 연구가들에 의해 널리 보고되었으며 또한 각종 항암 작용으로 널리 이용되고 있는 같은 백합과 식물인 마늘에 대해서도 개에서 용혈성 빈혈이 발생한다고 이 등9이 보고하였다. 따라서 본연구에서는 과량의 부추 생즙을 소형 잡종견에 단기간 투여 시에도 용혈성 빈혈이 발생 하는지를 관찰하고자 하였다.
- 본 연구에서는 식생활에 널리 이용되고 있는 부추의 단기간 과량 섭취가 혈액상에 어떠한 영향을 미치는지를 관찰하고자 소형 잡종견에 부추 생즙을 체중 kg당 5 ml씩 1일 1회 7일간 연속 경구 투여한 결과 다음과 같은 성적을 얻었다.
제안 방법
- 부추 생즙은 매일 투여 전 37℃2의 water bath에서 가온한 후 위관(Stomach tube)을 삽입하여 실험 잡종견 10두에게 체중 kg당 5 ml의 용량으로 7일간 연속 투여하였다.
- 투여 1일에 3시간, 6간, 12시간에 채혈하였으며 2일부터는 1일 1회 요골측 피하정맥 (cephalic vein)에서 채혈하였다. 채혈한 혈액은 35|11 2Na-EDTA가 함유된 eppendorf tube에 분주하여 즉시 검사하였다.
- 채혈하였다. 채혈한 혈액은 35|11 2Na-EDTA가 함유된 eppendorf tube에 분주하여 즉시 검사하였다.
- 즉, 원심 분리용 시험관에 3차 증류수(D.W) 900 gl* 넣고 시료 혈액 100 μ1 를 주입하여 충분히 혼화시키고 meta phosphate 1, 500 )11를 첨가하여 vortex mixer에서 충분히 혼화한 후, 3, 000rpm의 저온 원심 분리기에서 15분간 원 침하였으며 이 상층액 1, 000μ1를 취하여 다른 시험관에 분주하여 여기에 0.3M PB 4, 000)11 및 DTNB(5, 5'-dithidbis-2- nitrobenzoate derivatives) 500 pl 를 첨가한 후 충분히 피펫팅하여 완전히 혼화시킨 용액을 412nm의 UV spectro- photometer(Metertek SP-870, USA)에서 그 홉광도를 산정하였다. Met-hemoglobin(Met-Hb) 함량은 Nakamura 등" 의방법에 의해 측정하였다.
대상 데이터
- 실험 동물로는 임상적으로 건강한 평균 체중 4.17(±1.5 kg)의 소형 잡종견 10두를 암수 구별 없이 사용하였으며 사료와 음수는 자유 급식시켰다.
- 시판되는 부추(AZlium tuberosum Rottler)를 구입하여 깨끗이 수세한 후 수분을 제거하고 녹즙기(오스카 만능-녹즙기 Gold DA-504, 동아산업(주), Korea)를 사용하여 생즙을 얻었으며(부추 100 g에 96 ml의 생즙을 얻음) 이것을 저온 원심분리(3, 000 rpm, 15 minutes, 4℃)시켜 그 침전물은 제거하고 상층액 만을 여과하여(paper 180 mm No. 1) 냉동고에 보관하면서 시료로 사용하였다.
데이터처리
- 모든 실험 결과들은 Student's f-test를 실시하여 그 유의성을 검증하였다.
이론/모형
- 검사 항목으로는 총 적혈구 수(RBC), 총 백혈구 수(WBC),hemoglobin(Hb) concentration, mean corpuscular volume (MCV) 및 mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC)는 자동 혈구 계산기 (HEMAVET 600, USA)를 사용하여 측정하였으며 packed cell volume(PCV)은 Micro- hematocrit법을 이용해서 측정하였다. 또한 적혈구내 reduced glutathione (GSH) 함량은 Beutler 등?의 방법에 의해 측정하였다.
- 3M PB 4, 000)11 및 DTNB(5, 5'-dithidbis-2- nitrobenzoate derivatives) 500 pl 를 첨가한 후 충분히 피펫팅하여 완전히 혼화시킨 용액을 412nm의 UV spectro- photometer(Metertek SP-870, USA)에서 그 홉광도를 산정하였다. Met-hemoglobin(Met-Hb) 함량은 Nakamura 등" 의방법에 의해 측정하였다.
