소리쟁이 잎과 뿌리 성분 분석 및 사람 조골 유사 MG-63 세포 분화에 미치는 효과 비교 Comparative Analysis of the Constituents of the Leaves and Roots of Rumex crispus and their Effects on the Differentiation of Human Osteoblast-like MG-63 Cells원문보기
Rumex crispus (curled dock), which is a perennial wild plant, has long been used as a laxative, astringent, and medicine to treat blood and skin diseases. We recently reported that the roots of R. crispus are an effective nutraceutical for bone. This study prepared ethanol extracts of the leaves and...
Rumex crispus (curled dock), which is a perennial wild plant, has long been used as a laxative, astringent, and medicine to treat blood and skin diseases. We recently reported that the roots of R. crispus are an effective nutraceutical for bone. This study prepared ethanol extracts of the leaves and roots of R. crispus, and analyzed the major constituents using liquid chromatography and mass spectrometry. In addition, their effects on the proliferation and differentiation of human osteoblast-like MG-63 cells, such as cell viability, alkaline phosphatase (ALP) activity, collagen content, and mineralization, were compared. The chromatograms of the chemical constituents of the two extracts exhibited quite different profiles: quercetin and quercitrin were identified as major peaks in the leaf extract, whereas cinnamtannin B1 and procyanidin isomers were the major peaks for the root extract. Neither extract was cytotoxic at concentrations of < $25{\mu}g/ml$. ALP activity and collagen synthesis-which are markers of the early stage of osteogenesis-in MG-63 cells were significantly increased upon the addition of the root extract compared with the addition of the leaf extract. In contrast, the leaf extract had a more stimulatory effect on mineralization-which is marker of the late stage of osteogenesis-in MG-63 cells than did the root extract. In conclusion, extracts of both leaves and roots of R. crispus stimulated the bone-forming activity of osteoblasts; in particular, the root extract was more effective in the early stage of osteoblast differentiation, while the leaf extract was more effective in the late stage. This difference in anabolic activity may be due to differences in the constituents of the leaves and roots. The leaves and roots of R. crispus appear to complement each other as stimulators of bone formation.
Rumex crispus (curled dock), which is a perennial wild plant, has long been used as a laxative, astringent, and medicine to treat blood and skin diseases. We recently reported that the roots of R. crispus are an effective nutraceutical for bone. This study prepared ethanol extracts of the leaves and roots of R. crispus, and analyzed the major constituents using liquid chromatography and mass spectrometry. In addition, their effects on the proliferation and differentiation of human osteoblast-like MG-63 cells, such as cell viability, alkaline phosphatase (ALP) activity, collagen content, and mineralization, were compared. The chromatograms of the chemical constituents of the two extracts exhibited quite different profiles: quercetin and quercitrin were identified as major peaks in the leaf extract, whereas cinnamtannin B1 and procyanidin isomers were the major peaks for the root extract. Neither extract was cytotoxic at concentrations of < $25{\mu}g/ml$. ALP activity and collagen synthesis-which are markers of the early stage of osteogenesis-in MG-63 cells were significantly increased upon the addition of the root extract compared with the addition of the leaf extract. In contrast, the leaf extract had a more stimulatory effect on mineralization-which is marker of the late stage of osteogenesis-in MG-63 cells than did the root extract. In conclusion, extracts of both leaves and roots of R. crispus stimulated the bone-forming activity of osteoblasts; in particular, the root extract was more effective in the early stage of osteoblast differentiation, while the leaf extract was more effective in the late stage. This difference in anabolic activity may be due to differences in the constituents of the leaves and roots. The leaves and roots of R. crispus appear to complement each other as stimulators of bone formation.
* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.
문제 정의
본 연구에서는 소리쟁이 잎과 뿌리 각각의 ethanol 추출물을 대상으로 UPLC, LC-MS를 이용하여 성분을 분석하고 사람 조골 유사세포인 MG-63 세포를 이용하여 세포 생존율과 ALP 활성, collagen 형성, 석회화 결절 형성 정도에 미치는 영향을 연구하였다.
