당귀(Angelica gigas) 중 Decursin 및 Decursinol Angelate 추출 방법과 HPLC 분석 HPLC Analysis and Extraction Methods of Decursin and Decursinol Angelate in Angelica gigas Roots원문보기
This paper is intended as an investigation of the analysis of high-performance liquid chromatography and the method of extraction of decursin and decursinol angelate in Angelica gigas roots. There are three kinds of extraction methods: distilled water, 50% EtOH and 100% EtOH. The condition of HPLC w...
This paper is intended as an investigation of the analysis of high-performance liquid chromatography and the method of extraction of decursin and decursinol angelate in Angelica gigas roots. There are three kinds of extraction methods: distilled water, 50% EtOH and 100% EtOH. The condition of HPLC was obtained on a reversed-phase column $(Polarity\;dC_{18},\;4.6{\times}250 mm,\;5\;{\mu}m)$ using a phosphate buffer-acetonitrile-sodium lauryl sulfate as the mobile phase. Under these chromatographic conditions, UV detector was 230 nm, column temperature $30^{\circ}C$ and the speed of a current 1.0 ml/min, respectively. The results of extraction with distilled water, 50% EtOH and 100% EtOH in Angelica gigas roots were as follows. The concentrations of decursin and decursinol angelate were 182 and 153 ppm (distilled water), 3,142 and 2,547 ppm (50% EtOH) and 3,341 and 2,778 ppm (100% EtOH). There were high positive correlations between the concentrations of decursin and EtOH (r=0.8928, p<0.01) and decursinol angelate and EtOH (r=0.9009, p<0.01).
This paper is intended as an investigation of the analysis of high-performance liquid chromatography and the method of extraction of decursin and decursinol angelate in Angelica gigas roots. There are three kinds of extraction methods: distilled water, 50% EtOH and 100% EtOH. The condition of HPLC was obtained on a reversed-phase column $(Polarity\;dC_{18},\;4.6{\times}250 mm,\;5\;{\mu}m)$ using a phosphate buffer-acetonitrile-sodium lauryl sulfate as the mobile phase. Under these chromatographic conditions, UV detector was 230 nm, column temperature $30^{\circ}C$ and the speed of a current 1.0 ml/min, respectively. The results of extraction with distilled water, 50% EtOH and 100% EtOH in Angelica gigas roots were as follows. The concentrations of decursin and decursinol angelate were 182 and 153 ppm (distilled water), 3,142 and 2,547 ppm (50% EtOH) and 3,341 and 2,778 ppm (100% EtOH). There were high positive correlations between the concentrations of decursin and EtOH (r=0.8928, p<0.01) and decursinol angelate and EtOH (r=0.9009, p<0.01).
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문제 정의
따라서 본 논문에서는 HPLC에 의한 decursin 및 decursinol angelate의 분석 시스템, 즉 검출기(detector)의 종류와 파장, 컬럼(column)의 선택 및 이동상(mobile phase) 조성 등의 분석 조건과 당귀에서 decursin 및 decursinol angelate의 추출시 물과 알콜에서의 추출 효율을 알아보고자 한다.
제안 방법
검체 - 당귀는 시중에서 구입하여 항량 건조하였으며, 건 조한 당귀 50 g> 각각 탈이온수, 50% 에탄올, 100% 에탄 올을 추출기(PK.240L, Ohsung, Korea)에 넣고 탈이온수 (100℃), 50% 에탄올과 100% 에탄올(60℃)에서 5시간동안 추출하였다. 분석시료로는 각각 5번 반복 추출하여 HPLC 분석시료로 사용하였다.
음을 알 수 있었다. 그러나 본 연구에서는 보통의 당귀 중에서 보통 탕약에 제조시 사용하는 물과 유기용매인 알콜을 사용하여 추출방법에 따른 decursin의 함량 변화를 보았다.
