탄저병의 전형적인 병징을 보이는 이병 고추로부터 1999년과 2002년에 128개와 257개의 고추 탄저병균을 분리한 후, chlorothalonil에 대한 감수성 변화를 한천평판희석법을 이용하여 조사하였다. 삼년간의 기간을 두고서 두 해에 걸쳐 채집한 탄저병균의 chlorothalonil에 대한 감수성 정도는 동일한 해에 채집한 균주간에도 큰 차이가 있었다. Chlorothalonil의 농도를 $500{\mu}g/mL$로 조절한 PDA 배지에서 균사생장 억제 효과를 조사하여 보면, 1999년에 채집한 균주들 중에서 균사생장 억제효과가 100%인 균주의 비율은 23.4%, 60% 이하의 억제 효과를 보이는 균주는 29.7%를 차지하는 반면, 2002년에 분리한 균주의 비율은 34.6%와 14.8%로 나타났다. 이러한 결과는 1999년에 분리된 균주가 2002년에 분리된 균주보다는 chlorothalonil에 대하여 저항성이었음을 알 수 있었다. 지역에 따른 chlorothalonil에 대한 탄저병균의 감수성 변화 양상은 강원, 경기도와 경상도 지역에서 분리한 탄저병균은 2002년에 감수성화 되었지만, 충청과 전라도 지역에서 분리한 병원균에서는 저항성을 보이는 균주의 비율이 증가하였다. 본 실험과 같은 살균제에 대한 감수성 모니터링 자료는 지역별로 고추 탄저병의 방제를 위해서 사용하는 살균제를 선발하는 기초자료로 사용할 수 있을 것이다.
탄저병의 전형적인 병징을 보이는 이병 고추로부터 1999년과 2002년에 128개와 257개의 고추 탄저병균을 분리한 후, chlorothalonil에 대한 감수성 변화를 한천평판희석법을 이용하여 조사하였다. 삼년간의 기간을 두고서 두 해에 걸쳐 채집한 탄저병균의 chlorothalonil에 대한 감수성 정도는 동일한 해에 채집한 균주간에도 큰 차이가 있었다. Chlorothalonil의 농도를 $500{\mu}g/mL$로 조절한 PDA 배지에서 균사생장 억제 효과를 조사하여 보면, 1999년에 채집한 균주들 중에서 균사생장 억제효과가 100%인 균주의 비율은 23.4%, 60% 이하의 억제 효과를 보이는 균주는 29.7%를 차지하는 반면, 2002년에 분리한 균주의 비율은 34.6%와 14.8%로 나타났다. 이러한 결과는 1999년에 분리된 균주가 2002년에 분리된 균주보다는 chlorothalonil에 대하여 저항성이었음을 알 수 있었다. 지역에 따른 chlorothalonil에 대한 탄저병균의 감수성 변화 양상은 강원, 경기도와 경상도 지역에서 분리한 탄저병균은 2002년에 감수성화 되었지만, 충청과 전라도 지역에서 분리한 병원균에서는 저항성을 보이는 균주의 비율이 증가하였다. 본 실험과 같은 살균제에 대한 감수성 모니터링 자료는 지역별로 고추 탄저병의 방제를 위해서 사용하는 살균제를 선발하는 기초자료로 사용할 수 있을 것이다.
Monitoring for the sensitivity of Colletotrichum spp. causing red-pepper anthracnose to chlorothalonil was conducted by the agar dilution method, which were isolated from infected pepper fruits in 1999 and 2002. Among the isolates in 1999 or 2002, their sensitivity to fungicide was fluctuated. Inves...
Monitoring for the sensitivity of Colletotrichum spp. causing red-pepper anthracnose to chlorothalonil was conducted by the agar dilution method, which were isolated from infected pepper fruits in 1999 and 2002. Among the isolates in 1999 or 2002, their sensitivity to fungicide was fluctuated. Investigating the inhibitory effect of $500{\mu}g/m\ell$ of chlorothalonil on the mycelial growth of Colletotrichum isolates isolated from the infected red-pepper fruits in 1999, the frequency of isolates was 23.4%, which showed 100% of inhibitory effect on mycelial growth, and 29.7% showing below 60%. Isolates in 2002, however, showed 34.6% and 14.8% of inhibitory effect on PDAs including the same concentration of fungicide, respectively, These results showed that the sensitivity of Colletotrichum isolates in 1999 was inferior to that in 2002. According to the sampling region, isolation frequency among isolates in 2002 showing less MIC rather than 1999 was increased in Kyunggi, Kangwon, Kyungbuk and Kyungnam while the frequency of resistant isolates was done in Chungnam, Chungbuk, Cheonnam and Cheonbuk Fungicide monitoring results in this report will be of use on controlling the anthracnose in each region cultivating red-pepper.
