선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 그러므로 본 연구에서는 민간에서 보혈강장제로 활력 강화를 위해 사용되고 있는 전통 한약탕제 중 녹용대보탕(漉茸 大補湯)의 생체 내 생리활성 효과에 대한 기초자료를 얻고자 in u泊9에 의한 전자공여 작용과 지질과산화 억 제효과 등의 항산화 활성과 아질산염 소거 효과, tyrosinase 저해효과 그리고 혈소판 응집 억제 활성 등을 분석하였다.
- 한약탕제에 사용되는 약용식물에는 특히 페놀성 화합물들이 다량 함유되어 있는 것으로 확인된 바 있어(23) 본 연구에서 사용 한 녹용대보탕에도 아질산염 제거 효과가 있을 것으로 보여 pH 조건별 아질산염 소거 효과를 비교 검토하였다. 그 결과 Fig.
제안 방법
- in 房切。에 의한 전자공여작용과 지질과산화 억제 효과 등의 항산화 활성과 아질산염 소거효고" tyrosinase 억제 효과 그리고 혈소판 응집 억제 활성 등을 분석하였다. 본 실험 에서 사용한 한약탕제의 총 페놀 함량은 151.
- 즉 희석액 5 mL에 Folin reagent 5 mL를 가하고 5분간 정치시킨 후 5 mL의 10% NazCQ, 용액을 가하였다. 이 혼합액을 1시간 동안 정치한 다음 분광광도계 (UV/Vis Spectrophotometer, Ja-SCO, Japan)를 사용하여 760 nm에서 흡광도를 측정하고 (+) catechin을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 총 폴리페 놀 함량을 구하였다.
- 1 mL를 혼합한 후 정 확히 3분 후에 500 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 활성의 비 교를 위하여 합성항산화제 인 BHT를 시료첨가량의 1/10 을 사용하여 BHT 첨가구로 하였다.
- 전자 공여작용(electron donating ability, EDA)은 Kang 등의 방법(11)을 변형하여 측정하였다. 즉각 시료 0.
- 하였다. 즉 1 mM NaNCh용액 1 mL에 일정 농도의 메탄올 추출물 시료(2 mL)를 첨가하고 여기에 0.1 N HCKpH 1.2) 과 0.2 M 구연산 완충액 (pH 3.0, 4.2 및 6.0)을 사용하여 반응용액의 pH를 1.2, 3.0, 4.2, 6.0으로 조정한 후 최종 부피를 10 mL로 하였다. 이 혼합액을 37℃에서 1시간 반응시킨 후각 반응액을 1 mL씩 취하여 2% 초산용액 5 mL, Griess시 약 0.
- 방법(11)을 변형하여 측정하였다. 즉각 시료 0.2 mL에 4x1(广' M DPPH 용액(2, 2'-diphenylT-picrylhydrazyl)을첨가한 후 vortex mixer로 10초 동안 진탕하고 10분 후 분광광도계 (UV/VIS spectrophotometer, Jasco, Japan)를 사용하여 525 nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여 효과는 시 료첨 가구와 시료 무첨가구의 흡광도 차이를 다음과 같이 백분율로 나타내었다.
- 2 mL를가하여 40℃에서 은박 포장한 후 incubation하면서 일정 간격으로 측정하였다. 측정 방법은 혼합용액에서 0.1 m丄를 취하여 시험 관에 넣고 70%에 탄올 3 mL과 ammonium thiocyanate 용액 0.1 mL, 염화철분 용액 0.1 mL를 혼합한 후 정 확히 3분 후에 500 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 활성의 비 교를 위하여 합성항산화제 인 BHT를 시료첨가량의 1/10 을 사용하여 BHT 첨가구로 하였다.
대상 데이터
- 본 실험에서 사용한 한약탕제는 동의보감을 근거로 한 녹용대보탕(鹿茸大補湯)의 처방을 근거로 하여 총 26전의 약재 를 사용하여 Table 1과 같이 녹용대보탕을 조제하여 사용하였다.