)근을 MeOH로 환류추출하고 농축하였다. 농축된 MeOH 추출물을 EqO과 ti-BuOH로 각각 분획하였다. 그 중 EqO 분획을 n-hexane-EtOAc< 전개용매로 하여 표준물질 decursin과 decursinol angelate# 분리하였다
본 논문에서는 HPLC에 의한 decursin 및 decursinol angelate 분석 시스템 즉 검출기(detector)의 종류와 파장, 컬럼(column)의 선택 및 이동상(mobile phase) 조성 등의 분석 조건과 당귀에서 decursin 및 decursinol angelate의 추출시물과 알콜에서의 추출 효율 실험을 수행한 결과는 다음과 같다.
분석시료로는 각각 5번 반복 추출하여 HPLC 분석시료로 사용하였다. 추출공정에서 온도가 각각 다른 이유는 증류수 추출 온도는 일반 탕약의 추출 온도인 물의 비 둥 온도(100℃)이며, 에탄올 추출의 경우는 화재폭발위험성 등을 고려하여 에탄올 비등점(78℃)보다 낮은 온도(60℃)에서 추출하였다.
대상 데이터
분석 기기 - 본 실험에서 decursin 및 decursinol angelate 을 정량하기 위해 사용한 분석기기는 HPLC(Waters, U.S.A),UV/Visible SpectrophotometerCUVe 1601 PC, SHIMADZU,Japan)을 사용하였다.너PLC 분석조건 - 각 군의 시료를 원심분리와 여과로 불순물을 제거한 후 20W를 HPLC에 사용하였으며, 컬럼의온도는 30℃, 컬럼은 Polarity dC18(5 |im, 4.
240L, Ohsung, Korea)에 넣고 탈이온수 (100℃), 50% 에탄올과 100% 에탄올(60℃)에서 5시간동안 추출하였다. 분석시료로는 각각 5번 반복 추출하여 HPLC 분석시료로 사용하였다. 추출공정에서 온도가 각각 다른 이유는 증류수 추출 온도는 일반 탕약의 추출 온도인 물의 비 둥 온도(100℃)이며, 에탄올 추출의 경우는 화재폭발위험성 등을 고려하여 에탄올 비등점(78℃)보다 낮은 온도(60℃)에서 추출하였다.
데이터처리
분석방법 -각 측정항목과 분석 자료의 통계적 검정은 SPSS와 SAS를 이용하였고, 유의성 검정을 위해 r-test, 분산 분석(ANOVA) 및 correlation을 실시하였다. 표준검량선 작성 -표준물질은 MeOH로 희석하였으며,decursin 0.
성능/효과
100% 에틸알콜 추출시 당귀의 건조중량 대비 decursin 3.341%, decursinol angelate 2.778%이였고, 다음은 50% 에틸알콜이 decursin 3.142%, decursinol angelate 2.547%순이였으며, 각각 탈이온수 추출과 비교할 때에는 추출 함량에 큰 차이가 있었으며, 통계적으로도 매우 유의한 차이를 보 였다0<0.01). 따라서 순수 알콜 혼합물에서 추출이 가장 잘 되는 것을 알 수 있다.
182% 의 함량을 보였다. Decursinol angelate의 농도는 153 ppm으로 매우 작은 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 0.153%의 함량을 보였다. 따라서 물에서는 추출이 거의 일어나지 않음을 알 수 있었다.
142%의함량을 보였다. Decursinol angelate의 농도는 2, 547 ppm으로 매우 큰 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 2.547%의 함량을 보였다. 탈이온수 추출과 비교할 때에는 큰 차이가 있음을 알 수 있었으며, 통계적으로도 매우 유의하였다 (p<0.
341%의 함량을 보였다. Decursinol angelate의 농도는 2, 778 ppm으로 매우 큰 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 2.778%의 함량을 보였다. 따라서 순수 알콜 혼합물에서 추출이 가장 잘 되는 것을 알 수 있다.
