인근적외선 분광법(Near infrared spectroscopy, NIRS)으로 얻은 디아제팜정의 스펙트럼을 부분최소자승법(Partial least squaresregression, PLSR)으로 처리하여 디아제팜정에서 디아제팜을 신속하고 간단하게 분석하는 방법을 연구하였다. 2 mg 및 5 mg 의 디아제팜정을 이용하여 검정선을 작성하고, 이 검정선의 직선성, 정량범위, 재현성 등을 검토하여 본 분석법의 정확성을 검증하였다. 2 mg의 디아제팜의 검정선의 상관계수는 0.9416이고, 검정선 표준오차(SEC)는 0.018%이였다. 5 mg의 디아제팜의 검정선의 상관계수는 0.9157이고, 검정선오차는 0.032%이였다.
인근적외선 분광법(Near infrared spectroscopy, NIRS)으로 얻은 디아제팜정의 스펙트럼을 부분최소자승법(Partial least squares regression, PLSR)으로 처리하여 디아제팜정에서 디아제팜을 신속하고 간단하게 분석하는 방법을 연구하였다. 2 mg 및 5 mg 의 디아제팜정을 이용하여 검정선을 작성하고, 이 검정선의 직선성, 정량범위, 재현성 등을 검토하여 본 분석법의 정확성을 검증하였다. 2 mg의 디아제팜의 검정선의 상관계수는 0.9416이고, 검정선 표준오차(SEC)는 0.018%이였다. 5 mg의 디아제팜의 검정선의 상관계수는 0.9157이고, 검정선오차는 0.032%이였다.
A rapid and simple determination of diazepam in intact diazepam tablets has been investigated using the near infrared spectroscopy(NIRS) combined with partial least squares regession. The separate calibration curves of 2 mg and 5 mg diazepam tablets were studied, as well as the linearity, concentrat...
A rapid and simple determination of diazepam in intact diazepam tablets has been investigated using the near infrared spectroscopy(NIRS) combined with partial least squares regession. The separate calibration curves of 2 mg and 5 mg diazepam tablets were studied, as well as the linearity, concentration range and reproducibility of those calibration curves were evaluated. The correlation coefficients of calibration curves of 2 mg and 5 mg diazepam tablets are 0.9416 and 0.9159, respectively and the standard errors of calibration curves(SEC) are 0.018% and 0.032%, respectively.
A rapid and simple determination of diazepam in intact diazepam tablets has been investigated using the near infrared spectroscopy(NIRS) combined with partial least squares regession. The separate calibration curves of 2 mg and 5 mg diazepam tablets were studied, as well as the linearity, concentration range and reproducibility of those calibration curves were evaluated. The correlation coefficients of calibration curves of 2 mg and 5 mg diazepam tablets are 0.9416 and 0.9159, respectively and the standard errors of calibration curves(SEC) are 0.018% and 0.032%, respectively.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
제안 방법
NIR 을 이용하여 디아제팜정에서 디아제팜을 분석하는 방법을 연구하였다. 검정선용 정제를 별도로 만들지 않고 시판되는 정제를 HPLC로 분석한 기준 분석치를 이용하여 검정선을 얻었다.
방법을 연구하였다. 검정선용 정제를 별도로 만들지 않고 시판되는 정제를 HPLC로 분석한 기준 분석치를 이용하여 검정선을 얻었다. 개발한 검정선의 정확성과 정밀성을 검증하여 시판되는 디아제팜정의 분석에 이용하였다.
스펙트럼은 2 nm 간격으로 32회 주사하여 투과도를 측정한 후 흡광도로 변환하여 컴퓨터의 파일에 저장하였다. 기준스펙트럼은 Sample holder를 제거한 후 공기 중에서 투과방식으로 측정하였다. 스펙트럼을 찍고 난 각각의 시료들을 50 mL 용량플라스크에 넣고 내부표준 용액 4 mL를 가하고 초음파로 10 분간 녹인 다음 메탄올로 표선까지 묽혀 시료용액으로 하였다.
본 연구에서 얻은 검정선을 이용하여 2 mg 및 5 mg 의 디아제팜정의 분석치의 재현성을 평가하였다. 같은 시료를 10회 반복 측정한 결과는 Table 3과 같다.
