[논문]청양 지역 고추와 구기자에서 분리한 탄저병균의 동정, 균학적 특징 및 살균제 저항성

김가혜; 김주형; 김흥태

doi:10.7585/kjps.2015.19.3.335

청양 지역 고추와 구기자에서 분리한 탄저병균의 동정, 균학적 특징 및 살균제 저항성
Identification, Mycological Characteristics and Response to fungicides of Anthracnose Pathogen Isolated from Pepper and Boxthorn in Cheongyang 원문보기

농약과학회지 = The Korean journal of pesticide science, v.19 no.3, 2015년, pp.335 - 344

김가혜 (충북대학교 농업생명환경대학 식물의학과) , 김주형 (충북대학교 농업생명환경대학 식물의학과) , 김흥태 (충북대학교 농업생명환경대학 식물의학과)

초록
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병든 고추와 구기자 열매에서 분리한 탄저병균 11균주와 36균주를 동정한 후, 몇 가지의 균학적 특징과 살균제에 대한 반응을 조사하였다. 고추에서 분리한 병원균은 모두 Colletotrichum acutatum의 A2 그룹으로 동정되었다. 구기자에서 분리한 병원균은 14균주가 C. gloeosporioides, 22균주가 C. acutatum으로 동정되었으며, C. acutatum 균주는 15균주가 A1 그룹, 7균주가 A3 그룹에 속하였다. $25^{\circ}C$의 PDA 배지에서 10일간 배양한 후 병원균 균총의 색깔을 조사한 결과, 분리한 기주에 관계없이 C. acutatum은 회백색의 균총을 보였으며, C. gloeosporioides는 균총의 중앙은 주황색을, 주변부로 갈수록 회백색과 주황색이 혼재된 색깔을 나타냈다. 고추에서 분리한 C. acutatum의 분생포자 중에서 양끝이 둥근 형태을 나타내는 포자의 비율은 95% 이상이었으나, 구기자 균주는 75%로, 약 25%의 분생포자가 최소한 한 쪽이 뾰족한 형태를 나타내었다. 실험에서 사용한 모든 균주는 Colletotrichum의 종에 관계없이 $25^{\circ}C$가 생장 적온이었다. 한천희석법을 통해서 조사한 고추의 C. acutatum A2 그룹에 속하는 균주의 carbendazim과 carbendazim/diethofencarb 대한 평균 $EC_{50}$값은 0.68과 $3.16{\mu}g/ml$이었으며, 구기자의 C. acutatum A1과 A3 그룹은 carbendazim에 대해서 0.21과 $0.24{\mu}g/ml$, 그리고 합제에 대해서는 1.52와 $3.35{\mu}g/ml$이었다. 또한 구기자에서 분리 한 C. gloeosporioides의 평균 $EC_{50}$값은 각각의 살균제에 대해서 0.12와 $0.92{\mu}g/ml$이었다. 두 살균제에 대한 저항성 요인 값(Rf값)은 구기자에서 분리한 C. acutatum 균주 집단이 고추 균주 집단보다 더 높았다.