29분이였다. Decursin의 농도는 182 ppm으로 매우 작은 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 디비 0.182% 의 함량을 보였다. Decursinol angelate의 농도는 153 ppm으로 매우 작은 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 0.
33분이였다. Decursin의 농도는 3, 142 ppm으로매우 큰 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 3.142%의함량을 보였다. Decursinol angelate의 농도는 2, 547 ppm으로 매우 큰 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 2.
13분이였다. Decursin의 농도는 3,341ppm으로 매우 큰 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 3.341%의 함량을 보였다. Decursinol angelate의 농도는 2, 778 ppm으로 매우 큰 피크를 보였으며, 당귀의 건조중량 대비 2.
이는 알콜농도가 증가할수록 추출되는 decursin 과 decursinol angelate의 농도가 증가함을 나타내는 것으로, 이것은 decursin과 decursinol angelate의 고유특성에 기인하는 것으로 생각된다. 따라서 물을 사용한 탕약으로 당귀중 decursin 추출 함량보다는 에틸알콜과 같은 유기용매에 의한 추출 함량이 월등히 높음을 알 수 있었다. 또한 에틸알콜과 같은 유기용매에 의한 추출 방법이 decursin의 효율적인 대 량 추출 공정으로 적합할 것으로 사료된다.
따라서 대량추출시 안전공학적인 측면에서 순 에틸알콜 추출공정보다 에틸알콜농도 50%로 추출공정을 설계하는 것이 작업환경오염 및 화재폭발위험성을 대폭 줄일 수 있을 것으로 기대된다. 에틸알콜농도 증가와 추출되는 decursin 및 decursinol angelate 농도는 양의 상관관계를 보였다 (r=0.8928, p<0.01; r=0.9009, p<0.01). 또한 에틸알콜과 같은 유기 용매에 의한 추출 방법이 decursin 및 decursinol angelate의 효율적인 대량 추출 공정으로 적합할 것으로 사 료된다.
에틸알콜농도와 decursin 및 decursinol angelate 농도간의 상관관계 - 에틸알콜 농도 증가와 추출되는 decursin 농도와는 양의 상관관계 (u0.8928, p<0.01)을 나타냈으며, decursinol angelate 농도도 양의 상관관계(i=0.9009, p<0.01)을 나타냈다. 이는 알콜농도가 증가할수록 추출되는 decursin 과 decursinol angelate의 농도가 증가함을 나타내는 것으로, 이것은 decursin과 decursinol angelate의 고유특성에 기인하는 것으로 생각된다.
547%의 함량을 보였다. 탈이온수 추출과 비교할 때에는 큰 차이가 있음을 알 수 있었으며, 통계적으로도 매우 유의하였다 (p<0.01). 따라서 물 보다는 물과 에틸알콜 혼합물에서 추출 이 매우 잘 되는 것을 알 수 있다.
후속연구
따라서 대량추출시 안전공학적인 측면에서 순 에틸알콜 추출공정보다 에틸알콜농도 50%로 추출공정을 설계하는 것이 작업환경오염 및 화재폭발위험성을 대폭 줄일 수 있을 것으로 기대된다. 에틸알콜농도 증가와 추출되는 decursin 및 decursinol angelate 농도는 양의 상관관계를 보였다 (r=0.
01). 또한 에틸알콜과 같은 유기 용매에 의한 추출 방법이 decursin 및 decursinol angelate의 효율적인 대량 추출 공정으로 적합할 것으로 사 료된다.
따라서 물을 사용한 탕약으로 당귀중 decursin 추출 함량보다는 에틸알콜과 같은 유기용매에 의한 추출 함량이 월등히 높음을 알 수 있었다. 또한 에틸알콜과 같은 유기용매에 의한 추출 방법이 decursin의 효율적인 대 량 추출 공정으로 적합할 것으로 사료된다.
참고문헌 (9)
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