가설 설정
골 재형성 과정은 국소적으로 좁은 부위에서 일정한 주기로 일어나고, 골격계의 구조와 기능은 전신적인 호르몬과 국소적 인자 사이의 상호작용에 의해 조절된다.1,2) 골 흡수량과 골 형성량 사이의 균형이 파괴되면 골격의 이상이 발생하게 된다.
제안 방법
MG-63 세포를 24-well plate에 3×104 cells/well의 농도로 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 동안 배양한 후, 50 μg/ml ascorbic acid(Sigma), 10 mM β-glycerophosphate(Sigma), 10−7 M dexamethasone(Sigma)이 포함된 DMEM 배지에 추출물을 농도별로 첨가한 새 배양액으로 교환하였으며 추출물을 포함하지 않은 배지를 대조군으로 하였다.
배양한 세포를 trypan blue 염색법으로 세포수를 측정한 후 96-well plate에 4×103 cells/well의 농도로 200 μl씩 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 배양 후 배지를 제거하였다.
본 연구에서는 소리쟁이의 식용으로 사용하는 잎과 약용으로 사용하는 뿌리 추출물의 조골세포 분화 활성에 대해 비교하고자, liquid chromatography-mass spectrometry(LC-MS) 분석을 통하여 두 추출물의 성분상 차이점을 비교하고, 사람 조골 유사 MG-63 세포에 각 추출물을 처리하여 세포 증식율, alkaline phosphatase(ALP) 활성, collagen 함량, 석회화 결절 형성을 확인하였다.
소리쟁이 잎과 뿌리 추출물은 25 μg/ml보다 낮은 범위에서 세포 독성을 나타내지 않았으며 뿌리 추출물은 1 μg/ml 농도에서 세포 생존율을 유의하게 증가시켰다. 세포 생존율 실험을 시행한 농도 범위 내에서 낮은 농도 처리시 뿌리 추출물이 잎 추출물보다 MG-63의 세포 생존율에 긍정적인 효과를 나타냈으며, 세포 생존율 실험에서 독성을 나타내지 않는 범위에서 조골세포의 활성과 분화 실험을 진행하였다.
세포는 37°C, 5% CO2의 환경에서 배양하였으며, 세포가 충분한 증식이 일어나는 3~4일 간격으로 계대 배양하였다.
세포의 현탁액을 −70°C에서 동결하고 37°C에서 해동하여 세포막을 파괴한 후 4°C, 14,000×g에서 10분간 원심분리하여 상층액만 취하였다.
소리쟁이 잎과 뿌리 추출물을 각각 조골세포 분화 배지에 희석하여 MG-63 세포에 처리하고 8일 동안 배양 후 무기질화된 세포 기질의 칼슘에 특이적으로 결합하는 Alizarin red S로 염색하여 석회화 결절 형성 정도를 측정하였다. 소리쟁이 잎 추출물 은 1 μg/ml에서 20 μg/ml 사이의 농도 범위에서 MG-63 세포의 석회화 결절 형성을 농도 의존적으로 유의하게 증가시켰으며, 특히 20 μg/ml 처리시 대조군에 비해 석회화 형성을 121.
소리쟁이 잎과 뿌리 추출물이 사람 조골세포인 MG-63의 생존율에 미치는 영향을 평가하고 조골세포 활성 및 분화 실험에 사용할 추출물의 적절한 농도 범위를 결정하기 위하여 WST-8 assay를 실시하였다.
소리쟁이 잎과 뿌리를 분리하여 각각 3g씩 취하고 70% ethanol에서 3일 동안 추출하여 얻은 추출액을 여과 후 감압 농축, 동결 건조하여 각각의 추출 분말을 얻었다. 소리쟁이 잎 추출 분말은 337.
