선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 경구 투여가 비교적 어려운 단백질 약물을 생체적합성이 우수하고 생분해성을 가진 펙틴을 이용하여 목적하는 colon 에 전달하고자 하였다. 이온결합을 통해 펙틴, 펙틴-알긴산비드를 제조할 수 있었고, 단백질 약물인 BSA를 포함하여 방출을 행한 결과, 비드의 건조온도가 높을수록 방출률이 높은 경향을 보인 반면, 동결건조된 비드가 가장 높은 방출을 나타냈다.
- 본 연구에서는 수용성이며 비교적 정량하기 용이한 단백질 약물인 BSA를 펙틴 비드에 포함하여 방출 특성을 조사하였고, 여러 가지 펙틴 분해 효소의 영향과 가교제가 약물 방출에 미치는 영향을 조사하였다.
제안 방법
- 0.3 M 농도의 가교제로 제조된 비드 100 mg을 Tris-HCl buffer (pH 6.8) 10 ml에 분산시킨 후 배양기 (VS-8480SF, Vision, KoreaX 이용하여 37°C에서 방출을 행하면서 colon 에 도달될 것으로 예상되는 시간(5시간 경과 후)에 pectolyase, pectinase, pectin lyase, pectinesterase# 각각 22.5 U/mg을 첨가하여 BSA 방출 특성을 조사하였다. 또한, 소화기관과 유사하게 4시간 동안 pH 1.
- 각기 다른 조건(건조 온도, 가교제 농도, 알긴산 첨가)으로제조된 비드 100 mg을 각각 0.1 M HC1 buffer (pH 14)와 Tris-HCl buffer (pH 6.8) 10 ml에 분산시킨 후 배양기 (VS-8480SF, Vision, Korea)를 이용하여 37 °C 에서 방출을 행하였다. 방출된 약물의 농도는 280 nm에서 흡광도를 측정하여 작성된 검량 식으로 계산하였다.
- 제조한 비드의 형태는 전자현미경 (CH-2, Olympus, Japan) 을 이용하여 관찰하였으며, 비드의 크기를 확인하기 위해 objective micrometer (0.01 mm, Japan)를 사용하였다.
- 형성하였다(3). 펙틴 3%(w/v)와 BSA 3%(w/v)를 증류수에 용해한 후 1 ml 주사기를 이용하여 미리 제조한 0.1, 0.2, 0.3 M calcium chloride와 zinc acetate 각각의 수용액에 침전시켰다. 형성된 펙틴 비드를 증류수로 세척한 후 건조온도에 따른 약물 방출 거동을 알아보기 위해 각각 25°C, 37°C, 50°C와 동결건조 하였다.
- 펙틴의 carboxyl groups과 calcium ion, zinc ion의 양이온 사이의 이온결합을 통하여 비드를 제조하고자 하였다. Calcium 이온의 경우는 noodle과 같이 형성되었다.
- 3 M calcium chloride와 zinc acetate 각각의 수용액에 침전시켰다. 형성된 펙틴 비드를 증류수로 세척한 후 건조온도에 따른 약물 방출 거동을 알아보기 위해 각각 25°C, 37°C, 50°C와 동결건조 하였다.
대상 데이터
- 펙틴 (Low methoxy : 9%), 알긴산, trizma base는 Sigma chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용하였고, calcium chloride, zinc acetate는 Junsei chemical Co. (Japan) 에서 구입하였다. 펙틴 분해효소인 pectinase (EC 3.
- (Japan) 에서 구입하였다. 펙틴 분해효소인 pectinase (EC 3.2.1.15 from Aspergillus niger), pectin lyase (EC 4.2.2.10 Aspergillus niger), pectinesterase (EC 3.1.1.11 Aspergillus 加ger)와 약물인 Bovine serum albumin (BSA)은 Sigma Chemical Co. (USA) 에서 구입하였으며, 모든 실험 재료는 정제 공정 없이 사용하였다.
성능/효과
- 2). 0.1 M 가교제 농도의 경우 11시간에 80% 이상의 약물을 방출한 반면, 0.3 M 가교제 농도의 경우 약 40% 정도 방출하였다. 이러한 결과는 calcium chloride로 가교 하여 제조한 펙틴-알긴산 비드의 경우에서도 유사한 경향을 나타냈다 (Fig.
- 0.1, 0.2, 0.3 M의 zinc acetae로 가교된 펙틴 비드로부터 BSA를 방출한 결과 가교제의 농도가 낮을수록 약물의 방출량이 높아짐을 알 수 있었다 (Fig. 2). 0.
- Table 1 은 제조한 비드를 건조한 후 전자현미경을 통해 관찰한 결과이다. 가교제의 농도가 높아질수록 비드의 크기는 작았으며, 펙틴-알긴산 비드의 경우 zinc acetae를 가교제로 사용했을 때 입자의 크기가 calcium chHoride를 가교제로 사용했을 때보다 더 작았다.
