[논문]국내산 오리나무속 식물로부터 Diarylheptanoid계열 화합물의 함량분석

임현우; 김민기; 김현정; 심재걸; 김광호; 최형균; 이민원

국내산 오리나무속 식물로부터 Diarylheptanoid계열 화합물의 함량분석
Quantitative Determination of Diarylheptanoid Compounds from Korean Alnus 원문보기

생약학회지, v.35 no.4 = no.139, 2004년, pp.384 - 387

임현우 (중앙대학교 약학대학) , 김민기 (중앙대학교 약학대학) , 김현정 (중앙대학교 약학대학) , 심재걸 (중앙대학교 약학대학) , 김광호 (중앙대학교 약학대학) , 최형균 (중앙대학교 약학대학) , 이민원 (중앙대학교 약학대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Genus Alnus are deciduous board-leaved trees or shrubs found in the damp place and mountain and more than 17 species are growing in Korea. The bark of Alnus japonica has been used for the treatment of fever, hemorrhage and diarrehea in oriental traditional medicine. Quantitative analysis of diarylheptanoids which were characteristic components of Alnus species (A. japonica, A. hirsuta, and A. hirsuta var. sibirica), has been conducted by HPLC. The results showed that these plants were rich source of diarylheptanoids and the amount of oregonin and hirsutanonol which were major diarylheptanoids showed seasonal variation.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

(2)3)즉, 이상과 같은 diarytheptanoid계열 화합물들은 Alnus속 식물의 주요 생리활성 물질로 판단된다. 이에 본 연구자들은 이들 성분들의 자원적 연구의 측면에서 오리나무속 식물중 국내 주요한 자생종들인 오리나무(Alnus japonica), 물오리나무(Alnus hirasuta) 및 물갬나무(Alnus hirsuta var. sibirica)의 수피로 부터 주성분으로 판단되는 oregonin (1)과 hirsutanonol (2)의 함량을 조사하였다.

제안 방법

hirsuta var. sibiricae] 수피로부터 주 diarytheptanoid인 oregonin (1) 과 그의 aglycone인 hirsutanonol (2)을 HPLC에 의해 분석하였다. 본 실험에서는 C₁₈ 역상 column을 사용하여, 전개 분리되는 최적용매조건을 찾기 위하여 이동상으로 HQ와 acetonitrile을 여러가지 혼합비율로 혼합하여 그 분리능을 측정 검토한 결과, 용매조건은 H₂O : acetonitrile=90: 10의 조성 에서 시 작하여 24분후 H₂O : acetonitrile=60 : 40인 gradient mode에서 분석이 잘 되었으며, 파장은 280 nm에서 최대 흡수파장을 나타내었다.
이 stock solutione- 희석하여 10, 20, 40, 60, 80, 100 ppm 농도의 표준용액을 조제하였다. 각 표준용액을 20 W씩 취하여 HPLC chromatograme얻었고, 여기서 얻은 농도에 따른 peak area를 바탕으로 검량선을 작성하였다. 표품 oregonin과 hirsutamonol의 분석조건을 아래와 같이 설정한 다음, 이 분석조건에 따라 각각의 시료중 oregonin (1)과 hirsutanonol (2)의 정량을 실시하였다.
단, 6월에 채집한 물갬나무수피의 경우 oregonir과hirsutanonol의 농도가 검량선에 포함되도록 이미 조제한 미지검액을 각각 3예]와 2배 희석하여 미지검액으로 사용하였다. 물갬나무의 수피로부터 분리, 정제한 표품인 oregonin과 hirsutanonol을 각각 2 mg 을 정확히 취 해 80% MeOH를 가하여 전체량이 20 µl가 되도록 하여 stock solution(100 ppm)을 조제하였다. 이 stock solutione- 희석하여 10, 20, 40, 60, 80, 100 ppm 농도의 표준용액을 조제하였다.
실험방법 —오리나무, 물오리나무, 물갬나무수피를 건조하여 가루로 분쇄하고 각각 2 g 씩 취하여 80% MeOH 50 ml 로 2~3시간씩 S회 가온 추출 하여 이를 합한 후 여과하여 농축하고 그 농축액을 정확히 50 m/(80% MeOH)에 녹여 미지검액으로 하였다. 단, 6월에 채집한 물갬나무수피의 경우 oregonir과hirsutanonol의 농도가 검량선에 포함되도록 이미 조제한 미지검액을 각각 3예]와 2배 희석하여 미지검액으로 사용하였다.
물갬나무의 수피로부터 분리, 정제한 표품인 oregonin과 hirsutanonol을 각각 2 mg 을 정확히 취 해 80% MeOH를 가하여 전체량이 20 µl가 되도록 하여 stock solution(100 ppm)을 조제하였다. 이 stock solutione- 희석하여 10, 20, 40, 60, 80, 100 ppm 농도의 표준용액을 조제하였다. 각 표준용액을 20 W씩 취하여 HPLC chromatograme얻었고, 여기서 얻은 농도에 따른 peak area를 바탕으로 검량선을 작성하였다.
각 표준용액을 20 W씩 취하여 HPLC chromatograme얻었고, 여기서 얻은 농도에 따른 peak area를 바탕으로 검량선을 작성하였다. 표품 oregonin과 hirsutamonol의 분석조건을 아래와 같이 설정한 다음, 이 분석조건에 따라 각각의 시료중 oregonin (1)과 hirsutanonol (2)의 정량을 실시하였다.