소리쟁이를 3차 증류수로 깨끗이 수세하고 잎과 뿌리 부분으로 분리한 후 세절하여 3일간 음건한 후 분쇄하였다. 소리쟁이 잎과 뿌리의 분쇄물을 각각 3 g 씩 취하고 70% ethanol 30 ml를 가한 후 실온에서 교반하며 72시간 동안 추출하였다. 이 추출액을 770×g, 60분간 원심분리하여 얻은 상층액을 0.
본 실험에 사용된 소리쟁이는 제주도 소재 제주자원식물산업 연구소에서 구입하여 외부 형태를 비교한 후 사용하였다. 소리쟁이를 3차 증류수로 깨끗이 수세하고 잎과 뿌리 부분으로 분리한 후 세절하여 3일간 음건한 후 분쇄하였다. 소리쟁이 잎과 뿌리의 분쇄물을 각각 3 g 씩 취하고 70% ethanol 30 ml를 가한 후 실온에서 교반하며 72시간 동안 추출하였다.
소리쟁이의 잎과 뿌리 성분을 비교하기 위해 Ultimate 3000 Rapid Seperation LC system(UPLC, Thermo Scientific Dionex)과 Orbitrap Q exactive mass spectrometer(Thermo Scientific Dionex)를 이용한 LC-MS 분석을 실행하였다. 이동상 A는 0.
2)(Sigma)으로 실온에서 10분간 염색하였다. 염색된 세포를 증류수로 세척 후 PBS를 가하고 15분 동안 방치하여 비특이적인 염색을 줄이도록 하였다. PBS를 제거하고 10%(w/v) cetylpyridinium chloride (Sigma)를 첨가한 10 mM sodium phosphate(pH 7.
용해된 세포의 상층액과 기질인 p-nitrophenyl phosphate를 30분간 37°C에서 반응시킨 후 microplate reader를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하고 단백질량으로 나누어 단위단백질 함량 당 효소 활성도를 산출하였다.
이 결과를 바탕으로 소리쟁이 잎과 뿌리 추출물이 MG-63 세포의 ALP 활성, collagen 형성, 석회화 결절 형성에 미치는 영향을 관찰하는 실험에서는 추출물 농도를 25 μg/ml 미만이 되도록 배지에 희석하여 처리하였다.
MG-63 세포를 24-well plate에 3×104 cells/well의 농도로 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 동안 배양한 후, 50 μg/ml ascorbic acid, 10 mM β-glycerophosphate, 10−7 M dexamethasone이 포함된 DMEM 배지에 추출물을 농도별로 첨가한 새 배양액으로 교환하였다. 이 후 3~4일마다 추출물을 포함한 배양액으로 교환하면서 8일간 배양하였으며 추출물을 포함하지 않은 DMEM 배지에서 배양한 세포군을 대조군으로 하였다. 배양 종료 후 배지를 제거하고 PBS로 세척한 후 70% ethanol로 4°C에서 1시간 동안 고정하고 40 mM Alizarin red solution(pH 4.
7 μm) column을 온도가 40°C로 유지된 상태에서 사용하였다. 이동상의 유속은 0.3 ml/min으로 유지하고, gradient는 5%의 이동상 B로 시작하여 30분에 70%로 도달하도록 하였고, 30분 이후에는 column의 세척과 안정화를 하였다. 소리쟁이 뿌리 또는 잎 에탄올 추출 분말을 이동상 A에 10 mg/ml의 농도로 녹이고 그 중 10 μl를 각각 주입하였다.
조골세포 분화에 필요한 ascorbic acid와 β-glycerophosphate이 포함된 DMEM 배지에 소리쟁이 잎과 뿌리 추출물을 각각 희석하여 MG-63 세포에 처리하고 3일 동안 배양 후 Sirius red 염색법을 이용하여 collagen 함량을 측정하였다.
추출물을 농도별로 희석하여 첨가한 DMEM 배지를 각 well에 100 μl씩 분주하고 아무 처리하지 않은 DMEM 배지를 처리 한 세포군를 대조군으로 하여 72시간 동안 배양하였다.
