[논문]장기능개선제-신소재(KTG075)의 대장관 내 mucin 2 분비에 미치는 영향

이유회; 백순옥; 김현경; 류명현

장기능개선제-신소재(KTG075)의 대장관 내 mucin 2 분비에 미치는 영향
Effect of Intestinal Function Enhancer (KTG075) on Mucin 2 Secretion 원문보기

한국식품과학회지 = Korean journal of food science and technology, v.36 no.6 = no.178, 2004년, pp.991 - 994

이유회 (KT&G 중앙연구원) , 백순옥 (KT&G 중앙연구원) , 김현경 (KT&G 중앙연구원) , 류명현 (KT&G 중앙연구원)

초록
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본 연구에서는 장 기능 개선 및 변비질환의 예방 및 치료에 효과적인 식물성 복합추출물인 장기능개선제-신소재(KTG075)의 대장관 내 점액질의 분비에 미치는 영향, 특히 대장에 가장 많이 분비되는 mucin 2 분비에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. Mucin(MUC)은 그 구조에 따라서 여러 아형이 있는데, 아형에 따라서 조직 분포가 다르며 대장에서 가장 많이 분비되는 mucin의 아형은 mucin 2로서 mucin 2에 대한 항체(Biogenex AM358)를 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2를 관찰 시, 변비유발군에서는 mucin 2(연갈색)로 염색된 세포가 현저히 감소되나 KTG075 투여 시 뚜렷하게 mucin 2의 염색이 증가되었다. 또한 alcian blue 염색으로 점액질층을 관찰 시 점액질 두께도 변비유발군에서는 현저히 감소되었고 KTG075투여군에서는 점액질층이 거의 정상 수준으로 증가되었다. 이러한 결과는 변비유발군에서의 mucin 2의 생성과 분비가 감소되나 KTG075 투여군에서는 장 기능을 활성화시킴으로써 mucin 2의 생성과 분비를 증가시켜 장관 내 윤활도가 유지되고 장관 운동을 증가시켜 배변을 용이하게 하여 변비 또는 스트레스 등에 의해 저하된 장 기능을 개선시킴을 확인할 수 있었다.

Abstract ▼ AI-Helper

Effects of formulation KTG075 from edible plants on intestinal function, particularly on Mucin 2 secretion, were examined by loperamide-induced constipation method using Sprague Dawley rats (SD rats, male). Crypt epithelial cells containing more mucus and mucus layer stained with alcian blue were significantly thicker in KTG075 group than control group. When Biogenex AM358 of antibody against Mucin 2 was used, crypt epithelial cells secreted more Mucin 2 in KTG075 group than control group. The Mucus layer at fecal surface was thinner and less mucus was recovered from mucosal surface in constipated rats than in KTG075 group. Mucus production of crypt epithelial cells and mucus contents at fecal and mucosal surfaces were reduced by loperamide-induced constipation. These results indicate formula KTG075 accelerates evacuation and activates intestines.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