Abstract ▼ AI-Helper

It was conducted to identify all 47 isolates obtained from infected fruits of pepper and boxthorn, and to investigate the mycological characteristics and the response to fungicides. All of 11 isolates from pepper were identified as Colletotrichum acutatum included into A2 group. Among 36 isolates from boxthorn, 14 isolates were identified as C. gloeosporioides, and the others were done as C. acutatum, which were composed as A1 group with 15 isolates and A3 with 7 isolates. After incubating the isolates on PDA at $25^{\circ}C$ for 10 days, the colony color of C. acutatum was greyish white, while that of C. gloeosporioides was orange at center of colony and was gradually turned into an greyish white to the periphery. The rate of conidia showing ellongated ellipsoidal shape with round ends was over 95% in C. acutatum isolated from pepper. However, C. acutatum isolated from boxthorn produced ellongated ellipsoidal conidia with the rate of 75%, and the others were pointed at one or both ends. Regardless of species of Colletotrichum, all isolated used in this study was showed an optimal temperature at $25^{\circ}C$. $EC_{50}$ values of all isolates of Colletotrichum spp. to 2 fungicides as carbendazim and the mixture of carbendazim and diethofencarb was investigated by an agar dilution method. With C. acutatum isolates from pepper belonged to A2 group, the mean of $EC_{50}$ value to carbendazim and the mixture of carbendazim and diethofencarb was 0.68 and $3.16{\mu}g/ml$, respectively. In the case of C. acutatum isolates from boxthorn, which were divided into 2 groups as A1 and A3 group, that to carbendazim was 0.21 at A1 and $0.24{\mu}g/ml$ at A3, while that to the mixture was 1.52 and $3.35{\mu}g/ml$. Isolates of C. gloeosporioides showed the mean of $EC_{50}$ value was $0.12{\mu}g/ml$ to carbendazim and $0.92{\mu}g/ml$ to the mixture. The value of resistant factor was higher in the isolates of C. acutatum obtained in boxthorn than those from pepper.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 논문에서는 고추와 구기자를 근접한 포장에서 재배하고 있는 충남 청양 지역에서 고추와 구기자에서 탄저병균을 분리하여, 정확한 동정을 하기 위해서 병원균의 ITS 영역의 염기서열을 분석하여 동정함과 동시에, 분생포자의 형태, 온도별 균사생장 정도 등을 조사하였고, 살균제인 carbendazim과 carbendazim/diethofencarb 합제에 대한 병원균의 반응 등을 조사하였다.

가설 설정

a; Each isolate was incubated on PDA at the indicated temperature under a dark condition.