이론/모형
- ADP(adenosine-5’「diphosphate)유도 혈소판 응집 억제 활성 은 Shon 등의 방법(15)에 따라 Sprague Dawley (SD) male rat의 혈소판을 분리한 후 Aggregometer(Chrono-log, Model No. 490-2D, Havertown, PA, USA)를 사용중]■여 측정하였으며 시험물질의 억 제율(inhibition rate)은 다음과 같이 산출하였다.
- Tyrosinase 저해효과 측정은 Wong 등의 방법(14)으로 측정 하였으며 tyrosinase를 50mM sodium phosphate 완중액 (pH 7.0)에 용해하여 조효소액으로 하였다. 효소 활성 의 측정은 10 mM catechol 용액 2.
- 아질산염 소거작용은 Gray와 Dugan의 방법(13)에 의하여 측정 하였다. 즉 1 mM NaNCh용액 1 mL에 일정 농도의 메탄올 추출물 시료(2 mL)를 첨가하고 여기에 0.
- 지질과산화 억제활성의 측정은 Osawa의 방법(12)에 따라 먼저 리놀레산(25 mg/mL in Et-OH), 염화철분(2.45 mg/rnL in 3.5% hydrochloride), ammonium thiocyanate(0.3 g/mL in H2O), 0.2 M 인산 완충액 (pH 7.0)를 조제하여 이들을 stock solution으로 사용하였다. 혼합용액은 각 시료용액 0.
- 총 폴리페놀 함량은 Folin-Denis방법 (10)으로 측정하였으며, 녹용대보탕을 25배로 희석하여 사용하였다. 즉 희석액 5 mL에 Folin reagent 5 mL를 가하고 5분간 정치시킨 후 5 mL의 10% NazCQ, 용액을 가하였다.
성능/효과
- 0에서 가장 낮은 소거효과를 나타내 pH가 높아질수록 그 활성이 낮았다. Tyrosinase 억 제효과는 80% 이상으로 나타났으며, SD rat의 혈소판을 ADP로 자극하였을 때 일어나는 혈소판 응집에 대한 저 해 활성을 측정한 결과 약 30%의 혈소판 응집 억제 효과를 보였다. 또한 이들 억제 효과는 농도의존적으로 일어남을 알 수 있었다.
- Tyrosinase 저해작용을 검토한 결과, 80% 이상의 tyrosinase 억제 효과를 나타냈으며 50배로 희석한 경우에도 50% 가량의 활성을 보였다(Fig. 4) 여성의 기미 또는 노인성 홍반을 일으키는 피부의 멜라닌의 생성과정은 tyrosin을 기질로 한 L-3, 4-dihydroxyphenylalanine의 생성, L-dopaquinone 으로 전이 등 연속된 효소적 산화의 진행에 의해 일어나는 일련의 산화 중 합반응이다. 멜라닌의 생성과정 에는 tyrosinase 가 중요한 역할을 하므로 (30) 이 효소의 활성을 저해 하거 나그 중간체들의 산화 반응이 억제됨으로써 멜라닌 색소가 감소될 것으로 보인다.
- 검토하였다. 그 결과 Fig. 3에 나타난 바와 같이 산성 pH에서 70% 정도의 활성을 나타냈으며, 이는 한약탕제에 들어있는 식물성 페놀 물질이 니트로 소아민생성 기질인 아민과 경쟁적으로 작용하기 때문인 것으로 생각된다. 또한 pH의 변화에 따른 아질산엄 소거 효과에서 는 pH가 증가할수록 활성이 감소하는 경 향을 보였으며, 대조구인( + )catechin(0.