성능/효과
- 총 적혈구 수(RBC)는 부추 생즙 투여 후 1일, 2일, 3일, 4일, 6일에 유의한(P<106 μ1으로써 투여 전 평균 632X104/)11 에 비해 최소치를 나타내었으며(Fig 1) 혈구 용적(PCV)은 부추생즙 투여 후 12시간, 2일, 6일, 7일에 유의한(P<0.05) 감소를 나타내었으며 7일에는 평균 39.8%로써 투여 전 평균 44.9%에 비해 최소치를 나타내었다.
- 혈색소(Hb) 함량은 전 실험 기간 동안 유의한(P<0.05) 감소를 나타내었으며 특히 7일째 그 평균이 12.3 g/dl으로써 투여 전 평균 14.3 g/dl에 비해 최소치를 나타내었으며(Fig 3) 평균 혈구 혈색소 농도(MCHC)는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 4일, 5일, 6일, 7일에 유의한(P<0.05) 감소를 나타내었으며 4일에는 평균 29.6%으로써 투여 전 평균 32% 에 비하여 최소치를 나타내었다.(Fig 4)
- 평균 적혈구 용적(MCV)은 부추 생즙 투여 후 1일, 2일, 3일, 4일에 유의한(P<0.05) 증가를 나타내었으며 특히 3일에는 평균 87.7 fl로써 투여 전 평균 71.4fl에 비하여 최대치를 나타내었다.(Fig 5)
- 총 백혈구 수(WBC)는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 12시간,1일, 5일에 유의한(P<0.05) 감소를 나타내었으며 특히 3시간에는 평균 2171로써 투여 전 평균 15350μl 에 비하여 최대치를 나타내었다.(Fig 6)
- Reuced Glutathione(GSH) 함량은 부추 생즙 투여 후 3시간, 3일, 7일에 유의한(P<0.05) 증가를 나타내었으며 특히 3 일에는 평균 5.48mg/dl로써 투여 전 평균 3.61mg/dl 에 비하여 최대치를 나타내었다.(Fig 7) 또한 Met-hemoglobin (Met-Hb) 함량은 전 실험 기간 동안 유의한(P<0.
- 본 실험에서 체중 kg당 5 ml 의 함량으로 부추 생즙을 투여한 결과 총 적혈구 수(RBC)는 투여 전의 평균 632X 104/ μl에 비해 투여 후 3일에 평균 493X10%d로서 유의한 (P<0.05) 감소를 나타내었다. 이러한 결과는 Harvey 등七 Ogawa 등", 이 등8 이 보고한 개에서 과량의 양파, 마늘 및 미나리를 투여했을 때 나타나는 총 적혈구 수 감소 경향과 일치하는 것으로 생각된다.
- 8% 로서 최소치를 나타내었으나 이러한 결과는 Anderson과 Geel가 보고한 정상 혈구 용적인 37~55%와 비교해 볼 때 정상 범위 내에서의 변화로 인정된다. 혈색소(Hb) 함량은 투여 전 평균 14.3 g/dl에 비해 투여 후 7일에 평균 12.3 g/dl로서 최소치를 나타내었으며 전 실험 기간 동안 유의한(P<0.05) 감소를 나타내었다. 이러한 결과 역시 Harvey 등5 Ogawa 등14 이등 Z8이 보고한 양파, 마늘 및 미나리 투여시에 유발되는 혈색소(Hb) 함량 감소 경향과는 일치하는 것으로 생각된다.
- 이러한 결과 역시 Harvey 등5 Ogawa 등14 이등 Z8이 보고한 양파, 마늘 및 미나리 투여시에 유발되는 혈색소(Hb) 함량 감소 경향과는 일치하는 것으로 생각된다. 평균 혈구 혈색소 농도(MCHC)는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 4일, 5일, 6일, 7일에 유의한(P<0.05) 감소를 나타내었으며 투여 후 4일에는 평균 29.6%으로써 최소치를 나타내었다. 평균 적혈구 용적(MCV)은 전 실험 기간 동안 유의한 (P<0.
