광합성 섬모류 Mesodinium rubrum MR-MAL01의 응용성(1) 이매패류 종묘생산을 위한 먹이생물 유용성 Applicability of a Photosynthetic Ciliate, Mesodinium rubrum MR-MAL01 -Usefulness as a Live Prey Species for the Marine Aquaculture of Bivalves-원문보기
최근, 곰소만에서 채집한 시료로부터 최초의 온대역산 광합성 섬모류 Mesodinium rubrum MR-MAL01 배양체를 분리ㆍ배양하였다. 이 섬모류를 이용하여 이매패류의 섭식실험을 수행한 결과, 비단가리비와 바지락과 같은 이매패류가 섬모류를 직접 섭식 하였음을 확인하였는데, 개체 당 최대 섭식률은 비단가리비 9,590 cells $min^{-1}$, 바지락 23,200 cells $min^{-1}$으로 나타났다. 또한 비단가리비의 소화관에서 완전한 M. rubrum세포를 확인하지 못했으나, 파괴된 세포로 생각되는 작은 입자들을 관찰하였다. 바지락 치패에 섬모류인 M. rubrum과 미소조류인 Isochrysis galbana (KMCC H-2)를 공급하면서 28일 동안 사육한 결과, 작은 치패 그룹(각장 0.46 mm)에서는 I. galbana를 공급한 실험구가 좋은 성장을 보였던 반면, 큰 치패 그룹(각장 0.84 mm)에서는 M. rubrum을 공급한 실험구가 I. galbana를 공급한 실험구에 비해 성장이 좋았다. 따라서 이 광합성 섬모류는 이매패류의 치패 및 모패와 입이 작은 자어의 먹이생물, rotifer의 영양강화제 및 어류의 천연 착색제로도 활용할 수 있는 잠재력이 있어 해양 생물공학적 활용을 위한 생물재료로서 개발 가능성을 제안한다.
최근, 곰소만에서 채집한 시료로부터 최초의 온대역산 광합성 섬모류 Mesodinium rubrum MR-MAL01 배양체를 분리ㆍ배양하였다. 이 섬모류를 이용하여 이매패류의 섭식실험을 수행한 결과, 비단가리비와 바지락과 같은 이매패류가 섬모류를 직접 섭식 하였음을 확인하였는데, 개체 당 최대 섭식률은 비단가리비 9,590 cells $min^{-1}$, 바지락 23,200 cells $min^{-1}$으로 나타났다. 또한 비단가리비의 소화관에서 완전한 M. rubrum세포를 확인하지 못했으나, 파괴된 세포로 생각되는 작은 입자들을 관찰하였다. 바지락 치패에 섬모류인 M. rubrum과 미소조류인 Isochrysis galbana (KMCC H-2)를 공급하면서 28일 동안 사육한 결과, 작은 치패 그룹(각장 0.46 mm)에서는 I. galbana를 공급한 실험구가 좋은 성장을 보였던 반면, 큰 치패 그룹(각장 0.84 mm)에서는 M. rubrum을 공급한 실험구가 I. galbana를 공급한 실험구에 비해 성장이 좋았다. 따라서 이 광합성 섬모류는 이매패류의 치패 및 모패와 입이 작은 자어의 먹이생물, rotifer의 영양강화제 및 어류의 천연 착색제로도 활용할 수 있는 잠재력이 있어 해양 생물공학적 활용을 위한 생물재료로서 개발 가능성을 제안한다.
In a series of feeding experiments using the newly established the first laboratory strain of a temperate photosynthetic ciliate, Mesodinium rubrum MR-MAL01, direct evidence was obtained for ingestion of the cultured M. rubrum cells by the bivalves like the Korean scallop, Chlamys farreri and Manila...
In a series of feeding experiments using the newly established the first laboratory strain of a temperate photosynthetic ciliate, Mesodinium rubrum MR-MAL01, direct evidence was obtained for ingestion of the cultured M. rubrum cells by the bivalves like the Korean scallop, Chlamys farreri and Manila clam. Ruditapes phil-ippinarum. Each experimental Korean scallop and Manila clam removed up to 9,590 and 23,200 cells min-1, respectively. Small particles almost identical to the ruptured cells of MR-MAL01 culture were observed in the gut of the experimental bivalves, although no intact M. rubrum cell was found. In a 28 days rearing experiment, Isoshrysis galbana (KMCC H-2), a microalga, supported better growth of small Manila clam spat (0.46 mm in shell length) than MR-MAL01 strain. For the large Manila clam spat (0.84 mm in shell length), however. MR-MAL01 strain was a better prey item. Mass culture methods for this photosynthetic marine ciliate may be developed for use as live feed in aquaculture of the spat and broodstock of bivalve and small-mouthed fish larvae.