Monitoring for the sensitivity of Colletotrichum spp. causing red-pepper anthracnose to chlorothalonil was conducted by the agar dilution method, which were isolated from infected pepper fruits in 1999 and 2002. Among the isolates in 1999 or 2002, their sensitivity to fungicide was fluctuated. Investigating the inhibitory effect of $500{\mu}g/m\ell$ of chlorothalonil on the mycelial growth of Colletotrichum isolates isolated from the infected red-pepper fruits in 1999, the frequency of isolates was 23.4%, which showed 100% of inhibitory effect on mycelial growth, and 29.7% showing below 60%. Isolates in 2002, however, showed 34.6% and 14.8% of inhibitory effect on PDAs including the same concentration of fungicide, respectively, These results showed that the sensitivity of Colletotrichum isolates in 1999 was inferior to that in 2002. According to the sampling region, isolation frequency among isolates in 2002 showing less MIC rather than 1999 was increased in Kyunggi, Kangwon, Kyungbuk and Kyungnam while the frequency of resistant isolates was done in Chungnam, Chungbuk, Cheonnam and Cheonbuk Fungicide monitoring results in this report will be of use on controlling the anthracnose in each region cultivating red-pepper.
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문제 정의
작용 기작이 특이하지 못한 보호용 살균제에 대한 저 항성 발현 조사는 Kato 등(1997)이 감자 역병균의 유 전적인 구성이 변화하여 포장에서의 우점 군이 변화하는데 그 원인이 mancozeb나 chlorothalonil과 같은 예방용 살균제의 사용에 의해 저항성 균이 출현한 것이 아닌지를 조사하기 위한 보고가 있다. 본 실험에서는 병원균의 채집 연도와 지역 간에 보호용 살균제인 chlorothalonil에 대한 고추 탄저병 균의 감수성이 변화하는 지를 조사하여 chlorothalonil의 사용이 포장에서의 우점 병원균의 집단 변화에 영향을 주는지를 알 아보고자 한다.
가설 설정
b)For investigating the inhibitory effect of mycelial growth, colony diameter was measured after incubation at 25 ℃ for 7 days.
제안 방법
1999년과 2002년에 분리한 고추 탄저병 균(Colleto- trichum acutatum) 중에서 각각 4 균주씩을 선발하여 chlorothalonil] 대한 균사 생장 억제 효과를 조사하였다. Fig.
고추 탄저병의 주된 병원균으로 보고되었던 C. gloeosporioides와 최근에 주요 병원균으로 보고되고 있는 C. acutatum 에 대한 chlorothalonil 의 균사 생장 억제 효과를 조사하였다. Table 1에서처럼 8개의 C.
병원균은 다시 25°C의 암상태에서 7일간 배양한 후, 균총의 직경을 조사하여 chlorothalonil의 병원균에 대한 균사 생장 억제 효과를 계산하였다. 병원균에 대한 chlorothalonil의 균사 생장 억제 효과는 아래의 계산식을 사용하여 구하였으며, 각 병원균에 대한 chlorothalonil 의 균사 생장 억제 효과를 비교함으로써 chlorothalonil에 대한 병원균의 감수성 변화를 조사하였다. 모든 처리에는 3개의 반복을 두어 실험하였다.
다시 새로운 PDA 배지에서 5일간 배양한 후, 균사의 선단에서 직경 5 mm의 균사 조각을 떼어 정해진 농도의 chlorothalonil을 첨가한 PDA 배지에 접종하였다. 병원균은 다시 25°C의 암상태에서 7일간 배양한 후, 균총의 직경을 조사하여 chlorothalonil의 병원균에 대한 균사 생장 억제 효과를 계산하였다. 병원균에 대한 chlorothalonil의 균사 생장 억제 효과는 아래의 계산식을 사용하여 구하였으며, 각 병원균에 대한 chlorothalonil 의 균사 생장 억제 효과를 비교함으로써 chlorothalonil에 대한 병원균의 감수성 변화를 조사하였다.
살균제에 대한 감수성의 변화를 모니터링하기 위해서는, 병원균을 채집하는데 있어서 넓은 범위를 대표할 수 있도 록 채집하기 전에 확실한 계획을 세우는 것이 중요하다. 본 실험에서는 병원균을 채집할 때 동일한 지역에서 다수의 균주가 채집되는 것을 방지하였으며, 각 도마다 동일한 수의 채집지를 선정하였다. 채집지를 선정할 때에도 채집지가 한 곳으로 집중되는 것을 배제하였기 때문에, 1999년에 채집하여 단포자 분리한 128개 균주와, 2002년의 257개 균주는 전국을 대표할 수 있다고 본다
살균제-PDA 배지를 준비하기 위해서 chlorothalonil의 원제를 DMSO(dimethyl sulfoxide)에 녹인 후, PDA 배지에 적정 농도가 되게 희석하였다. 이때 PDA에서의 chlorothalonil의 농도는 500, 50, 5, 0.5 “g/mL로 조절하였으며, DMSO의 최종 농도는 1%가 되게 하였다.