소리쟁이 잎과 뿌리 추출물이 사람 조골세포인 MG-63의 생존율에 미치는 영향을 평가하고 조골세포 활성 및 분화 실험에 사용할 추출물의 적절한 농도 범위를 결정하기 위하여 WST-8 assay를 실시하였다. 추출물을 처리하고 3일 배양 후 MG-63 세포에 WST-8을 첨가하였을 때 WST-8 formazan으로 환원된 정도를 측정하고 대조군에 대한 백분율로 나타내었다. 소리쟁이 잎 추출물은 10 μg/ml 이하의 농도에서는 세포 독성을 나타내지 않았으며 25 μg/ml 농도로 처리한 군의 세포생존율은 89.
추출물이 조골세포의 ALP의 활성에 미치는 영향을 관찰하기 위해 p-nitrophenyl phosphate(Sigma)의 가수분해 반응에 ALP가 촉매로 작용하여 생성되는 산물인 p-nitrophenol의 양을 측정하여 ALP의 농도를 간접적으로 산출하였다. MG-63 세포를 24-well plate에 3×104 cells/well의 농도로 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 배양 후 추출물을 각각 농도별로 첨가한 배지 또는 아무것도 처리 하지 않은 DMEM 배지(대조군)로 교환하여 72시간 동안 배양하였다.
대상 데이터
Human osteoblast-like MG-63 cell은 한국 세포주 은행에서 구입하였다. 배양배지는 Dulbecco's modification of Eagle's medium(DMEM, Corning)에 10%의 FBS(Gibco BRL)와 1%의 penicillin 및 streptomycin(Gibco BRL)를 혼합하여 사용하였다.
배양배지는 Dulbecco's modification of Eagle's medium(DMEM, Corning)에 10%의 FBS(Gibco BRL)와 1%의 penicillin 및 streptomycin(Gibco BRL)를 혼합하여 사용하였다.
본 실험에 사용된 소리쟁이는 제주도 소재 제주자원식물산업 연구소에서 구입하여 외부 형태를 비교한 후 사용하였다. 소리쟁이를 3차 증류수로 깨끗이 수세하고 잎과 뿌리 부분으로 분리한 후 세절하여 3일간 음건한 후 분쇄하였다.
소리쟁이 잎 추출 분말은 337.0 mg(수득률 11.2%)이고, 뿌리 추출 분말은 365.2 mg(수득률 12.2%)이었으며 −20°C에서 냉동보관하고, 분석과 세포 실험에 사용하였다.
데이터처리
본 실험의 정량적인 결과는 평균값과 표준편차로 표시하였으며 통계적인 차이는 Student's t-test를 이용하여 분석하였다.
이론/모형
crispus extracts on the proliferation of human osteoblast-like MG-63 cells (□, leaves; ■, roots). Cells were incubated with each extract for 3 days in 96-well plates, and cell viability was measured by WST-8 assay. Data shown are the mean and SD values of three independent samples.
1076 m/z 값으로 검출 되었고, 이 물질의 화학식은 C21H20O11이며, quercitrin으로 대표되는 quercetin의 배당체 형태로 확인되었다(Table I). 상기 확인된 물질들은 LC-MS로 분석한 결과를 바탕으로 선행 연구들과 데이터베이스 METLIN(Metablite and Tandem MS Database)22)을 활용하였다.
추출물의 세포독성은 Tominaga 방법16)에 따라 2-(2-methoxy4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2Htetrazolium, monosodium salt(WST-8, Dojindo) assay로 측정하였다. 배양한 세포를 trypan blue 염색법으로 세포수를 측정한 후 96-well plate에 4×103 cells/well의 농도로 200 μl씩 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 배양 후 배지를 제거하였다.