제안 방법

gloeosporioides 균주들은 16이었다. carbendazim/diethofencarb합제에 대한 EC₅₀값과 EC₉₀값을 조사하였다. 고추에서 분리한 C.
분생포자 현탁액은 4겹의 거즈를 사용하여 여과해서 균사조각을 제거한 후, 광학현미경으로 관찰하며 포자의 형태와 크기를 조사하였다. 각 균주 당 100개의 분생포자의 크기와 모양을 3반복으로 조사하였다.
병원균을 접종한 배지는 25℃에서 7일간 배양한 후 균총의 직경을 측정하였고, 약제를 첨가하지 않은 PDA 배지 상에서의 균총의 직경과 비교하여 균사 생장 억제율(%)을 계산하였다. 각각의 약제가 병원균의 균사생장을 50%와 90%를 억제하는 농도인 EC₅₀값과 EC₉₀값를 구하여 살균제에 대한 각 균주들의 감수성 정도를 비교하였다.
구기자에서 분리한 36균주 중에서 C. acutatum 10CMCU1-1, 10CMCC2, 10CMCU2-3 등 3개 균주와, 11개의 고추 균주 중에서 C. acutatum 10PPCU1, 10PPCU2, 10PPCCN1 등 3개 균주를 선발하여 분생포자의 크기와 형태를 조사하였다(Table 2). 구기자에서 분리한 병원균의 분생포자 장경과 단경은 (10.
6mm/일로 동일하였다. 구기자에서 분리한 C. gloeosporioides10CMCU1-1 등 4개 균주와 C. acutatum CMCT3 등 4개 균주를 선발하여 고추에서 분리한 C. gloeosporioides KACC40690과 20, 25, 30℃의 PDA 배지에서 일일 평균 균사생장률을 조사하였다. Fig.
PDA 배지에 병원균을 접종하여 25℃에서 1주일간 배양한 후 균사체를 수확하여 12시간 동안 동결건조를 하였다. 동결건조한 시료는 유리봉으로 분쇄한 다음 0.5% SDSCTAB (2.5 M NaCl, 0.25 M EDTA (pH8.0), 0.5 M TrisHCl(pH7.5), 1% polyvinylpyrrolidone-10, 1% hexadecyl trimethyl ammonium bromide, 0.5% sodium dodesyl sulfate)를 1.5 ml씩 첨가하고, 65℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응액은 12,000 g에서 10분간 원심분리를 하였고 상징액을 수거하였다.
두 살균제 모두 PDA 배지에 첨가하여 최종농도가 0.01, 0.1, 1, 10,100 μg/ml가 되도록 희석하였으며, carbendazim의 경우 PDA 배지 상에서의 DMSO의 최종 농도는 1%가 넘지 않도록 조절하였다.
또한 DNA를 1.5% agarose gel을 사용하여 1X TAE buffer상에서 100 V/cm3의 전원으로 30분간 전기영동 후 UV illuminator에서 λ DNA를 기준으로 농도를 확인하였고, 확인된 DNA는 다시 0.01 μg/ml으로 정량하여 실험에 사용하였다.
반응조건은 희석된 DNA 5 μl에 10X KAPA Taq buffer (dye 5 μl), dNTP 5 μl, ITS5 primer(10 pmoles/μl) 3 μl, ITS4 primer (10 pmoles/μl) 3 μl, Taq polymerase (5 units/μl, KAPABIOSYSTEMS) 0.25 μl, 살균증류수 28.75 μl를 첨가하여, 4분간 95℃에서 pre-denaturation 과정을 수행 후, 30초 동안 94℃에서 denaturation, 1분 동안 55℃에서 annealing, 1분 동안 72℃에서 extension 과정을 30회 반복하였으며, 최종적으로 72℃에서 7분 동안 반응을 시킨 후 반응을 종료시켰다.
25%+25%, WP)에 대한 살균제 반응을 조사하였다. 병원균을 PDA 배지에 접종하고 25℃의 항온기에서 7일간 배양한 후 균사 선단 부위에서 직경 5 mm의 균사 조각을 떼어내어 각 약제를 농도별로 첨가한 새로운 PDA 배지에 접종하였다. 살균제를 용해시키기 위한 용매로 carbendazim은 dimethyl sulfoxide(DMSO)를, 그리고 carbendazim과 diethfencarb 합제는 살균증류수를 사용하였다.
이 때 PDA 배지에는 세균의 오염을 방지하기 위해서 300 μg/ml의 streptomycin을 첨가하였다. 병원균을 접종한 배지는 25℃에서 7일간 배양한 후 균총의 직경을 측정하였고, 약제를 첨가하지 않은 PDA 배지 상에서의 균총의 직경과 비교하여 균사 생장 억제율(%)을 계산하였다. 각각의 약제가 병원균의 균사생장을 50%와 90%를 억제하는 농도인 EC₅₀값과 EC₉₀값를 구하여 살균제에 대한 각 균주들의 감수성 정도를 비교하였다.