In a series of feeding experiments using the newly established the first laboratory strain of a temperate photosynthetic ciliate, Mesodinium rubrum MR-MAL01, direct evidence was obtained for ingestion of the cultured M. rubrum cells by the bivalves like the Korean scallop, Chlamys farreri and Manila clam. Ruditapes phil-ippinarum. Each experimental Korean scallop and Manila clam removed up to 9,590 and 23,200 cells min-1, respectively. Small particles almost identical to the ruptured cells of MR-MAL01 culture were observed in the gut of the experimental bivalves, although no intact M. rubrum cell was found. In a 28 days rearing experiment, Isoshrysis galbana (KMCC H-2), a microalga, supported better growth of small Manila clam spat (0.46 mm in shell length) than MR-MAL01 strain. For the large Manila clam spat (0.84 mm in shell length), however. MR-MAL01 strain was a better prey item. Mass culture methods for this photosynthetic marine ciliate may be developed for use as live feed in aquaculture of the spat and broodstock of bivalve and small-mouthed fish larvae.
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문제 정의
rubrum을 장기간 지속적으로 공급하여 이 종을 먹이원으로 한 치패의 성장 효과를 분석하였다. 이러한 연구를 통하여 이매패류 인공 종묘 생산 시 M. rubrum 종주를 새로운 먹이생물로 이용하기 위한 필수적인 기초자료를 확보하고자 하였다.
제안 방법
의 경우 lxl02 cells ml-1, IxlO3 cells ml-1, IxlO4 cells mF이었다. 각각의 먹이 농도 실험 구에서 매일 일정량을 표본 채수하여 먹이생물을 계수한 다음, 소비된 만큼의 먹이생물■을 공급하여 농도를 일정하게 유지시켜 주었고, 4일 간격으로 전량 환수하였다. 섭식실험은 20。(; 30 ppt에서 28일간 광량 60 μE m 2 L의 연속 광 조건에서 실시하였고, 공기는 주입 화지 않았다.
mbrim을 섭식한다. 는 것을 직접 확인한 후, 두 종의 최대 섭식률을 측정하고, 인공 종묘 생산된 바지락 치패를 대상으로 살아있는 M. rubrum을 장기간 지속적으로 공급하여 이 종을 먹이원으로 한 치패의 성장 효과를 분석하였다. 이러한 연구를 통하여 이매패류 인공 종묘 생산 시 M.
이 섬모류를 이용하여 이매패류의 섭식실험을 수행한 결과, 비단 가리비와 바지락과 같은 이매패류가 섬모류를 직접 섭식하였음을 확인하였는더】, 개체 당 최대 섭식률은 비단가 리비 9, 590 cells min-', 바지락 23, 200 cells miiM으로 나타났다. 또한 비단 가리비의 소화관에서 완전한 M. rubrum 세포를 확인하지 못했으나, 파괴된 세포로 생각되는 작은 입자들을 관찰하였다. 바지락 치패에 섬모류인 M.
섭식 자로서 비단가리비, Chlamys farreri와 바지락, Ruditapes philippinarume 이용하여 다음의 두 가지 실험을 실시하였다. 첫 번째 실험은 각 장 3 cm 전후의 비단 가리비와 바지락을 이용하여 이들의 M.
첫 번째 실험에 사용된 비단 가리비와 바지락(Table 2)은 전 라북도 부안 연안의 패류 양식 어장에서 채집하여 실험실로 옮긴 후, 20 L 수조에서 각각의 실험조건으로 2일 동안 적응시켰다. 섭식 자인 비단 가리비와 바지락은 실험 시작 3시간 전에 1 L 플라스틱 용기에 2, 5, 10개체를 수용하여 순응시켰고, 대조구 로 섭식 자를 수용하지 않고 M. rubrum 만을 공급하였다. 비단 가리비는 1VC에서, 바지락은 20。에서 24시간 동안 섭식실험을 하였다.