추출물이 조골세포의 collagen 형성에 미치는 영향을 평가하기 위하여 Sirius red 염색법을 이용하였다. MG-63 세포를 24-well plate에 3×104 cells/well의 농도로 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 동안 배양한 후, 50 μg/ml ascorbic acid(Sigma), 10 mM β-glycerophosphate(Sigma), 10−7 M dexamethasone(Sigma)이 포함된 DMEM 배지에 추출물을 농도별로 첨가한 새 배양액으로 교환하였으며 추출물을 포함하지 않은 배지를 대조군으로 하였다.
추출물이 조골세포의 석회화 결절 형성에 미치는 영향을 관찰하기 위해 Alizarin red S 염색법을 이용하였다. MG-63 세포를 24-well plate에 3×104 cells/well의 농도로 분주하고 세포들이 부착할 수 있도록 24시간 동안 배양한 후, 50 μg/ml ascorbic acid, 10 mM β-glycerophosphate, 10−7 M dexamethasone이 포함된 DMEM 배지에 추출물을 농도별로 첨가한 새 배양액으로 교환하였다.
성능/효과
24) Fig. 3에 나타낸 바와 같이 소리쟁이 잎과 뿌리 추출물은 0.5 μg/ ml에서 5 μg/ml 사이의 농도 범위에서 MG-63 세포의 ALP 활성을 유의하게 증가시켰으며 소리쟁이 잎 추출물보다 뿌리 추출물이 더 높은 상승효과를 나타내었다.
25) 그 중 ALP와 type 1 collagen은 세포 증식 말기와 세포외 기질 형성 단계에서 높게 발현되므로 조골세포의 초기 분화 마커로 이용되고,26) 석회화 결절의 형성은 조골세포 분화의 최종 단계에서 나타나므로 후기 분화 마커로 이용된다.27) 소리쟁이 잎과 뿌리 추출물 모두 세포 독성을 나타내지 않는 범위에서 ALP 활성을 유의하게 증가시켰으며 뿌리 추출물이 잎 추출물보다 높은 효과를 보였다. MG-63 세포에서 collagen 형성은 잎과 뿌리 추출물에 의해 농도 의존적으로 유의하게 상승하였으며 0.
3) 이와 달리, 조골세포에 작용하여 골형성을 증가시킴으로써 골다공증 치료효과를 보이는 골형성 자극제는 임상적으로 사용되는 것으로 부갑상선 호르몬이 유일한 것으로 알려져 있다.5) 부갑상선 호르몬은 골흡수 억제제가 효과를 보이기 어려운 경우에 적용가능하다는 장점을 지니지만,6) 매우 제한적인 상황에서만 사용해야하는 단점이 있다.7) 따라서 골형성을 촉진시키는 골다공증 치료제 및 기능성 식품의 개발이 필요한 실정이며 그 원료로서 이용 가능한 천연물 소재에 대한 관심이 고조되고 있다.
MG-63 세포에서 collagen 형성은 잎과 뿌리 추출물에 의해 농도 의존적으로 유의하게 상승하였으며 0.5 μg/ml에서 5 μg/ml 사이의 농도 범위에서는 뿌리 추출물이, 10 μg/ml의 농도에서는 잎 추출물의 효과가 더 높았다.
0497m/z 값으로 검출되었고, 이 물질의 화학식은 C15H10O7이며, flavonoid 중 하나인 quercetin으로 확인되었다. 또한 다른 하나는 449.1076 m/z 값으로 검출 되었고, 이 물질의 화학식은 C21H20O11이며, quercitrin으로 대표되는 quercetin의 배당체 형태로 확인되었다(Table I). 상기 확인된 물질들은 LC-MS로 분석한 결과를 바탕으로 선행 연구들과 데이터베이스 METLIN(Metablite and Tandem MS Database)22)을 활용하였다.
52분에 하나의 주요 피크가 존재하는 반면, 소리쟁이 뿌리 에탄올 추출물은 주된 분석시간인 5분~20분 사이에 다양한 물질에 의한 피크가 존재하였다. 보다 상세한 분석의 결과로 피크 높이가 0.05 UV absorbance 이상인 피크들의 수는 소리쟁이 잎에서 16개, 소리쟁이 뿌리에서 21개로 나타났으며, retention time(RT)이 정확히 일치하는 피크는 전혀 없었다. 단, RT가 ±0.