- 3에 나타난 바와 같이 산성 pH에서 70% 정도의 활성을 나타냈으며, 이는 한약탕제에 들어있는 식물성 페놀 물질이 니트로 소아민생성 기질인 아민과 경쟁적으로 작용하기 때문인 것으로 생각된다. 또한 pH의 변화에 따른 아질산엄 소거 효과에서 는 pH가 증가할수록 활성이 감소하는 경 향을 보였으며, 대조구인( + )catechin(0.1 mg/mL)에서도 산성 pH에서 50%의 활성을 나타냈으나 pH 6.0에서 는 10%이 하로 나타났다. 이는 Kang 등(11)의 보고에서와 같이 사람의 위내 pH오]" 같은 pH 1.
- Tyrosinase 억 제효과는 80% 이상으로 나타났으며, SD rat의 혈소판을 ADP로 자극하였을 때 일어나는 혈소판 응집에 대한 저 해 활성을 측정한 결과 약 30%의 혈소판 응집 억제 효과를 보였다. 또한 이들 억제 효과는 농도의존적으로 일어남을 알 수 있었다.
- 9%의 전자공여효과를 나타냈다. 리놀레산을 이용한 지질과산화 억제 효과는 88.1%로 나타났으며, pH에 따른 아질산염 소거 효과를 비교 검토한 결과 시료의 아질산염 소거효과는 산성pH에서 70%정도의 활성을 나타냈으며 pH 1.2에서가장 높고, pH 6.0에서 가장 낮은 소거효과를 나타내 pH가 높아질수록 그 활성이 낮았다. Tyrosinase 억 제효과는 80% 이상으로 나타났으며, SD rat의 혈소판을 ADP로 자극하였을 때 일어나는 혈소판 응집에 대한 저 해 활성을 측정한 결과 약 30%의 혈소판 응집 억제 효과를 보였다.
- 리놀레산을 이용한 지질과산화 억제 효과를 측정한 결과 Fig. 2에서와 같이 88.1%의 억제 효과를 보였으며, 일반적으로 많이 사용되고 있는 합성항산화제인 BHT(0.1 mg/mU를 대조구로 사용한 경우 약 78.8%의 지질과 산화억제 효과를 나타낸 것으로 확인되었다. 과산화지질은 생체 내에서 각종 효소나 지단백질을 변성시키고 세포막을 파괴하여 급성 조직장 애 및 세포노화를 유도하며, 혈소판 응집, 간질환, 당뇨병, 고지혈증 등 각종 성인병의 원인이 될 뿐만 아니라 발암 의원 인으로 주목되고 있다.
- 그리고 혈소판 응집 억제 활성 등을 분석하였다. 본 실험 에서 사용한 한약탕제의 총 페놀 함량은 151.3 + 2.6 mg%로확인되 었으며, 80.9%의 전자공여효과를 나타냈다. 리놀레산을 이용한 지질과산화 억제 효과는 88.
- 또한 천연에 존재하는 항산화제의 대부분이 페놀성 물질이라는 데 주목되어 근래에 페놀성 화합물에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 본 실험에서 사용한 한약 시료의 총 페놀 함량은 15L3±2.6 mg%로 확인되었다. 다른 식물의 경우에는 녹차 추출물이 44.
- 비정상적인 혈소판의 활성화는 폐쇄성 혈관질환인 심근경색증, 뇌혈전 등의 직접적인 원인이 될 수 있으며 (31, 32), 따라서 생약추출물로부터 혈소판 응집 억 제성분을 찾고 자 하는 연구가 진행되고 있다 (33). 본 실험에서는 현재까지 심혈관계질환의 예방 및 치료를 위해 가장 많이 사용되고 있는아스피 린 (acetylsalicylic acid)을 대조구로 사용하여 활성 을비 교 한 결과, 1 me/mL의 농도에서 비슷한 혈소판 응집 억 제 효과를 보였다. 녹용대보탕의 이러한 혈소판 응집 억제 효과는 이미 활성이 보고된 (33) 일부 단일 생약재제들의 첨가와 녹용의 첨가 효과에 따른 것으로 생각되므로, 어혈이나 혈전증 외에도 혈소판 활성화에 의하여 발현되는 다른 병적 과정의 예방과 치료 효과가 기대되어 이에 대한 연구가 더 필요할 것으로 사료된다.