생각된다. 본 연구에서는 이런 단점을 피하기위해별도의 검정선용 정제를 만들지 않고 시판되는 5 개회사 제품 중 1 롯트당 15 정씩을 가지고 NIR 스펙트럼을 얻었다. 얻은 스펙트럼을 3 차 미분한 다음 PLSR(partial least squares regression) 방법으로 분석한 결과와 각각에 대한 HPLC의 기준 분석치를 가지고 검정선 작성과 검정선의 검증 및 정밀성 평가에 사용하였다.
시료 디아제팜 1 정씩을 각각 취하여 800 - 1400 nm 파장 영역에서 NIR 스펙트럼을 측정한 후 각각의 무게를 단다. 스펙트럼은 2 nm 간격으로 32회 주사하여 투과도를 측정한 후 흡광도로 변환하여 컴퓨터의 파일에 저장하였다.
시료와 시약 : 시판되는 2 mg 및 5 mg의 디아제팜정을 각 제조회사별로 두 롯트 이상을 구입하여 검정선 작성과 이 분석법의 타당성 검증에 사용하였다. 각 회사별 디아제팜 1정의 무게와 함량은 Table 1과 같다.
시료인 2 mg 및 5 mg 디아제팜정을 각 회사별로롯트당 각각 15 정씩을 취하여 시료로 하였다. 시료 디아제팜 1 정씩을 각각 취하여 800 - 1400 nm 파장 영역에서 NIR 스펙트럼을 측정한 후 각각의 무게를 단다.
시료정제를 이용하여 검정선을 얻을 때 HPLC 로 얻은 기준 분석치는 매우 정밀하여야 함으로 내부표준 물을 이용한 정밀성 실험을 하였다. 동일 시료용액을 10 회 반복 측정하여 주성분과 내부표준물의 봉우리 면적 비를 계산한 결과는 Table 2와 같다.
스펙트럼을 찍고 난 각각의 시료들을 50 mL 용량플라스크에 넣고 내부표준 용액 4 mL를 가하고 초음파로 10 분간 녹인 다음 메탄올로 표선까지 묽혀 시료용액으로 하였다. 이 용액들을 HPLC 에 주입하여 디아제팜의 표준용액의 HPLC Data와 비교하여 디아제팜의 함량(%)을 구하여 기준분석치로 하였다. 2 mg 및 5 mg 의 디아제팜정 각각 100 여정의 NIR data와 이들의 기준분석치 중 50 %는 정확한 검정선을 얻기 위해 사용하고 30 %는 이 분석법의 정확성 검증에, 나머지 20 %는 정밀도 측정에 사용하였다.
대상 데이터
이 용액들을 HPLC 에 주입하여 디아제팜의 표준용액의 HPLC Data와 비교하여 디아제팜의 함량(%)을 구하여 기준분석치로 하였다. 2 mg 및 5 mg 의 디아제팜정 각각 100 여정의 NIR data와 이들의 기준분석치 중 50 %는 정확한 검정선을 얻기 위해 사용하고 30 %는 이 분석법의 정확성 검증에, 나머지 20 %는 정밀도 측정에 사용하였다.
2와 같이 3차미분하여 사용하였다. Fig. 1에서 1400 - 1900 nm에서는 수분에 의한 잡음이 커서 이 부분의 스펙트럼은 제외하고 800 -1400 nm 사이의 스펙트럼을 이용하였다. 3차미분 스펙트럼이 2차미분 스펙트럼보다 상관성이 크기 때문에 3차미분 스펙트럼을 이용하였다.
검정선용 정제를 별도로 만들지 않고 시판되는 정제를 HPLC로 분석한 기준 분석치를 이용하여 검정선을 얻었다. 개발한 검정선의 정확성과 정밀성을 검증하여 시판되는 디아제팜정의 분석에 이용하였다.
22 를 이용하였다. 기준분석치를 얻기위해 사용한 HPLC 계는 UV검출기와 Auto-injector가 달린 Shiseido 사의 Semi-micro HPLC system(model SI-1) 이며 칼럼은 Capcellpak C18(4.6 x 250 mm)을 사용하였다.