소리쟁이 뿌리 추출물은 10 μg/ml 이하의 농도에서는 세포 독성을 나타내지 않았으며 1 μg/ml 농도로 처리한 군의 세포 생존율은 111.3%로 유의하게 증가하였고 25 μg/ml의 농도에서 세포생존율은 대조군에 비하여 87.7%로 나타났다(Fig. 2).
소리쟁이 뿌리 추출물은 잎과는 서로 다른 종류의 성분들을 함유하고 있으며 특히 뿌리의 주요성분이 잎에서는 확인되지 않은 것으로부터, 소리쟁이 뿌리 추출물이 골세포에 미치는 유효한 작용은 잎의 그것과는 본질적인 차이가 있으며 이 효과는 단일성분 혹은 복합성분에 의한 것으로 확인된다.
소리쟁이 잎 추출물 은 1 μg/ml에서 20 μg/ml 사이의 농도 범위에서 MG-63 세포의 석회화 결절 형성을 농도 의존적으로 유의하게 증가시켰으며, 특히 20 μg/ml 처리시 대조군에 비해 석회화 형성을 121.5% 증가 시켰다(Fig. 5).
소리쟁이 잎 추출물의 분석 결과, RT 12.52분에서 2개의 m/z 값을 갖는 피크가 확인되었으며, 그 중 하나는 분자에 수소가 하나 첨가되어 이온화된 303.0497m/z 값으로 검출되었고, 이 물질의 화학식은 C15H10O7이며, flavonoid 중 하나인 quercetin으로 확인되었다. 또한 다른 하나는 449.
소리쟁이 잎과 뿌리 추출물은 25 μg/ml보다 낮은 범위에서 세포 독성을 나타내지 않았으며 뿌리 추출물은 1 μg/ml 농도에서 세포 생존율을 유의하게 증가시켰다.
이상의 결과를 종합하면, 소리쟁이 잎과 뿌리 추출물은 조골 세포의 증식과 분화에 관여하는 우수한 소재로서 서로 상호보완적인 효과를 가지며, 조골세포 분화 단계에 따라 다르게 나타나는 효과는 성분의 차이에서 기인한 것으로 보인다. 결론적으로 소리쟁이 잎과 뿌리는 골다공증 예방 및 치료제로서의 개발 가능성을 가진 우수한 천연물 소재로 평가된다.
5 μg/ml에서 5 μg/ml 사이의 농도 범위에서는 뿌리 추출물이, 10 μg/ml의 농도에서는 잎 추출물의 효과가 더 높았다. 잎 추출물은 실험 농도 범위 내에서 농도 의존적으로 유의하게 석회화 결절 형성을 증가시켰으며 그 효과는 뿌리 추출물보다 높았다. 초기 분화 마커인 ALP 활성과 collagen 형성에 미치는 영향은 뿌리 추출물이 잎 추출물보다 높았으며 후기 분화 마커인 석회화 결절 형성은 잎 추출물이 뿌리 추출물보다 높은 것으로부터, 뿌리 추출물은 조골세포 분화의 초기 단계에, 잎 추출물은 후기 단계에 더 많은 영향을 미치는 것으로 판단된다.
즉, 0.5 μg/ml, 1 μg/ml, 5 μg/ml의 농도에서 대조군과 비교한 collagen 형성 상승 정도는 소리쟁이 잎 추출물의 경우 각각 104.9%, 106.6%, 112.3%, 뿌리 추출물의 경우 각각 110.9%, 114.0%, 116.3%로 뿌리 추출물이 잎 추출물보다 더 높은 효과를 나타냈으며, 10 μg/ml의 농도 처리시에는 collagen 함량의 증가는 뿌리 추출물이 120.2%, 잎 추출물이 122.3%로 잎 추출물의 효과가 다소 높게 나타났다.