결과적으로 점액의 분비와 점액층의 형성이 제대로 이루어져야 하며 각종 장 질환의 거의 대부분은 mucin의 부족과 깊은 관계가 있다는 보고가 있으며(5), 건강한 장 기능을 유지하기 위해서는 점액의 분비와 점액층의 형성이 원활히 이루어져야 한다. 따라서 본 연구는 식물성 복합추출물인 장 기능개선제-신소재 (KTG075)의 장 기능 개선 및 변비질환 개선 효과를 흰쥐의 대장관 내에서 점액질의 두께와 장내 변의 개수, 점액질의 분비에 미치는 효과를 통해 알아보고자 하였다. 특히 대장에서 가장 많이 분비되는 mucin의 아형중 mucin 2를 항체 Biogenex AM358을 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2 분비 효과를 조사하고자 하였다.
본 연구에서는 장 기능 개선 및 변비질환의 예방 및 치료에 효과적인 식물성 복합추출물인 장기능개선제-신소재 (KTG075)의 대장관 내 점액질의 분비에 미치는 영향, 특히 대장에 가장 많이 분비되는 mucin 2 분비에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. Mucin(MUC)은 그 구조에 따라서 여러 아형이 있는데, 아형에 따라서 조직 분포가 다르며 대장에서 가장 많이 분비되는 mucin의 아형은 mucin 2로서 mucin 2에 대한 항체(Bio- genex AM358)를 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2를 관찰 시, 변비유발군에서는 mucin 2(연갈색)로 염색된 세포가 현저히 감소되나 KTG075 투여 시 뚜렷하게 mucin 2의 염색이 증가되었다.
따라서 본 연구는 식물성 복합추출물인 장 기능개선제-신소재 (KTG075)의 장 기능 개선 및 변비질환 개선 효과를 흰쥐의 대장관 내에서 점액질의 두께와 장내 변의 개수, 점액질의 분비에 미치는 효과를 통해 알아보고자 하였다. 특히 대장에서 가장 많이 분비되는 mucin의 아형중 mucin 2를 항체 Biogenex AM358을 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2 분비 효과를 조사하고자 하였다.

가설 설정

1)The rate was compared with the Loperamide-treatment group.
1) The rates were compared with those of the normal control.

제안 방법

즉, 변량 등의 관찰 실험을 종료한 후 흰쥐를 희생 시켜 대장 중의 변의 수 및 대장관 내 점액질의 분비 유도 효과를 관찰하였다. Loperamide 투여 8일째 되는 날에 흰쥐를 희생 시켜 맹장부터 직장까지의 전 부위를 취하여 10% formalde- hyde(phosphate buffered saline, pH 7.4)로 즉시 고정하였고 고정된 흰쥐의 대장관 내에 있는 변의 개수를 관찰하였다(8-10).
Loperamide-induced constipation관찰 실험을 종료한 후, loperamide 투여 8일째 되는 날에 흰쥐를 희생시켜 맹장부터 직장까지의 전 부위를 취하여 10% formaldehyde(phosphate buffered saline, pH 7.4)로 즉시 고정시켜서, 조직 표본을 제작하여 alcian blue(pH 2.5) 염색을 실시하여 점액질 분비세포와 점액질층을 관찰하였다. Mucin 2의 항체 Biogenex AM358을 marker로 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2로 염색된 대장관 내 세포를 관찰하였다(12-16).
mg 함유하여 공급하였다. Loperamide군에는 정제수만을 공급하였고, 시료 투여군(KTG075)에는 정제수에 일정량의 (1.6 mg/ mL, 3.2mg/mL) 시료가 함유되도록 제조한 시료용액을 공급하였다. 정상 대조군에는 loperamide 및 시료를 투여하지 않았다.
5) 염색을 실시하여 점액질 분비세포와 점액질층을 관찰하였다. Mucin 2의 항체 Biogenex AM358을 marker로 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2로 염색된 대장관 내 세포를 관찰하였다(12-16).
고정 된 조직은 paraffin으로 embedding하여 5 ㎛ 두께로 section한 후 alcian blue(pH 2.5)로 염색하여 100배 또는 200배 광학 현미경으로 관찰하였다. 점액질 두께의 측정은 각 조직샘플에서 점액질층이 상대적으로 가장 두꺼운 3부분을 측정하여 계산하였다 (11-13).
정상 대조군에는 loperamide 및 시료를 투여하지 않았다. 실험기간 중 오전 일정한 시간에 매일 1회씩 사료 및 물 섭취량 변의 무게 등을 관찰하였다(7, 8).
5)로 염색하여 100배 또는 200배 광학 현미경으로 관찰하였다. 점액질 두께의 측정은 각 조직샘플에서 점액질층이 상대적으로 가장 두꺼운 3부분을 측정하여 계산하였다 (11-13).
KTG075의 효과 검색을 위하여 Sprague Dawley rats를 활용하였다. 즉, 변량 등의 관찰 실험을 종료한 후 흰쥐를 희생 시켜 대장 중의 변의 수 및 대장관 내 점액질의 분비 유도 효과를 관찰하였다. Loperamide 투여 8일째 되는 날에 흰쥐를 희생 시켜 맹장부터 직장까지의 전 부위를 취하여 10% formalde- hyde(phosphate buffered saline, pH 7.