대상 데이터
실험에 사용한 모든 탄저병 균은 열매의 병반 위에 형성된 병원균을 단포자 분리하여 획득하였다. 1999 년과 2002년 8월에 전국적인 고추 재배지를 방문하여 전형적인 탄저병 병징을 보이는 열매를 채집하였다. 채집한 열매는 25°C에서 48시간 습실처리한 후, 병징 위에 형성한 분생포자를 단포자 분리하였다.
Fluctuation of th sensitivity of Colletotrichum acutatum in 1999 (A) and 2002 (B) to 500 ㎍/mL of chlorothalonil. To investigate the sensitivity of Colletotrichum, in this report they were used 128 and 257 isolates obtained from infected fruits of red-pepper in all around of Korea.
실험에 사용한 모든 탄저병 균은 열매의 병반 위에 형성된 병원균을 단포자 분리하여 획득하였다. 1999 년과 2002년 8월에 전국적인 고추 재배지를 방문하여 전형적인 탄저병 병징을 보이는 열매를 채집하였다.
연도별 감수성의 변화를 조사하기 위해서 1999년에 단포자 분리한 128개 균주와 2002년의 257개 균주를 실험에 사용하였다. 전국 각 지역에서 분리한 탄저병 균주의 chlorothalonil에 대한 반응은 Fig.
성능/효과
1 ug/mL로 나타났다. 그러 나 C. gloeosporioides의 chlorothalonil에 대한 EC50값의 범위는 2.3 - 1500 ug/mL로 C. acutatum5] 균주들과 비슷하였지만, 평균값은 242.7 ug/mL로 C. acutatum의 균주들보다 적은 값을 보였다. 결국 최근 고추 탄저 병의 주된 병원균으로 변화된 C.
8%로 감소하여, 500 /zg/mL의 chlorothalonil에 의해서 100% 생육이 억제되는 균주의 비율 변화와 동일한 결과를 얻었다. 또한 실험에 사용한 전체 균주에 대하여 500 ug/mL의 chlorothalonil의 평균 균사 생장 억제율은 1999년에 74.2%에서 2002년에는 80.6%로 평균적으로는 약간 상승하여 전체 균 주의 감수성 정도가 증가하는 양상을 보였지만, 통계적으로는 유의차가 없었다. 이처럼 채집 시기에 따른 고추 탄저병 균의 chlorothalonil에 대한 감수성 정도는 1999년보다 2002년에 약간 증가하는, 즉 저항성 균주의 선발 빈도가 감소함을 나타내고 있다.
탄저병 균을 채집한 1999년과 2002년의 3년 사이에 탄저병 균의 chlorothalonil에 대한 감수성이 전국 각 지역별로 차이가 있는 것을 알 수 있었다(Fig. 3). 경기/ 강원 지역과 경상남북도의 경우는 병원균의 감수성이 증가하였지만, 충청남북도와 전라남북도의 경우는 감 수성이 떨어지는 균주의 집단이 증가하였다.
후속연구
. 그렇지만 본 실험의 결과, 충청과 전라도 지역에서 분리한 탄저병 균의 chlorothalonil에 대한 저항성이 증가하는 경향을 보아 이 지역에서의 chlorothalonil과 비슷한 작용기작을 지닌 보호용 살균 제의 사용에 주의를 기울여야 할 것으로 생각한다.
이처럼 고추에서 탄저병을 일으키는 Colletotrichum 은 분류상의 종에 따라서 살균제에 대한 반응이 다르 기 때문에 병원균의 종과 살균제와의 반응, 그리고 포장에서 종의 밀도 변화에 대한 조사가 지속적으로 이루어져야 효과적인 방제 방법을 확립할 수 있을 것으로 생각한다.
이러한 결과를 근거로 보면 지역 간 chlorothalonil 사용량과 빈도를 예측할 수는 있는데, 경기/강원과 경상도 지역보다는 충청과 전라도 지역에서 chlorothalonil 또는 유사한 작용기작을 갖는 예방용 살균제의 사용이 많았을 것으로 추정한다. 포장에서의 chlorothalonil의 사용량을 조사할 수 있다면 저항성 병원균의 모니터링 결과와 연계하여 많은 정보를 제공할 수 있고 모니터링의 결과를 정확하게 해석할 수 있겠지만, 유감스럽게도 본 실험에서는 포장에서의 실질적인 농약의 사용량을 조사하지 못하였기 때문에 구체적인 정보를 제공하는데 한계를 보였다..
참고문헌 (16)
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