잎 추출물은 실험 농도 범위 내에서 농도 의존적으로 유의하게 석회화 결절 형성을 증가시켰으며 그 효과는 뿌리 추출물보다 높았다. 초기 분화 마커인 ALP 활성과 collagen 형성에 미치는 영향은 뿌리 추출물이 잎 추출물보다 높았으며 후기 분화 마커인 석회화 결절 형성은 잎 추출물이 뿌리 추출물보다 높은 것으로부터, 뿌리 추출물은 조골세포 분화의 초기 단계에, 잎 추출물은 후기 단계에 더 많은 영향을 미치는 것으로 판단된다.
특히, 소리쟁이 잎 추출물은 1 μg/ml에서 144.9%의 ALP 활성 증가 효과를 보였으며 소리쟁이 뿌리 추출물은 0.5 μg/ml에서 256.9%의 ALP 활성 증가 효과를 나타내었다.
후속연구
이상의 결과를 종합하면, 소리쟁이 잎과 뿌리 추출물은 조골 세포의 증식과 분화에 관여하는 우수한 소재로서 서로 상호보완적인 효과를 가지며, 조골세포 분화 단계에 따라 다르게 나타나는 효과는 성분의 차이에서 기인한 것으로 보인다. 결론적으로 소리쟁이 잎과 뿌리는 골다공증 예방 및 치료제로서의 개발 가능성을 가진 우수한 천연물 소재로 평가된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
골다공증 치료제는 어떻게 분류되는가?
골다공증 치료제는 칼시토닌, 비스포스포네이트, 에스트로겐으로 대표되는 골흡수 억제제(antiresorptive drug)와 부갑상선 호르몬으로 대표되는 골형성 자극제(bone formation stimulator)로 분류된다. 골흡수 억제제는 파골세포를 억제하여 골 교체율을 감소시키며, 현재 사용되고 있는 치료제의 대부분을 차지하고 있다.
소리쟁이의 뿌리의 효능은?
8) 소리쟁이 지상부의 생리활성으로는 Staphylococcus aureus와 Bacillus subtilis에 대한 항생 효과, 9) 종자의 진통, 항염증, 간보호 효과10) 및 항산화효과11) 등이 보고된 바 있다. 뿌리는 양제근이라 불리며 민간에서 대황의 대용으로서 완하약으 로 사용하거나 즙을 피부병에 외용하며, 8) 항말라리아, 항균, 12) 항산화, 13) 항암 및 carbohydrase 저해 효과14) 등이 보고되어 있다. 또한, 최근 본 연구실에서는 소리쟁이 뿌리 추출물의 단당분석과 저농도에서 골 석회화 형성능 및 ethly acetate 분획물과 chloroform 분획물이 조골세포 분화에 미치는 영향을 확인하여 보고한 바 있다.
소리쟁이는 무엇인가?
소리쟁이(Rumex crispus. L)는 마디풀과(Polygonaceae)의 다년생 초본으로 우리나라 및 중국, 일본에 분포하며 습한 곳에서 잘 자라는 식물로, 높이는 60~100 cm 정도이고 잎은 장타원형으로 10~25 cm에 이르며, 꽃은 5~7월에 옅은 녹색으로 피는 원추화서이다. 8) 소리쟁이 지상부의 생리활성으로는 Staphylococcus aureus와 Bacillus subtilis에 대한 항생 효과, 9) 종자의 진통, 항염증, 간보호 효과10) 및 항산화효과11) 등이 보고된 바 있다.
참고문헌 (27)
Canalis, E., McCarthy, T. and Centrella, M. : Growth factors and the regulation of bone remodeling. J. Clin. Invest. 81, 277 (1988).
Gallagher, J. C. and Sai, A. J. : Molecular biology of bone remodeling: implications for new therapeutic targets for osteoporosis. Maturitas 65, 301 (2010).
Yildirim, A., Mavi, A. and Kara, A. A. : Determination of antioxidant and antimicrobial activities of Rumex crispus L. extracts. J. Agric. Food Chem. 49, 4083 (2001).