본 실험에서 분리한 47균주들을 25℃의 PDA 배지에서 10일간 배양한 후, 배양된 균주들의 균총의 색깔을 조사하였다. 분생포자의 크기 및 형태를 관찰하기 위해 고추와 구기자에서 분리한 균주를 각각 3균주씩 선발하고, 각각의 분생포자를 수확하였다.
선발한 탄저병균은 25℃의 PDA 배지에서 10일간 배양한 후 살균증류수를 붓고 균총의 표면을 멸균한 붓으로 긁어서 분생포자를 수확하였다. 분생포자 현탁액은 4겹의 거즈를 사용하여 여과해서 균사조각을 제거한 후, 광학현미경으로 관찰하며 포자의 형태와 크기를 조사하였다. 각 균주 당 100개의 분생포자의 크기와 모양을 3반복으로 조사하였다.
본 실험에서 분리한 47균주들을 25℃의 PDA 배지에서 10일간 배양한 후, 배양된 균주들의 균총의 색깔을 조사하였다. 분생포자의 크기 및 형태를 관찰하기 위해 고추와 구기자에서 분리한 균주를 각각 3균주씩 선발하고, 각각의 분생포자를 수확하였다. 선발한 탄저병균은 25℃의 PDA 배지에서 10일간 배양한 후 살균증류수를 붓고 균총의 표면을 멸균한 붓으로 긁어서 분생포자를 수확하였다.
살균증류수를 사용하여 1/10로 희석을 한 다음, 포자현탁액에 300 μg/ml의 streptomycin을 첨가하였다.
분생포자의 크기 및 형태를 관찰하기 위해 고추와 구기자에서 분리한 균주를 각각 3균주씩 선발하고, 각각의 분생포자를 수확하였다. 선발한 탄저병균은 25℃의 PDA 배지에서 10일간 배양한 후 살균증류수를 붓고 균총의 표면을 멸균한 붓으로 긁어서 분생포자를 수확하였다. 분생포자 현탁액은 4겹의 거즈를 사용하여 여과해서 균사조각을 제거한 후, 광학현미경으로 관찰하며 포자의 형태와 크기를 조사하였다.
5% agarose gel을 사용하여 100 V에서 30분간 전기영동 한 후 UV illuminator를 이용하여 band를 확인하였다. 시료들은 PCR purification kit (GeneAll, Seoul,South Korea)를 사용하여 정제하고 SolGent (Daejeon, South Korea)에 DNA 염기서열 해독을 의뢰하였다.
8s-ITS2 영역을 이용하여 계통수를 작성하고 1,000회의 bootstrap 분석을 통해 신뢰도를 평가하였다. 실험균주의 분류학적 위치를 비교하기 위해 NCBI GenBank의 염기서열을 획득하여 함께 유연 관계도를 작성하였다.
75 μl를 첨가하여, 4분간 95℃에서 pre-denaturation 과정을 수행 후, 30초 동안 94℃에서 denaturation, 1분 동안 55℃에서 annealing, 1분 동안 72℃에서 extension 과정을 30회 반복하였으며, 최종적으로 72℃에서 7분 동안 반응을 시킨 후 반응을 종료시켰다. 여기에서 얻어진 PCR 산물들은 TAE buffer (1 M Tris-HCl (pH8.0), 0.25 M EDTA)를이용하여 제작한 1.5% agarose gel을 사용하여 100 V에서 30분간 전기영동 한 후 UV illuminator를 이용하여 band를 확인하였다. 시료들은 PCR purification kit (GeneAll, Seoul,South Korea)를 사용하여 정제하고 SolGent (Daejeon, South Korea)에 DNA 염기서열 해독을 의뢰하였다.
온도에 따른 균사의 생장속도를 보기 위해 고추와 구기자에서 분리한 Colletotrichum속에 속하는 47개 균주를 PDA 배지에 접종하고, 25℃와 30℃에서 배양하면서 2일마다 균총의 직경을 측정하였다.
위의 실험과 동일한 총 47개의 고추와 구기자 탄저병균의 carbendazim (a.i. 95%, Tech.)과, carbendazim/diethofencarb의 합제(a.i. 25%+25%, WP)에 대한 살균제 반응을 조사하였다. 병원균을 PDA 배지에 접종하고 25℃의 항온기에서 7일간 배양한 후 균사 선단 부위에서 직경 5 mm의 균사 조각을 떼어내어 각 약제를 농도별로 첨가한 새로운 PDA 배지에 접종하였다.
ITS5와 ITS4 primer를 사용하여 ITS 영역을 증폭한 결과,550 bp의 PCR 산물을 얻을 수 있었다. 증폭한 PCR산물을 클로닝하여 얻은 DNA 염기 서열을 분석하여 병원균의 동정을 수행하였다. 청양 지역의 고추와 구기자에서 총 47개의 Colletotrichum속 균주를 분리하였다.