대상 데이터

Loperamide-induced constipation method에 의해 유도된 변비에 미치는 KTG075의 효과 검색을 위하여 Sprague Dawley rats를 활용하였다. 즉, 변량 등의 관찰 실험을 종료한 후 흰쥐를 희생 시켜 대장 중의 변의 수 및 대장관 내 점액질의 분비 유도 효과를 관찰하였다.
보관하였다. 동결 건조한 시료를 필요에 따라 정제수에 녹여 일정한 농도의 Sprague Dawley rat(대한바이오링크, 음성) 동물실험용 시료용액을 제조하였다.
실험동물 모델로 웅성의 평균체중 220-240 g 정도의 Sprague Dawley rat(대한바이오링크, 음성)를 1군 당 8 내지 10마리를 사용하여 대사케이지에서 3일간 순화 적응시키고, 4일째부터 변비를 유발시키기 위해 loperamide(Sigma, USA)를 사료 3 g 당 1 mg 함유하여 공급하였다. Loperamide군에는 정제수만을 공급하였고, 시료 투여군(KTG075)에는 정제수에 일정량의 (1.

성능/효과

2% 감소하는 것이 관찰되어 KTG075가장 기능개선 효과가 있음을 확인할 수 있었으며, KTG075 투여군은 loperamide 단독 처리군에 비해 흰쥐의 대장관 내에서 뮤신의 합성 및 분비가 증가한다는 것을 조직검사에서 관찰할 수 있었고 또한, loperamide 단독처리군의 대장관 내 점액질의 두께가 정상적으로 회복되는 것이 조직 검사에서 관찰되었다. KTG075의 농도별 차이에 따른 점액질의 분비는 loperamide 단독처리군은 정상처리군에비해 점액분비세포가 현저하게 감소하였으나, KTG075 투여군은 점액분비세포가 정상군의 수준으로 관찰되었으며, 1.6 mg/ mL 보다 3.2 mg/mL 투여군이 점액분비 활성도가 증가되었다.
KTG075의 농도별 차이에 따른 점액질의 분비효과를 관찰한 결과, 대조군(변비유발군) 은 정상군에 비해 점액분비세포 (alcian blue 염색 시 파란색으로 염색)가 현저하게 감소하였으나, KTG075 투여군은 점액분비 세포가 정상군의 수준으로 점액 분비세포가 활성화됨을 관찰할 수 있었으며, KTG075의 식수 중 농도가 1.6mg/mL 투여군 보다는 3.2mg/mL 투여군의 흰쥐 대장관 내 점액분비 활성도가 증가됨을 확인할 수 있었다(Fig. 2).
Loperamide 처리군은 정상 대조군에 비해 흰쥐의 대장관 내에 분비되는 점액질의 두께가 31% 감소하였으나, KTG075 처리 군에서는 점액질의 두께가 정상적으로 회복되는 것이 조직검사에서 관찰되어, KTG075가 흰쥐의 대장관 내에서 점액질의 분비를 활성화시킴을 확인할 수 있었다(Table 2). 또한 KTG075의 대장관 내 점액질의 두께 변화를 관찰한 결과에서는 loperamide 단독처리군(E, F)은 점액질층의 두께가 매우 얇아졌으며, KTG075 처리군(G, H)은 점액질층의 두께가 정상적으로 회복됨으로 KTG075 처리군(G, H)은 loperamide 단독처리 군은(E, F) 보다 매우 활성화되어 있는 것을 관찰할 수 있었다(Fig.
Loperamide를 투여하여 변비를 유발시킨 흰쥐에 KTG075를 투여하고 변량 등의 관찰 실험을 종료한 후, 흰쥐를 희생시켜 대장관 내에 있는 변의 개수를 관찰한 결과를 Table 1에서 살펴보면, 장기능개선제-신소재 (KTG075)를 투여한 흰쥐의 대장관내 장내 변의 개수가 loperamide 단독 처리군보다 68.2% 감소하는 것이 관찰되어 KTG075가 장기능개선 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