Lee, S. S., Kim, D. H., Yim, D. S. and Lee, S. K. : Antiinflammatory, analgesic and hepatoprotective effect of semen of Rumex crispus. Kor. J. Pharmacogn. 38, 334 (2007).
Suh, H. J., Lee, K. S., Kim, S. R., Shin, M. H. and Park, S. : Determination of singlet oxygen quenching and protection of biological systems by various extracts from seed of Rumex crispus L. J. Photochem. Photobiol. B 102, 102 (2011).
Choi, G. J., Lee, S. W., Jang, K. S., Kim, J. S., Cho, K. Y. and Kim, J. C. : Effects of chrysophanol, parietin, and nepodin of Rumex crispus on barley and cucumber powdery mildews. Crop. Protection 23, 1215 (2004).
Yun, Y. S. and Jeong, K. S. : Polyphenol contents of Rumex crispus root extract with hot water and its antioxidative effect. J. Environmental Sciences 21, 1265 (2012).
Shiwani, S., Singh, N. K. and Wang, M. H. : Carbohydrase inhibition and anti-cancerous and free radical scavenging properties along with DNA and protein protection ability of methanolic root extracts of Rumex crispus. Nutr. Res. Pract. 6, 389 (2012).
Park, H. J., Jeong, J. H., Hyun, H. B., Hwang, H. S. and Kim, H. H. : The stimulatory effects on the osteoblast cells of the root constituents from Rumex crispus. Yakhak Hoeji 57, 406 (2013).
Tominaga, H., Ishiyama, M., Ohseto, F., Sasamoto, K., Hamamoto, T., Suzuki, K. and Watanabe, M. : A water-soluble tetrazolium salt useful for colorimetric cell viability assay. Anal. Commun. 36, 47 (1999).
Abe, T., Abe, Y., Aida, Y., Hara, Y. and Maeda, K. : Extracellular matrix regulates induction of alkaline phosphatase expression by ascorbic acid in human fibroblasts. J. Cell. Physiol. 189, 144 (2001).
Sitharaman, B., Avti, P. K., Schaefer, K., Talukdar, Y. and Longtin, J. P. : A novel nanoparticle-enhanced photoacoustic stimulus for bone tissue engineering. Tissue Eng. Part A 17, 1851 (2011).
Tullberg-Reinert, H. and Jundt, G. : In situ measurement of collagen synthesis by human bone cells with a sirius red-based colorimetric microassay: effects of transforming growth factor beta 2 and ascorbic acid 2-phosphate. Histochem. Cell Biol. 112, 271 (1999).
Gregory, C. A., Gunn, W. G., Peister, A. and Prockop, D. J. : An Alizarin red-based assay of mineralization by adherent cells in culture: comparison with cetylpyridinium chloride extraction. Anal. Biochem. 329, 77 (2004).
Stanford, C. M., Jacobson, P. A., Eanes, E. D., Lembke, L. A. and Midura, R. J. : Rapidly forming apatitic mineral in an osteoblastic cell line (UMR 106-01 BSP). J. Biol. Chem. 270, 9420 (1995).
Stein, G. S., Lian, J. B. and Owen, T. A. : Relationship of cell growth to the regulation of tissue-specific gene expression during osteoblast differentiation. FASEB J. 4, 3111 (1990).
Huang, W., Yang, S., Shao, J. and Li, Y. P. : Signaling and transcriptional regulation in osteoblast commitment and differentiation. Front Biosci. 12, 3068 (2007).
zur Nieden, N. I., Kempka, G. and Ahr, H. J. : In vitro differentiation of embryonic stem cells into mineralized osteoblasts. Differentiation 71, 18 (2003).
Declercq, H. A., Verbeeck, R. M., De Ridder, L. I., Schacht, E. H. and Cornelissen, M. J. : Calcification as an indicator of osteoinductive capacity of biomaterials in osteoblastic cell cultures. Biomaterials 26, 4964 (2005).
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.