대상 데이터

2011년 8월 충청남도 청양군의 고추와 구기자 포장에서 탄저병의 전형적인 병반을 보이는 고추와 구기자의 열매를 채집하였다. 병반 부위에서 탄저병균 포자가 형성된 발병조직을 적당한 크기(5 × 5 mm)로 잘라 멸균수 1 ml가 담긴 microtube에 넣고 잘 흔들었다.
증폭한 PCR산물을 클로닝하여 얻은 DNA 염기 서열을 분석하여 병원균의 동정을 수행하였다. 청양 지역의 고추와 구기자에서 총 47개의 Colletotrichum속 균주를 분리하였다. 청양군 운곡면의 구기자시험장에서 채집한 16개의 균주 중에서 10CMCT1-1과 10CMCT1-2를 제외한 나머지 균주는 C.
청양 지역의 고추와 구기자에서 총 47개의 Colletotrichum속 균주를 분리하였다. 청양군 운곡면의 구기자시험장에서 채집한 16개의 균주 중에서 10CMCT1-1과 10CMCT1-2를 제외한 나머지 균주는 C. gloeosporioidesRG4 Z32955와 같이 그룹을 형성하며 DNA 염기서열이 98% 이상 일치하여 C. gloeosporioides로 동정하였다(Fig. 1). 구기자시험장의 병든 구기자 열매에서 분리한 10CMCT1-1과 10CMCT1-2, 운곡면에서 분리한 10CMCU1-1, 10CMCU1-2, 10CMCU1-3, 10CMCU2-1, 10CMCU2-2, 10CMCU2-3등 6개 균주, 청양읍에서 분리한 10CMCC2와 10CMCC3,청남면에서 분리한 10CMCCN1과 10CMCCN2, 비봉면에서 분리한 10CMCB1, 10CMCB2, CMCB3는 C.

