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Background: One of the important factors in the prognosis of chronic hepatitis B patient is the degree of replication of hepatitis B virus (HBV). It has been known that HBV DNA polymerase plays the essential role in the replication of HBV. HBV DNA polymerase is composed of four domains, TP (Terminal...

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문제 정의

  • 본 연구에서는 단백질 priming 반응에 관여하는 TP 영역을 특이하게 인지하는 scFv를 만들고자 한다. 현재까지 B형 간염 바이러스중합효소를 인지하는 단클론 항체가 보고된 것은 TP, spacer, RNaseH의 일부분을 인지하는 것이었다.
  • Phage display에 있어 가장 중요한 두 가지의 과정에 있어, 본 실험에서는 library 크기가 작고, 항체를 선별하는 것도 용이하지 않았기 때문에 원하는 단클 론 항체를 얻기 위해서 panning이나 선별하는 방법에 대해 조정이 필요하였다. 본 연구에서는 한 번에 보다 많은 수의 클론을 선별하고, 완전한 형태를 지닌 scFv를 얻고자 하는 방법으로 colony lift assay를 시행하였다. 이 방법을 이용하면 100∼300개 정도의 집락들을 한 번에 선별하여 원하는 항체의 선별을 효과적으로 시행할 수 있는 장점이 있다(14).
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