디아제팜 표준시약은 KFDA 표준시약을 사용하였으며, 메탄올은 시약급을, HPLC 의 이동상으로 사용하는 아세토니트릴과 탈이온수는 HPLC 급을 사용하였다. 디아제팜 표준용액은 약 20 mg의 디아제팜 표준시약을 정학히 달아 100 mL 용량플라스크에 넣고 메탄올로 표선 까지 묽힌 용액을 저장용액으로 준비하였다.
데이터처리
기기 : 투과도 측정이 가능한 Foss NIRSystems사의 NIR-600 Spectrometer(Silver Spring, USA)를 사용하였으며, 각 롯트별 정제 크기와 같은 알루미늄 재질의 Sample holder(통과거리 = 0.5 Cm) 를 제작하였고 검출기는 PbS 검출기, 가동 및 통계프로그램은 VISION 2.22 를 이용하였다. 기준분석치를 얻기위해 사용한 HPLC 계는 UV검출기와 Auto-injector가 달린 Shiseido 사의 Semi-micro HPLC system(model SI-1) 이며 칼럼은 Capcellpak C18(4.
본 연구에서는 이런 단점을 피하기위해별도의 검정선용 정제를 만들지 않고 시판되는 5 개회사 제품 중 1 롯트당 15 정씩을 가지고 NIR 스펙트럼을 얻었다. 얻은 스펙트럼을 3 차 미분한 다음 PLSR(partial least squares regression) 방법으로 분석한 결과와 각각에 대한 HPLC의 기준 분석치를 가지고 검정선 작성과 검정선의 검증 및 정밀성 평가에 사용하였다. 모든 통계처리는 VISION 2.
성능/효과
3차미분 스펙트럼이 2차미분 스펙트럼보다 상관성이 크기 때문에 3차미분 스펙트럼을 이용하였다. 2 mg 및 5 mg의 디아제팜정을 가지고 통합 검정식을 얻은 결과는 적용 농도범위는 크지만 편차가 커서 상관계수가 감소하였다. 따라서 2 mg과 5 mg의 디아제팜정을 따로 분리하여 각각의 검정 선을 얻은 결과는 Fig.
같은 시료를 10회 반복 측정한 결과는 Table 3과 같다. 각각의 시료의 CV값이 0.42%와 0.19% 로 NIR 분석법의 재현성이 양호함을 알 수 있다. 분석자 간의 차이와 분석시간의 차이에 관한 정밀도를 측정한 결과는 Table 4와 같다.
4와 같다. 검정선을 바탕으로 검증시 얻은 예측표준오차 (Standard error of prediction, SEP)10는 각각 2.02% 와 1.98% 이였다. 이 값들은 SEC 값보다 크지만 의약품의 품질관리를 위한 허용오차범위 ±5% 안에 들어 있으며 시료가 다른데서 오는 결과로 생각된다.
참고문헌 (13)
D.A. Bums, E.W. Ciurczak, Handbook of Near-infra Analysis, 1-4 (1997).
European Pharmacopoeia, Near-infrared Spectroscopy, 43(1997).
P. Corti, E. Dreassi, G. Corbini, L. Montecchi, J. Paggi, Analysis, 18(2)b117 (1990).
P. Corti, E. Dreassi, G. Corbini and R. Vivia, Analysis, 19(7), 198 (1999).
C. I. Gerhausser and Karl- Artur Kovar, Applied Spectroscopy, 51(10)(1997).
W. H. T. Byron and J. Sellors, American Laboratory, 29, 20 (1997).
M. Blanco, J. Coello, H. Iturriaga and S. Maspoch, Analyst, 123, 135 (1998).
H. Chang, H. J. Kim, D.Y. Meang, and J. H. Cho, Yachak Hoeji, 42(6) 545(1998).
H.J. Kim, Analyst, 124,203 (1999).
K.W. Cha, K. R. Ze, M. O. Youn, H. C. Choi and H. J. Kim, Analytical Science & Technology, 15(2),392 (2002).
A. C. Moffst, 'Meeting the International Conference on Harmonisation Guidelines on Validation of Analytical Procedures', 20th, June (2000).
B. R. Buchanan, M. A. Baxter, and P. A. Robinson, Parmaceutical Research, 13, 4 (1996).
C. I. Gerhausser and K. A. Kovar, Applid Spectroscopy , 51, 10 (1997).
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.