데이터처리

해독한 염기서열은 PHYDIT ver. 3.1의 clustal X와 chromosome을 이용하여 정리한 후 Neighbor-Joining (NJ)의 방법(Tamura 등, 2004)으로 ITS1-5.8s-ITS2 영역을 이용하여 계통수를 작성하고 1,000회의 bootstrap 분석을 통해 신뢰도를 평가하였다. 실험균주의 분류학적 위치를 비교하기 위해 NCBI GenBank의 염기서열을 획득하여 함께 유연 관계도를 작성하였다.

이론/모형

ITS 영역의 DNA를 증폭하기 위해 Kim 등(2008)이 사용한 primer ITS5 (5'-GGA AGT AAA AGT CGT AAC AA-3')와 ITS4 (5'-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC-3')를 사용하여 PCR을 수행하였다.

성능/효과

ITS5와 ITS4 primer를 사용하여 ITS 영역을 증폭한 결과,550 bp의 PCR 산물을 얻을 수 있었다. 증폭한 PCR산물을 클로닝하여 얻은 DNA 염기 서열을 분석하여 병원균의 동정을 수행하였다.
2. Morphological characteristics of colonies of Colletotrichum gloeosporioides 10CMCT-9 (A) and C. acutatum10CMCU2-3 (B) isolated from boxthorn, and C. acutatum 10PPCU-2 (C) isolated from pepper, which were in℃ulated on PDA and incubated at 25℃ for 10 days under the dark condition.
92 μg/ml로 다른 그룹보다 낮은 EC₅₀값을 나타냈다. Rf값은 고추의 C. acutatum A2 균주들은 3.5 이었지만, 구기자의 C. acutatum A1과 A3은 각각 19.7과 35.0, C. gloeosporioides는 8.8로, 고추에서 분리한 균주들보다 더 높았다. 이러한 결과는 포장에서 주요 작물의 병원균 집단 변화를 예측함과 동시에 화학적 방제를 위해서 필요한 살균제를 선택하는데 도움을 줄 것으로 생각한다.
고추에서 분리한 C. acutatum A2에 속하는 균주의 carbendazim에 대한 평균 EC50값은 0.68 μg/ml로 최소와 최대범위는 0.21-1.39 μg/ml이었고, EC90값은 모두 100 μg/ml 이상이었다(Table 4).
고추에서 분리한 C. acutatum의 균주들은 대부분 회백색을 띠고 있는 반면에, 구기자에서 분리한 C. acutatum과 C.gloeosporioides의 균주들은 균총의 중앙 부위는 주황색을 띄지만, 주변은 주황색과 회백색이 혼재되어 있는 모습이었다(Table 1과 Fig. 2). 탄저병균의 균총의 색깔이 병원균의 동정을 위한 기준으로 사용될 수는 없으나, 고추와 구기자탄저병균의 균총의 색깔이 다르다는 것은 두 병원균 집단에 다양한 차이가 있음을 보여주고 있다.
본 실험에서 사용한 47개의 모든 균주는 Colletotrichum의 종에 관계없이 30℃보다는 25℃에서 균사 생장이 더 빨랐다. 고추와 구기자 탄저병균을 25℃의 PDA 배지에서 배양하며 일일 균사생장률을 조사한 결과, 고추에서 분리한 C. acutatum 균주의 일일 평균 균사생장률은 7.1 mm/일이었으며, 구기자에서 분리한 C. acutatum 균주들의 일일 평균 균사생장율은 6.9 mm/일, C. gloeosporioides 균주의 경우에는 6.6 mm/일로 나타나, 분리된 기주와 각 병원균의 종간에 균사생장률에는 차이가 없었다(Table 3). 30℃에서 세 그룹에 속하는 탄저병균의 일일 평균 균사생장률은 2.
구기자에서 분리된 탄저병균은 고추와 다르게 C. acutatum과 C. gloeosporioides 두 종류였으며, C. acutatum의 경우도 A1과 A3 그룹이 같이 존재하는 다양성을 보여주고 있다. 이러한 병원균의 생리·유전적 다양성은 살균제에 대한 반응에도 영향을 미치는 것으로 생각되며, 그 결과 포장에서 병원균의 저항성 요인 값이 고추 탄저병균보다 높게 나타났다.
구기자에서 분리한 C. acutatum 균주 중에서 A1 그룹에 속하는 15균주의 평균 EC50값은 0.21 μg/ml (0.01-1.75 μg/ml 사이)이었으며, 10CMCU1-2를 제외한 14균주의 EC90값은 100 μg/ml 이상이었다.
구기자에서 분리한 C. acutatum와 C. gloeosporioides의 총 8개의 균주 모두는 25℃에서 균사가 가장 빠르게 생장하였으며, 배양 온도가 20℃로 낮아지거나, 30℃로 높아질 경우에는 생장이 늦어지는 반면, 고추에서 분리한 C. gloeosporioides KACC40690은 25℃보다도 30℃에서 일일 평균 균사생장율이 11.98 ±1.53 mm/일로 가장 빨랐다.
구기자에서 분리한 C. gloeosporioides의 평균 EC50값은 10CMCT-13을 제외하면, 0.12 μg/ml(0.02-0.32μg/ml)였고, EC90값은 10CMCT-12를 제외한 나머지 균주들이 모두 100 μg/ml 이상이었다.
하지만 Lee (2003)는 구기자 탄저병 병반에서 분리한 Colletotrichum spp. 균주의 형태적, 배양적, 분자생물학적 특징을 조사하여 동정한 결과, 우점종을 C. acutatum으로 발표하였다. 구기자와 마찬가지로 가지과에 속하는 고추 역시 탄저병에 대한 피해가 심한 작물로서, 탄저병을 일으키는 병원균으로 C.
acutatum PT30 AJ292250와 동일한 그룹을 형성하였다. 또한 청남면에서 분리한 10CMCCN3과 비봉면에서 분리한 10CMCB4부터 10CMCB9까지 6개 균주는 A3 그룹에 속하는 C. acutatum CA473 AJ748628과동일한 그룹을 형성하며, DNA 염기서열은 99.8% 이상의 상동성을 보였다. 청양군 4개 지역에서 채집한 병든 고추에서 분리한 11개의 균주들은 모두 A2 그룹에 속하는 C.
acutatum을 형태적인 특징과 유전적 다양성을 조사하여 A1부터 A8까지 8개의 그룹으로 분류하였다. 본 실험에서 분리하여 동정한 고추는 Sreenivasaprasad와 Talhinhas(2005)의 분류와 동일하게 A2 그룹으로 분류되었으나, 동일하게 가지과 작물에 속하는 구기자에서 분리한 탄저병균은A1과 A3 그룹으로 나누어졌다. 이러한 결과는 구기자에서 분리한 탄저병균의 집단이 고추 탄저병균 집단보다 유전적으로 다양하다는 것을 보여주며, C.
본 실험에서 사용한 47개의 모든 균주는 Colletotrichum의 종에 관계없이 30℃보다는 25℃에서 균사 생장이 더 빨랐다. 고추와 구기자 탄저병균을 25℃의 PDA 배지에서 배양하며 일일 균사생장률을 조사한 결과, 고추에서 분리한 C.
71) μm로 두 그룹 간에 유의성 있는 차이는 없었다. 분생포자의 모양을 조사한 결과, 고추에서 분리한 균주와 구기자에서 분리한 균주 간에 차이가 있었다. 고추에서 분리한 C.
본 실험에서 분리하여 동정한 고추는 Sreenivasaprasad와 Talhinhas(2005)의 분류와 동일하게 A2 그룹으로 분류되었으나, 동일하게 가지과 작물에 속하는 구기자에서 분리한 탄저병균은A1과 A3 그룹으로 나누어졌다. 이러한 결과는 구기자에서 분리한 탄저병균의 집단이 고추 탄저병균 집단보다 유전적으로 다양하다는 것을 보여주며, C. acutatum의 경우 고추와 구기자에서 발생하는 집단이 서로 다름을 확인할 수 있었다.
이러한 병원균의 생리·유전적 다양성은 살균제에 대한 반응에도 영향을 미치는 것으로 생각되며, 그 결과 포장에서 병원균의 저항성 요인 값이 고추 탄저병균보다 높게 나타났다.
32μg/ml)였고, EC₉₀값은 10CMCT-12를 제외한 나머지 균주들이 모두 100 μg/ml 이상이었다. 집단 내의 저항성 요인인 Rf값은 고추의 C. acutatum A3 균주들은 6.6이었지만, 구기자의 C. acutatum A1과 A3는 각각 175와 185이었으며, C.gloeosporioides 균주들은 16이었다. carbendazim/diethofencarb합제에 대한 EC₅₀값과 EC₉₀값을 조사하였다.
8% 이상의 상동성을 보였다. 청양군 4개 지역에서 채집한 병든 고추에서 분리한 11개의 균주들은 모두 A2 그룹에 속하는 C.acutatum PD85-694 Aj748632와 같은 그룹을 형성하였으며,상동성은 99.8%이었다. Sreenivasaprasad와 Talhinhas (2005)는 C.