우리나라 서해의 곰소만에서 분리한 최초의 온 대역 M. rubrum 배양체인 MR-MAL01 (Table 1)을 이매패류 먹이생물로서의 활용 가능성을 실험하였다. 각 장 3 cm 전후의 비단 가리비와 바지 락(Table 2)을 각각 10개체 1尸로 수용하여 먹이생물로 M.
이매패류가 실제로 M. rubmm을 섭식하였는가를 증명하기 위해 염분 30 ppt, 온도 20℃ 하에서 먹이 농도를 85,400 cells mlT로 하여 배양실험을 행한 후, 2시간이 경과된 다음에 비단 가리비를 꺼내 소화관을 절개한 다음, 내용물을 광학현미경 (Olympus BX-50)으로 관찰하였다.
섭식 자로서 비단가리비, Chlamys farreri와 바지락, Ruditapes philippinarume 이용하여 다음의 두 가지 실험을 실시하였다. 첫 번째 실험은 각 장 3 cm 전후의 비단 가리비와 바지락을 이용하여 이들의 M. rubrum 섭식여부 및 최대 섭식률을 계산하였고, 두 번째 실험은 바지락 치패의 크기에 따른 M. rubrum의 먹이효과를 확인하기 위해 수행되었다(Table 2).
02 mm)는 20개체를 각각 수용하였다. 치패의 먹이생물은 이매패류 종묘생산 시 폭넓게 이용되는 Isochrysis galbana (KMCC H-2)를 공급하여 M. mbrum과 비교하였다. 먹이생물의 실험농도는 /.
3). 특히 작은 크기 그룹에서 치패의 흡입력이 약해 M. 이 입수공으로부터 도피하는 것을 현미경으로 관찰하였다. 이러한 결과로 미루어볼 때, 각 장 0.
대상 데이터
두 번째 실험은 인공 종묘 생산된 바지락 치패를 대상으로 하였으며(Table 3), 100 ml PE 용기를 이용하여 작은 크기의 치 패(각 장 0.46±0.01 mm)는 30개체, 큰 크기의 치패(각 장 0.84 ±0.02 mm)는 20개체를 각각 수용하였다. 치패의 먹이생물은 이매패류 종묘생산 시 폭넓게 이용되는 Isochrysis galbana (KMCC H-2)를 공급하여 M.
본 연구에서는 서식 형태가 서로 다른 비단 가리비와 바지락을 대상으로 이들 이매패류가 섬모류인 M. mbrim을 섭식한다. 는 것을 직접 확인한 후, 두 종의 최대 섭식률을 측정하고, 인공 종묘 생산된 바지락 치패를 대상으로 살아있는 M.
첫 번째 실험에 사용된 비단 가리비와 바지락(Table 2)은 전 라북도 부안 연안의 패류 양식 어장에서 채집하여 실험실로 옮긴 후, 20 L 수조에서 각각의 실험조건으로 2일 동안 적응시켰다. 섭식 자인 비단 가리비와 바지락은 실험 시작 3시간 전에 1 L 플라스틱 용기에 2, 5, 10개체를 수용하여 순응시켰고, 대조구 로 섭식 자를 수용하지 않고 M.
성능/효과
5%로 비단 가리비에 비해 급격히 감소하였다. 4시간 후에 모든 실험 구에서 먹이생물인 M. rubrum°] 전혀 관찰되지 않았던 반면, 섭식 자가 없는 대조 구에서는 24시간 후 약 20% 만이 감소하였다.
rubrum 배양체인 MR-MAL01 (Table 1)을 이매패류 먹이생물로서의 활용 가능성을 실험하였다. 각 장 3 cm 전후의 비단 가리비와 바지 락(Table 2)을 각각 10개체 1尸로 수용하여 먹이생물로 M. rubrumi: 공급한 결과, 1시간 후 초기농도에 비해 비단가 리비 94.6%, 바지락 99.5%가 소비되어 이들 이매패류에 의해 매우 빠르게 섭식 되었음을 확인하였고(Fig. 1), 1시간 후 개체 당 최대 섭식률은 비단 가리비 9, 587 ceUs min1, 바지락 23, 172 cells miir'로 나타났다(Table 2).
각각의 실험 구에서 1시간 후에 감소된 먹이생물의 농도에서 대조 구의 감소된 먹이생물 농도를 뺀 최대 섭식률을 계산하면, 비단 가리비는 개체 당 9, 587 cells min 바지락은 개체 당 23, 172 cells mik로 나타났다(Table 2).
