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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 E. coli O157:H7, Salmonella typhimurium 그리고 Listeria monocytogenes 등 대표적 식중독 균에 대한 이산화염소의 살균제로서의 효과를 측정하여 이에 보고하는 바이다.
제안 방법
- , Olympia, Washington, USA)을 사용하여 준비하였으며 농도는 iodometry 방법(19)으로 측정하였다, 이산화염소 용액 9mL에 pure cell culture 1 이을 넣어 각 시간 별로 처리 했으며 처리 후 serial dikition하여 배지에 spreading하여 생균수를 측정 하였다. E. coli O157:H7은 5.55 ppm 이산화염소 용액 9mL에 c이1 culture 1 mL을 넣어 최종 농도가 5 ppm이 되도록 하여 1, 2, 3, 4, 5, 7분 동안 처리하였고, 처리 후 바로 dilution하여 spreading 하였다. 배지는 TBA(tiyptic soy agar: TSB + 1.
- 8% agar) plate 를 사용 하였으며 37C에서 24hr 배양 후 colony counting 하여 결과를 분석하였다. Salmonella fyphigriume 5.55 ppm 이산화염소 용액 9ml/L에 cell culture 1 mL을 넣어 최종 농도가 5 ppm이 되도록 하여 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10분 동안 처리 하였고, 처리 후 바로 serial dilution 하여 spreading 하였다. 배지는 TBA plate를 사용하여 37"C에서 48 hr 배양 후 colony counting 하여 결과를 분석 하였다, Listeria monocytogenes는 11.
- 나타내었다. 각기 counting된 결과는 log scale로 환산하여 처리 시간에 따른 survival rate 그래프를 그렸으며 생균수가 1 log 감소하는데 필요한 시간을 계산하여 D-vahie를 구하였다.
- 5 mL을 넣어 최종 농도가 10 ppm이 되도록 하여 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10분 동안 처리하였다. 배지는 BHI agar plateS 사용 하였으며 37℃에서 48 hr 배양 후 colony counting 하여 결과를 분석하였다.
- 55 ppm 이산화염소 용액 9mL에 c이1 culture 1 mL을 넣어 최종 농도가 5 ppm이 되도록 하여 1, 2, 3, 4, 5, 7분 동안 처리하였고, 처리 후 바로 dilution하여 spreading 하였다. 배지는 TBA(tiyptic soy agar: TSB + 1.8% agar) plate 를 사용 하였으며 37C에서 24hr 배양 후 colony counting 하여 결과를 분석하였다. Salmonella fyphigriume 5.
- 본 연구에서는 이산화염소 처리를 이용하여 대표적 식중독 미생물인 E. coli O157:H7, Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenee 대한 살균 효과를 측정하였다. Pure cell culture 상태에서의 E.
- 이산화염소는 chlorine dioxide generator system(CH2O Inc., Olympia, Washington, USA)을 사용하여 준비하였으며 농도는 iodometry 방법(19)으로 측정하였다, 이산화염소 용액 9mL에 pure cell culture 1 이을 넣어 각 시간 별로 처리 했으며 처리 후 serial dikition하여 배지에 spreading하여 생균수를 측정 하였다. E.
대상 데이터
- E. coli O157:H7(ATCC 43895), Salmonella typhimurium (KCTC 2514), Listeria monocytogenes(KCTC 3710)는 KCTC (Korean Collection for Type Culture)에서 분양 받아 사용하였다. E.
- coli O157:H7(ATCC 43895), Salmonella typhimurium (KCTC 2514), Listeria monocytogenes(KCTC 3710)는 KCTC (Korean Collection for Type Culture)에서 분양 받아 사용하였다. E. coli O157H7과 Salmonella lyphimurium온 20 mL TSB (tryptic soy broth, Difco Co., Detroit, MI, USA)률 사용하여배잉하였다. E.
성능/효과
- E. coli O157:H7와는 달리 Salmonella typhimuriume Listeria monocytogenes의 처리 결과는 전형적인 biphasic curve를 보였다(Fig. 2-4). 이러한 biphasic curve 형태는 5분 처리까지는 해당 이산화염소 농도에서 기대할 수 있는 사멸 효과가 대부분 나타났으나 그 이상의 처리 시간은 효과가 없음을 보여준다.