- 또한, 가교제의 농도를 높게 처리한 비드일수록 방출률이 낮았다. 경구 투여 후 colon에 도달할 것으로 예상되는 5시간 후에 펙틴 분해효소를 처리한 결과, 효소 처리하지 않은 비드에 비해 급격한 방출이 일어났다. 이러한 결과로 colon내에 존재하는 미생물이 분비하는 효소에 의해 펙틴 비드에 포함된 약물이 방출될 것으로 판단된다.
- 이온결합을 통해 펙틴, 펙틴-알긴산비드를 제조할 수 있었고, 단백질 약물인 BSA를 포함하여 방출을 행한 결과, 비드의 건조온도가 높을수록 방출률이 높은 경향을 보인 반면, 동결건조된 비드가 가장 높은 방출을 나타냈다. 또한, 가교제의 농도를 높게 처리한 비드일수록 방출률이 낮았다. 경구 투여 후 colon에 도달할 것으로 예상되는 5시간 후에 펙틴 분해효소를 처리한 결과, 효소 처리하지 않은 비드에 비해 급격한 방출이 일어났다.
- 비드를동결 건조한 경우 6시간에 90% 이상의 약물을 방출하였고, 다른 온도 조건에 비해 가장 빠르게 약물을 방출하였다. 또한, 건조 온도가 높을수록 약물 방출 속도가 빠름을 알 수 있었다. 9시간에 50°C의 경우 약 70%, 37°C의 경우 약 60%이었고, 25 °C 의 경우 50% 미만의 약물을 방출하였다.
- 6). 또한, 소화기관과 유사한 조건으로 5시간 이전에는 pH 1.4 조건으로 그 이후에는 pH 7.4 조건으로 설정하여 방출을 행한지 5 시간 후에 pectinase를 첨가하여 방출 특성을 조사한 결과, 4 시간까지 낮은 방출률을 나타냈고, 5시간 후부터 효소에 의한 급격한 방출이 일어났다 (Fig. 7). 이러한 결과로, 목적하는 colon에 존재하는 미생물이 분비하는 효소에 의해 펙틴비드가 분해되어 약물을 효과적으로 방출할 것으로 판단된다.
- 방출 경과 5시간 후 효소를 처리하여 방출 특성을 조사한 결과, 효소의 분해로 인해 약물의 방출이 효소처리를 하지 않은 비드에 비해 급격하게 일어났으며, 그 중에서도 pectinase가 펙틴 분해에 가장 크게 영향을 미친다는 것을 알 수 있다 (Fig. 5). 펙틴-알긴산 비 드는 pectinase와 pectolyase 의 첨가 후 가장 급격한 방출을 보였고, pectin lyase는 효소를 첨가하지 않은 비드의 방출과 유사하였다 (Fig.
- 1은 각기 다른 온도(25°C, 37°C, 50°C, 동결건조) 에서건조한 펙틴 비드로부터 BSA를 방출한 결과이다. 비드를동결 건조한 경우 6시간에 90% 이상의 약물을 방출하였고, 다른 온도 조건에 비해 가장 빠르게 약물을 방출하였다. 또한, 건조 온도가 높을수록 약물 방출 속도가 빠름을 알 수 있었다.
- 경구 투여 후 colon에 도달할 것으로 예상되는 5시간 후에 펙틴 분해효소를 처리한 결과, 효소 처리하지 않은 비드에 비해 급격한 방출이 일어났다. 이러한 결과로 colon내에 존재하는 미생물이 분비하는 효소에 의해 펙틴 비드에 포함된 약물이 방출될 것으로 판단된다. 따라서, 경구로 투여된 펙틴 비드 안의 약물이 소화기관에서 안정하게 통과하고 colon에서 방출되어 효과를 나타낼 것으로 판단된디-.
- 이는 zinc 이온이 펙틴과 알긴산을 동시에 가교하기 때문이라 생각된다. 이러한 결과로 가교제의 농도가 비드의 형성에 영향을 미침으로써 약물의 방출에도 큰 영향을 미친다는 것을 알 수 있었다.
- 7). 이러한 결과로, 목적하는 colon에 존재하는 미생물이 분비하는 효소에 의해 펙틴비드가 분해되어 약물을 효과적으로 방출할 것으로 판단된다.
- 9시간에 50°C의 경우 약 70%, 37°C의 경우 약 60%이었고, 25 °C 의 경우 50% 미만의 약물을 방출하였다. 이로써 비드의 건조 온도가 방출 특성을 결정하는데 영향을 미친다는 것을 알 수 있었다.
- 전달하고자 하였다. 이온결합을 통해 펙틴, 펙틴-알긴산비드를 제조할 수 있었고, 단백질 약물인 BSA를 포함하여 방출을 행한 결과, 비드의 건조온도가 높을수록 방출률이 높은 경향을 보인 반면, 동결건조된 비드가 가장 높은 방출을 나타냈다. 또한, 가교제의 농도를 높게 처리한 비드일수록 방출률이 낮았다.
- 5). 펙틴-알긴산 비 드는 pectinase와 pectolyase 의 첨가 후 가장 급격한 방출을 보였고, pectin lyase는 효소를 첨가하지 않은 비드의 방출과 유사하였다 (Fig. 6). 또한, 소화기관과 유사한 조건으로 5시간 이전에는 pH 1.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.