- 본 연구에서 사용한 녹용대보 탕에 대하여 SD rat의 혈소판을 ADP로 자극하였을 때 일어나는 혈소판 응집 저 해 활성을 측정한 결과, Fig. 5에 나타난 바와 같이 약 30%의 혈소판응집억제 효과를 보여 혈전 예방 효과가 있음을 확인할 수 있었으며 이들 억제 효과는 농도의존적으로 일어남을 알 수 있었다. 비정상적인 혈소판의 활성화는 폐쇄성 혈관질환인 심근경색증, 뇌혈전 등의 직접적인 원인이 될 수 있으며 (31, 32), 따라서 생약추출물로부터 혈소판 응집 억 제성분을 찾고 자 하는 연구가 진행되고 있다 (33).
- 본시료의 원액의 경우 80.9%의 전자공여효과를 나타냈으며, 1/50 희석액이 20.2%의 전자공여효과를 보였다. 이는 합성 항산화제로 많이 쓰이는 BHT의 항산화 활성을 측정 하여 비교한 결과 0.
- 2%의 전자공여효과를 보였다. 이는 합성 항산화제로 많이 쓰이는 BHT의 항산화 활성을 측정 하여 비교한 결과 0.5 mM일 때 17.6%를 나타냈으며, Fig. 1에 나타난 바와 같이 농도 의 존적으로 항산화 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 이는 Kang 등(11)과 Rhee 등(21)의 보고에서와 같이 한 약탕제의 생약성분들인 플라보노이드와 페놀산이 중요한 항산화 역할을 하는 것으로 추정된다.
후속연구
- 이는 Kang 등(11)과 Rhee 등(21)의 보고에서와 같이 한 약탕제의 생약성분들인 플라보노이드와 페놀산이 중요한 항산화 역할을 하는 것으로 추정된다. 그러나 본 실험에서 사용한 녹용성 분의 효과도 적용된 것으로 생 각되어 녹용의 생리활성에 대한 연구가 필요할 것으로 생각된다. 자유기는 에피네프린의 산화, 미토콘드리아, 식세포 또는 세포질 중 xanthin oxidase나 glutathione reductase 등의 flavoenzyme에 의한 정상적인 대사과정과 같은 여러 가지 생물학적 반응에 의해 형성되며 전자공여작용은 이런 산화 성 생물활성 유리기 에 전자를 공여하여 산화를 억제하는 척도가 된다(22).
- 그러므로 본 연구에 사용된 한방재료들의 항산화성을 고려해 볼 때 멜라닌의 생성도 억제되어 미백제로 사용도 가능할 것으로 보여진다. 화장품에 많이 사용되는 미백제 성분인 아스코르브산을 대조구로 사용하였을 때, 0.
- 본 실험에서는 현재까지 심혈관계질환의 예방 및 치료를 위해 가장 많이 사용되고 있는아스피 린 (acetylsalicylic acid)을 대조구로 사용하여 활성 을비 교 한 결과, 1 me/mL의 농도에서 비슷한 혈소판 응집 억 제 효과를 보였다. 녹용대보탕의 이러한 혈소판 응집 억제 효과는 이미 활성이 보고된 (33) 일부 단일 생약재제들의 첨가와 녹용의 첨가 효과에 따른 것으로 생각되므로, 어혈이나 혈전증 외에도 혈소판 활성화에 의하여 발현되는 다른 병적 과정의 예방과 치료 효과가 기대되어 이에 대한 연구가 더 필요할 것으로 사료된다.
- 1 mg/m丄의 농도에서 74%의 tyrosinase 억제 활성을 나타냈다. 따라서 녹용대보탕은 미백화장품 등의 소재로도 사용할 수 있을 것으로 보이며, 또한 식물체 유래의 tyrosinase 저해제는 식품 가공 도중 또는 열처리를 할 수 없는 식품의 효소적 갈변을 억제하는데 안전성에 별 문제가 없이 사용될 수 있어 식품의 개발에도 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.