- 6%으로써 최소치를 나타내었다. 평균 적혈구 용적(MCV)은 전 실험 기간 동안 유의한 (P<0.05) 증가를 나타내었으며 투여 전 평균 71.4 fl에 비해 투여 후 3일에 평균 87.7 fl로서 최대치를 나타내었다. 총 백혈구 수(WBC)는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 12시간, 1일, 5일에 유의한(P<0.
- 7 fl로서 최대치를 나타내었다. 총 백혈구 수(WBC)는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 12시간, 1일, 5일에 유의한(P<0.05) 증가를 나타내었으며 투여 후 3 시간에는 평균 21, 730/μl로 최대치를 나타내었다. 이것은 Harvey 등%] 개에게 양파를 경구 투여하였을 때 평균 호중구 수치가 투여 전 9, 890/)11에 비하여 투여 후 7일에 19, 840/)11로써 현저히 증가하였다는 보고와 일치하는 결과로 생각된다.
- 적혈구 총수(RBC)는 부추 생즙 투여 후 1일, 2일, 3일, 4일, 6일에 유의한(P<104 μ1로 최소치를 나타내었다.
- 제 1철 상태 유지 및 HQ?의 해독에 중요한 역할을 하는 것으로 알려쳐 있다본 실험의, 결과 reduced glutathione (GSH)의 함량은 투여 전의 평균 3.61mg/dl 에 비해 투여 후 3일에 평균 5.48mg/dl로서 최대치를 나타내었다. Hemoglobin oxidative degradation의 중요한 전구 물질로 알려진 met-hemoglobin(Met-Hb) 함량은 투여 후 4일에 평균 2.
- 05) 감소를 나타내었으며 투여 후 3 일에는 493><104 μ1로 최소치를 나타내었다. 혈구 용적 (PCV) 은 부추 생즙 투여 후 12시간, 2일, 6일, 7일에 유의한 (P<0.05) 감소를 나타내었으며 투여 후 7일에는 평균 39.8 %로써 최소치를 나타내었다. 혈색소(Hb) 함량은 전 실험 기간 동안 유의한(P<0.
- 6%으로써 최소치를 나타내었다. 평균 적혈구 용적(MCV)은 부추 생즙 투여 후 1일, 2일, 3 일, 4일 유의한(P<0.05) 증가를 나타내었으며 투여 후 3일에는 평균 87.7 fl로 최대치를 나타내었다. 백혈구 총수(WBC) 는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 12시간, 1일, 5일에 유의한(P<0.
- 7 fl로 최대치를 나타내었다. 백혈구 총수(WBC) 는 부추 생즙 투여 후 3시간, 6시간, 12시간, 1일, 5일에 유의한(P<0.05) 증가를 나타내었으며 투여 후 3시간에는 평균21, 730/)115. 최대치를 나타내었다.
- 최대치를 나타내었다. Reuced glutathione(GSH)함량은 부추 생즙 투여 후 3시간, 3일, 7일에 유의한(P< 0.05) 증가를 나타내었으며 투여 후 3일에는 평균 5.48 mg/dl 로 최대치를 나타내었다. Met-hemoglobin(Met-Hb)함량은 실험 기간 동안 유의한(P<0.
- 48 mg/dl 로 최대치를 나타내었다. Met-hemoglobin(Met-Hb)함량은 실험 기간 동안 유의한(P<0.05) 증가를 나타내었으며, 투여 후 4일에는 평균 2.205%로 최대치를 나타내었다.
- 이상의 결과 개에게 과량의 부추 생즙을 단기간 투여할 경우 양파와 마늘 및 미나리의 과량 투여시와 유사한 용혈성빈혈이 유발되는 것으로 관찰되었다.
후속연구
- 이상의 결과, 개에게 과량의 부추 생즙을 단기간 투여할 경우 양파와 마늘 및 미나리의 과량 투여시와 유사한 용혈성 빈혈이 유발되는 것으로 확인되었으나 본 실험의 결과만으로는 부추에 함유된 어떠한 성분이 용혈성 빈혈을 유발하는지는 분석하기 곤란하며 앞으로 지속적인 연구가 더 이루어져야 할 것으로 생각된다.
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