3A). 그러나 먹이생물인 M. rubrumfr 각각 다른 농도로 공급한 경우, 최종 성장은 가장 높은 농도로 공급한 실험 구(1x10, cells m「')에서 mm였고, 먹이생물의 농도가 증가할수록 성장이 증가하였다.
을 먹이생물로 공급하였으나 이들이 섭식하는 것을 관찰하지 못하였다. 그러나 자어의 입 크기가 작은 짱뚱어, Boleophthalmus pectinirostris와 동갈돗돔, Hapalogenys nitense M. rubrurne 섭식하는 것을 관찰하였다(unpublished). 따라서 입 크기가 작은 능성어, 전어, 쥐치 등의 종묘생산 시 rotifer, Brachionus plicatilis를 공급하기 전까지 물 만들기 (red water) 처 럼 M.
rubrum 세포를 확인하지 못했으나, 파괴된 세포로 생각되는 작은 입자들을 관찰하였다. 바지락 치패에 섬모류인 M. rubrumA 미소조류인 Isochrysis galbana (KMCC H-2)를 공급하면서 28일 동안 사육한 결과, 작은 치패 그룹(각 장 0.46 mm)에서는 I. galbana를 공급한 실험 구가 좋은 성장을 보였던 반면, 큰 치패 그룹(각 장 0.84 mm) 에서는 M. rub rum을 공급한 실험 구가 I. galbana를 공급한 실험 구에 비해 성장이 좋았다. 따라서 이 광합성 섬모 류는 이매패류의 치패 및 모패와 입이 작은 자어의 먹이생물, rotifer의 영양강화제 및 어류의 천연 착색제로도 활용할 수 있는 잠재력이 있어 해양 생물 공학적 활용을 위한 생물재료로서 개발 가능성을 제안한다.
바지락 치패의 최종 생존율을 보면(Table 3), 작은 치패 그룹에서 I. galbana를 공급한 실험 구가 가장 높은 93.3%를 보여 M. rubrume 공급한 실험 구에 비해 높게 나타났고, M. rubrum을 각각의 농도별로 공급한 실험 구에서는 먹이생물의 농도가 높을수록 높은 생존율을 나타냈다. 또한 큰 치패 그룹에서는 모든 실험 구에서 치패가 전량 생존하여 100%를 기록하였다.
바지락 치패의 크기를 2그룹(각 장 0.46±0.01 mm 와 0.84±0.02 mm)■으也로 나누어 I. galbanae- M. rubrnrrt을 각각 농도를 달리하여 성장을 비교한 실험어】서, 작은 크기 그룹(각 장 0.46+ 0.01 mm)에서는 I. galbana를 공급한 실험 구가 M. rubrum%: 공급한 실험 구보다 유의적으로 성장 및 생존율이 높았던 반면, 큰 크기의 그룹(각 장 0.84+ 0.02 mm)에서는 모든 실험 구에서 성장 차이가 없었으나, M. rubrum의 농도가 높을수록 성장이 좋은 것으로 나타났다(Fig. 3). 특히 작은 크기 그룹에서 치패의 흡입력이 약해 M.
바지락을 섭식 자로 사용한 실험에서(Fig. IB), 1시간 후의 먹 이농도 는 2개체 수용 구에서 83.9%, 5개체 수용 구에서 97.5%, 10개체 수용 구에서 99.5%로 비단 가리비에 비해 급격히 감소하였다. 4시간 후에 모든 실험 구에서 먹이생물인 M.
匕姑nww의 섭식에 의한 것으로 판단하였다. 본 연구에서 비단 가리비에 고밀도의 M. rubrum을 2시간 동안 공급한 후 해부하였을 때, 소화관이 붉게 변한 것은 확인하지 못하였으나 아가미에서 붉은색 입자를 발견할 수 있었고, 소화관 내용물 중 M. 의 색소체로 여겨지는 입자를 발견할 수 있어(Fig. 2), M. rubrurne 섭식한 것으로 결론지을 수 있었다. 이러한 결과는 Carver et al.
섭식 자로 비단 가리비를 사용한 실험에서(Fig. 1A), 1시간 후의 먹이 농도는 초기 농도에 비해 2개체 수용 구에서는 19.2%, 5개체 수용 구에서는 73.1%, 10개체 수용 구에서는 94.6%가 감소하였다. 처음의 먹이 농도가 5% 미만으로 줄었던 시간은 5개 체 및 10개체 수용 구에서 2시간이 경과된 후였고, 2개체 수용 구에서는 8시간 후였다.