또한 KTG075의 대장관 내 점액질의 두께 변화를 관찰한 결과에서는 loperamide 단독처리군(E, F)은 점액질층의 두께가 매우 얇아졌으며, KTG075 처리군(G, H)은 점액질층의 두께가 정상적으로 회복됨으로 KTG075 처리군(G, H)은 loperamide 단독처리 군은(E, F) 보다 매우 활성화되어 있는 것을 관찰할 수 있었다(Fig. 1).
Mucin(MUC)은 그 구조에 따라서 여러 아형이 있는데, 아형에 따라서 조직 분포가 다르며 대장에서 가장 많이 분비되는 mucin의 아형은 mucin 2로서 mucin 2에 대한 항체(Bio- genex AM358)를 사용하여 면역조직화학법으로 mucin 2를 관찰 시, 변비유발군에서는 mucin 2(연갈색)로 염색된 세포가 현저히 감소되나 KTG075 투여 시 뚜렷하게 mucin 2의 염색이 증가되었다. 또한 alcian blue 염색으로 점액질층을 관찰 시 점액질 두께도 변비유발군에서는 현저히 감소되었고 KTG075투여군에서는 점액질층이 거의 정상 수준으로 증가되었다. 이러한 결과는 변비유발군에서의 mucin 2의 생성과 분비가 감소되나 KTG075 투여군에서는 장 기능을 활성화시킴으로써 mucin 2의 생성과 분비를 증가시켜 장관 내 윤활도가 유지되고 장관운동을 증가시켜 배변을 용이하게 하여 변비 또는 스트레스 등에 의해 저하된 장 기능을 개선시킴을 확인할 수 있었다.
또한 mucin 2 분비효과는 변비유발군에서는 mucin 2(연갈색)로 염색된 세포가 현저히 감소되나, KTG075 투여군은 뚜렷하게 mucin 2 염색이 증가됨을 확인할 수 있었다.
또한 alcian blue 염색으로 점액질층을 관찰 시 점액질 두께도 변비유발군에서는 현저히 감소되었고 KTG075투여군에서는 점액질층이 거의 정상 수준으로 증가되었다. 이러한 결과는 변비유발군에서의 mucin 2의 생성과 분비가 감소되나 KTG075 투여군에서는 장 기능을 활성화시킴으로써 mucin 2의 생성과 분비를 증가시켜 장관 내 윤활도가 유지되고 장관운동을 증가시켜 배변을 용이하게 하여 변비 또는 스트레스 등에 의해 저하된 장 기능을 개선시킴을 확인할 수 있었다.
이상의 결과를 종합하여 보면, loperamide를 투여하여 변비를 유발시킨 흰쥐에 KTG075를 투여한 후 대장관 내 변의 개수를 관찰한 결과, loperamide 단독 처리군 보다 변의 수가 68.2% 감소하는 것이 관찰되어 KTG075가장 기능개선 효과가 있음을 확인할 수 있었으며, KTG075 투여군은 loperamide 단독 처리군에 비해 흰쥐의 대장관 내에서 뮤신의 합성 및 분비가 증가한다는 것을 조직검사에서 관찰할 수 있었고 또한, loperamide 단독처리군의 대장관 내 점액질의 두께가 정상적으로 회복되는 것이 조직 검사에서 관찰되었다. KTG075의 농도별 차이에 따른 점액질의 분비는 loperamide 단독처리군은 정상처리군에비해 점액분비세포가 현저하게 감소하였으나, KTG075 투여군은 점액분비세포가 정상군의 수준으로 관찰되었으며, 1.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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