대상 데이터

실험재료 - 본 실험에서 사용한 오리나무(Alnus japonica, 2002년, 11월), 물오리나무(Alnus hirsuta, 2002년, 11월), 물갬나무 (Alnus hirsuta var. sibirica, 2004년 6월 및 11월)의수피를 청계산에서 채집하여 건조후 사용하였다.

성능/효과

그 결과, Alnus속 식물중 오리나무 및 물갬나무(11월 채집)는 2의 함량(0.093±0.002%, 0.127±0.002%)이 1의 함량(0.054 ± 0.000%, 0.038 ±0.011%)보다 많았으며, 물오리나무(11월 채집)에서는 1의 함량(0.090±0.002%)이 2의 함량(0.027 ± 0.002%)보다 많았다. 또한 물갬나무는 6월에 채집한 것은 배당체인 1의 함량(7.
또한 표품 1과 2의 retention time과 미지검액중의 1과 2의 retention time이 동일함을 확인할 수 있었으며 HPLC 분석에 의한 각 미지검액의 chromatogram으로부터 얻은 오리나무, 물오리나무, 물갬나무의 수피에서의 1과 2의 평균 peak area를 각각의 표준용액 검량선에 의하여 함량을 결정하였다(Fig. 3~6, Table I).
sibiricae] 수피로부터 주 diarytheptanoid인 oregonin (1) 과 그의 aglycone인 hirsutanonol (2)을 HPLC에 의해 분석하였다. 본 실험에서는 C₁₈ 역상 column을 사용하여, 전개 분리되는 최적용매조건을 찾기 위하여 이동상으로 HQ와 acetonitrile을 여러가지 혼합비율로 혼합하여 그 분리능을 측정 검토한 결과, 용매조건은 H₂O : acetonitrile=90: 10의 조성 에서 시 작하여 24분후 H₂O : acetonitrile=60 : 40인 gradient mode에서 분석이 잘 되었으며, 파장은 280 nm에서 최대 흡수파장을 나타내었다. 이러한 조건에서 1과 2의 각 표준용액을 20 µl 씩 취하여 HPLC chromatogram을 얻었고(Fig.
본 실험에서는 C₁₈ 역상 column을 사용하여, 전개 분리되는 최적용매조건을 찾기 위하여 이동상으로 HQ와 acetonitrile을 여러가지 혼합비율로 혼합하여 그 분리능을 측정 검토한 결과, 용매조건은 H₂O : acetonitrile=90: 10의 조성 에서 시 작하여 24분후 H₂O : acetonitrile=60 : 40인 gradient mode에서 분석이 잘 되었으며, 파장은 280 nm에서 최대 흡수파장을 나타내었다. 이러한 조건에서 1과 2의 각 표준용액을 20 µl 씩 취하여 HPLC chromatogram을 얻었고(Fig. 1), 여기서 얻은 peak area와 농도의 관계로부터 검량선을 작성한 결과 10-100 ppm의 농도범위에서 희귀 직선 방정식은 1과 2가 각각 y=0.081142x, y=0.0104499x이고, R-square값이 각각 0.999225, 0.992951로서 1.0에 근접하여 그 직선성이 인정되었다(Fig. 2).
122%에 이르는 높은 함유상태를 나타내었으며 oregonin (1)의 경우 물오리나무의 수피가, hirsutanonol (2)은 물갬나무가 자원적 측면에서 우수하게 나타났다. 특히, 물갬나무의 경우로 볼 때 이들 diarytheptanoid는 11월보다는 6월에 더욱 높은 함량으로 함유된 것으로 파악되었으며 배당체인 oregonin (1)이 상대적으로 많이 함유된 것으로 나타났다.
현재 많은 흥미있는 생리활성이 보고되고 있는 diaiytheptanoid glycoside 인 oregonin (1) 과 그의 aglycone 인 hirsutanonol (2)의 Alnuse- 식물중 오리나무(AZzw/s japonica}, 물오리나무hirsuta), 물갬나무(Alnus hirsuta var. sibirica) 의 수피중의 함량을 HPLC> 통하여 검토한 결과 diarytheptanoid glycoside인 oregonin (1)의 함유량은 11월에 0.038-0.093%, hirsutanonol (2)은 0.027~0.122%에 이르는 높은 함유상태를 나타내었으며 oregonin (1)의 경우 물오리나무의 수피가, hirsutanonol (2)은 물갬나무가 자원적 측면에서 우수하게 나타났다. 특히, 물갬나무의 경우로 볼 때 이들 diarytheptanoid는 11월보다는 6월에 더욱 높은 함량으로 함유된 것으로 파악되었으며 배당체인 oregonin (1)이 상대적으로 많이 함유된 것으로 나타났다.

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