배양하였다. 이 섬모류를 이용하여 이매패류의 섭식실험을 수행한 결과, 비단 가리비와 바지락과 같은 이매패류가 섬모류를 직접 섭식하였음을 확인하였는더】, 개체 당 최대 섭식률은 비단가 리비 9, 590 cells min-', 바지락 23, 200 cells miiM으로 나타났다. 또한 비단 가리비의 소화관에서 완전한 M.
이 입수공으로부터 도피하는 것을 현미경으로 관찰하였다. 이러한 결과로 미루어볼 때, 각 장 0.5 mm 이하의 바지락 치패는 M. rubrum%: 섭식하는데 제한을 받으며, 적어도 각 장 0.8 mm 이상의 치패는 섭식이 용이할 것으로 판단된다.
이러한 결과를 종합해 보면 M. rubrime 수온과 염분 변화에 매우 강한 종으로 판단되고, 본 연구에 이용된 M. rubrum MR- MAL01 straine 염분범위 10-30 ppt에서 잘 자라며, 이 중 10 ppt에서 가장 높은 생물량을 기록하였다(Myung, 2004). 또한 적조 발생 시 해수 단위 부피 당 일차생산량과 chlorophyll-a 값은 다른 해양 식물플랑크톤 종들에 비해 월등히 높은 것으로 알려져 있으므로(Lindholm, 1985; Crawford, 1989; Stoecker et al.
큰 크기의 치패 그룹(각 장 0.84 mm)에서는 M. mbrum을 가장 높은 농도(IxlO4 cells mF)로 공급한 실험 구에서 각 장 3.87 mm로 가장 좋은 성장을 보였고, 먹이생물의 농도가 감소할 수 록 성장이 낮았으며, I. galbana를 공급한 실험 구에서 각장3.47 mm로 가장 저조한 성장을 보였다(Fig. 3B). 그러나 모든 실험 구에서 최종 성장은 유의적인 차이가 없었다(尸>0.
후속연구
al, 1993) 매우 효과적일 것이므로 이에 대한 보충적인 연구가 요구된다. 또한 M. mbmm의 영양분석을 통해 rotifer의 영양강화 제(Merchie et al., 1995; Reitan et al., 1997)로 이용하거나, M. m阮"也 색소체의 색소 성분을 고려하여 송어류(Foss et al., 1984)와 잉어류(Matsuno et al., 1979)의 체색변화를 위한 새로운 착 색제로도 활용할 수 있음을 제안한다.
galbana를 공급한 실험 구에 비해 성장이 좋았다. 따라서 이 광합성 섬모 류는 이매패류의 치패 및 모패와 입이 작은 자어의 먹이생물, rotifer의 영양강화제 및 어류의 천연 착색제로도 활용할 수 있는 잠재력이 있어 해양 생물 공학적 활용을 위한 생물재료로서 개발 가능성을 제안한다.
따라서 이매패류 인공 종묘생산 시 적어도 1 mm 이하의 치 패 단계까지는 기존의 크기가 작은 I. galbana, P. lutheri, N. oculata 등을 공급하고, 그 이상의 크기에서는 M. rnbrum을 공급한다면 매우 효과적일 것으로 판단되므로, 기존의 이매패류 종묘생산을 위한 먹이 계열에 M. 城皿이 새로운 먹이생물로서 추가될 수 있을 것이다.
rubrurne 섭식하는 것을 관찰하였다(unpublished). 따라서 입 크기가 작은 능성어, 전어, 쥐치 등의 종묘생산 시 rotifer, Brachionus plicatilis를 공급하기 전까지 물 만들기 (red water) 처 럼 M. rubrumi: 이용한다면(Nass et al., 1992; Reitan et. al, 1993) 매우 효과적일 것이므로 이에 대한 보충적인 연구가 요구된다. 또한 M.
rub rum0] 어류 자치 어가 직접적으로 섭식할 수 있는 충분한 크기가 된다고 보고하였다. 본 연구진은 이전의 예비실험에서 넙치, Paralichthys olivaceuse\ 후기 久卜어와 대하, Penaeus chinensise} zoea 단계에 M. 을 먹이생물로 공급하였으나 이들이 섭식하는 것을 관찰하지 못하였다. 그러나 자어의 입 크기가 작은 짱뚱어, Boleophthalmus pectinirostris와 동갈돗돔, Hapalogenys nitense M.
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