후속연구

8로, 고추에서 분리한 균주들보다 더 높았다. 이러한 결과는 포장에서 주요 작물의 병원균 집단 변화를 예측함과 동시에 화학적 방제를 위해서 필요한 살균제를 선택하는데 도움을 줄 것으로 생각한다.
gloeosporioides의 생리적 변화가 일어났을 가능성을 보여주는 결과라고 생각한다. 이러한 생리적 변화는 병원균의 포장 다양성으로 이어질 수 있기 때문에 다양한 형질의 조사가 필요할 것으로 본다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	고추, 사과, 구기자에서 분리된 C. acutatum의 균주들이 PDA 배지에서 배양 시 나타내는 색깔 차이는?	탄저병균의 균총의 색깔이 병원균의 동정을 위한 기준으로 사용될 수는 없으나, 고추와 구기자탄저병균의 균총의 색깔이 다르다는 것은 두 병원균 집단에 다양한 차이가 있음을 보여주고 있다. 고추에서 분리된 C.acutatum KACC40690은 PDA 배지에서 배양할 경우 흰색을 나타내기도 하고, 사과에서 분리한 C. acutatum의 경우에는 주황색, 흰색 또는 회색을 띄는 경우도 있는데(Kim etal., 2008), 구기자 탄저병균의 경우는 중앙 부위의 주황색이균사 선단으로 가면서 회백색과 혼합되는 양상을 보여주고 있었다.
	구기자 탄저병의 원인균은 무엇인가?	구기자 탄저병은 Colletotrichum gloeosporioides와 C.dematium 등이 일으키는 것으로 보고되어 있으며, C.gloeosporioides가 C.
	고추 탄저병을 일으키는 병원균에는 무엇이 있는가?	acutatum으로 발표하였다. 구기자와 마찬가지로 가지과에 속하는 고추 역시 탄저병에 대한 피해가 심한 작물로서, 탄저병을 일으키는 병원균으로 C. gloeosporioides,C. dematium, C. coccodes, C. acutatum, Glomerella cingulata 등 5종이 보고되어 있다(Park와 Kim, 1992). 이러한 고추 탄저병균 역시 과거에 우점종이었던 C.

참고문헌 (13)

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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