- 대해서 5ppm으로 제한하고 있다. 그러나 본 연구 결과, 다른 유기물이 존재 하지 않는 pure cell culture의 조건에서 이산화염소 5 ppm 조건에서는 완전한 살균효과를 보이지 않음을 확인할 수 있었다. 따라서, 여러 유기물이 복합적으로 포함 되어 있는 야채 등의 식품에 처리할 경우는 식품적 안전성을 충분히 보장할 수 있는 정도의 살균 효과를 기대하기 어렵다고보여지기에 보다 높은 농도의 이산화염소 처리나 다른 화학적처리를 병행할 때 식품의 안전성을 완전히 확보할 수 있다고 생각된다.
- 그러나 본 연구 결과, 다른 유기물이 존재 하지 않는 pure cell culture의 조건에서 이산화염소 5 ppm 조건에서는 완전한 살균효과를 보이지 않음을 확인할 수 있었다. 따라서, 여러 유기물이 복합적으로 포함 되어 있는 야채 등의 식품에 처리할 경우는 식품적 안전성을 충분히 보장할 수 있는 정도의 살균 효과를 기대하기 어렵다고보여지기에 보다 높은 농도의 이산화염소 처리나 다른 화학적처리를 병행할 때 식품의 안전성을 완전히 확보할 수 있다고 생각된다.
- 특히 Liberia의 5ppm과 10ppm의 처리결과는 이산화염소의 처리에 영향을 주는 인자 중 처리 시간보다는 처리농도가 더 큰 영향을 끼치는 것을 나타내었다. 본 연구 결과는 이산화 염소허용치인 5 ppm이 신선채소에 대한 미생물학적 안전성을 확보하기엔 부족하다는 것을 시사한다.
- 이러한 biphasic curve는 5분까지의 처리로 해당 농도에서의 살균 효과는 대부분 나타나고 그 이후는 효과가 없음을 보여주었다. 특히 Liberia의 5ppm과 10ppm의 처리결과는 이산화염소의 처리에 영향을 주는 인자 중 처리 시간보다는 처리농도가 더 큰 영향을 끼치는 것을 나타내었다. 본 연구 결과는 이산화 염소허용치인 5 ppm이 신선채소에 대한 미생물학적 안전성을 확보하기엔 부족하다는 것을 시사한다.
- 이러한 biphasic curve 형태는 5분 처리까지는 해당 이산화염소 농도에서 기대할 수 있는 사멸 효과가 대부분 나타났으나 그 이상의 처리 시간은 효과가 없음을 보여준다.특히 Listeria monocytogenese 대한 이산화염소 5 ppm과 10 ppm의 처리 결과를 비교해보면 5 ppm에서 5분 처리했을 때는 0.98log 감소를 보였지만 iOppm에서는 1분만 처리 하여도 1.14 log 감소를 보였으며 4분을 더 처리한 5분 처리 시에는 2.2 log 감소를 보였다(T*ble 1). 이러한 농도와 시간과의 상관관계에서 이산화염소의 사멸 효과는 처리시간보다는 처리농도에 보다 큰 영향을 받는 것을 시사한다’ Singh 둥(21)의 lettuce와 baby carrot에 이산화염소 가스를 처리한 결과에서도 5ppm에서 15분 처리한 것이 0.
후속연구
- E. coli의 경우 이산화염소 처리 시간이 증가함에 따라 생존율이 일정한 비율로 감소하는 양상을 보인 반면 Salmonella, Listeria는 biphasic curve를 보여주었는데 이것은 bacteria cell 자체의 특성과 관련된 것으로 이산화 염소에 대한 민감성의 차이로 판단되며 이산화염소의 작용 기작이 명확히 밝혀지지 않았기에 보다 많은 연구가 이루어져야 하겠다(1, 2). 이산화염소에 의한 미생물 사멸에 관한 연구로는 이산화염소가 단백질의아미노산 중 cysteine, tyrosine, tryptophan 등과 반응하여 단백질을 변성 시켜 사멸시키고(22) 또한 이산화염소가 유리지방산과의 반응으로 지방산화물을 생성한다는 보고가 있다(23).
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