DSS로 유도된 염증성 장 질환 동물 모델에서 황금 열수 추출물이 면역 조절 기능에 미치는 영향 Immunoregulatory Effects of Water Extracts of Scutellariae Radix in DSS-Induced Inflammatory Bowel Disease Animal Model원문보기
Scutellariae Radix (Scu.), one of the immune-regulatory substances, is recognized to play the role in the metabolic process of inflammation, allergy and immunity. It has been traditionally used in the Oriental medicine to treat inflammatory bowel diseases (IBD). The purpose of this study was to eval...
Scutellariae Radix (Scu.), one of the immune-regulatory substances, is recognized to play the role in the metabolic process of inflammation, allergy and immunity. It has been traditionally used in the Oriental medicine to treat inflammatory bowel diseases (IBD). The purpose of this study was to evaluate the effects of water extracts of Scutellariae Radix on the spleen lymphocyte immune function in the Balb/c female mice treated with dextran sodium sulfate (DSS) to induce colitis. Water extract of Scutellariae Radix (100 mg/kg) and sulfasalazine (50 mg/kg) were administrated orally for 2 weeks of experimental period. Mice were divided into three experimental groups randomly: DSS group (5% DSS was ad libitum for 5 days) as control group, DSS + Scu. (water extracts of Scutellariae Radix for 2 weeks after 5% DSS was ad libitum for 5 days) as experimental group, and DSS + Sulfasalazine group (Sulfasalazine for 2 weeks after 5% DSS was ad libitum for 5 days) as positive control group. Levels of Ig A, Ig E, CD4$^{+}$, CD8$^{+}$, TNF-$\alpha$ and other cytokines were measured. Treatment of DSS for 5 days induced bowel inflammation and the treatment with Scu. water exteract and sulfasalazine significantly recovered the damage. The length of intestine of DSS group was significantly shorter than that of other groups. The serum and fecal concentration of Ig A of SS + Scu group was higher than those of DSS group. The contents of CD4$^{+}$ T cells was higher in the DSS + Scu. group than the other groups and CD8$^{+}$ T cells was the lowest in DSS + Sulfasalazine group. The Ig A level of cultured supernatant of spleen lymphocyte was the highest, while the Ig E level was the lowest in SS + Scu group. The concentration of TNF-$\alpha$, cytokine secreted from the Th1 cell in the supernatant spleen lymphocyte, was the highest in the DSS group and the lowest in the DSS + Scu. group. The concentration of IFN-${\gamma}$ and ll...-12 was lower in the DSS + Scu. group than those of the other groups. The concentration of IL-4 in the supernatant of spleen lymphocyte was the lowest in the DSS + Scu. group but IL-10 was not significantly different. Based on these findings, water extract of Scutellariae Radix exhibited the inhibitory effect via IL-4 production thereby inhibited the production of Ig E and strengthened immune system, and alleviated injury in DSS- induced colitis mice model.
Scutellariae Radix (Scu.), one of the immune-regulatory substances, is recognized to play the role in the metabolic process of inflammation, allergy and immunity. It has been traditionally used in the Oriental medicine to treat inflammatory bowel diseases (IBD). The purpose of this study was to evaluate the effects of water extracts of Scutellariae Radix on the spleen lymphocyte immune function in the Balb/c female mice treated with dextran sodium sulfate (DSS) to induce colitis. Water extract of Scutellariae Radix (100 mg/kg) and sulfasalazine (50 mg/kg) were administrated orally for 2 weeks of experimental period. Mice were divided into three experimental groups randomly: DSS group (5% DSS was ad libitum for 5 days) as control group, DSS + Scu. (water extracts of Scutellariae Radix for 2 weeks after 5% DSS was ad libitum for 5 days) as experimental group, and DSS + Sulfasalazine group (Sulfasalazine for 2 weeks after 5% DSS was ad libitum for 5 days) as positive control group. Levels of Ig A, Ig E, CD4$^{+}$, CD8$^{+}$, TNF-$\alpha$ and other cytokines were measured. Treatment of DSS for 5 days induced bowel inflammation and the treatment with Scu. water exteract and sulfasalazine significantly recovered the damage. The length of intestine of DSS group was significantly shorter than that of other groups. The serum and fecal concentration of Ig A of SS + Scu group was higher than those of DSS group. The contents of CD4$^{+}$ T cells was higher in the DSS + Scu. group than the other groups and CD8$^{+}$ T cells was the lowest in DSS + Sulfasalazine group. The Ig A level of cultured supernatant of spleen lymphocyte was the highest, while the Ig E level was the lowest in SS + Scu group. The concentration of TNF-$\alpha$, cytokine secreted from the Th1 cell in the supernatant spleen lymphocyte, was the highest in the DSS group and the lowest in the DSS + Scu. group. The concentration of IFN-${\gamma}$ and ll...-12 was lower in the DSS + Scu. group than those of the other groups. The concentration of IL-4 in the supernatant of spleen lymphocyte was the lowest in the DSS + Scu. group but IL-10 was not significantly different. Based on these findings, water extract of Scutellariae Radix exhibited the inhibitory effect via IL-4 production thereby inhibited the production of Ig E and strengthened immune system, and alleviated injury in DSS- induced colitis mice model.
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문제 정의
본 연구에서는 염증성 장 질환 동물 모델을 확립하여, 비장 임파구 T 세포 집단을 분리한 후 황금 열수 추출물이 cytokdne과 immunoglobulin 농도에 미치는 영향을 조사 함으로써 황금의 항염증성 기능을 규명하고자 하였다.
가설 설정
2) 혈청과 분변 Ig A 농도는 DSS + Scu.군이 DSS 군에 비해 높게 나타났다.
5) 임파구의 배양액에서 TNF-a와 IFN-, 의 농도가 DSS + Sc”. 군에서 유의적으로 낮게 나타났으며, IL-12의 농도는 DSS + Sc“.
제안 방법
실험동물에서 분리한 비장과 장관 임파절에 Trizol reagent (Gibco 15596 - 026)를 첨가하여 RNA를 분리하고 spectrophotometer# 이용하여 정량하였다. 분리된 총 RNA로부터 cDNA 합성을 위해 total RNA 3 以1를 70℃에서 10분간 가열한 후 4℃에서 10분 동안 방치하고 여기에 1 “1 oligo (dT)i5 primer (0.5 jegA), 1 "1 M-MLV RT (10 unit/“1; promega, USA), 1 "1 RNase inhibitor (20~40 unit/z/1; promega, USA), 10 5X RT buffer (250 mM Tris-HCl, pH8.3, 375 mM KC1, 15 mM MgCl2), 5 //I 2.5 mmol/L dNTP mixture를 첨가한 후, diethylpyrocarbonate (DEPC) 증류수를 혼합하여 넣고, 42℃ water bath에서 1시간 동안 가열하여 cDNA를 합성하였다
10% FBS를 함유한 PBS 100 ml당 2 x 106 cell이 부 유된 비장 임파구에 CD4-FITC나 CD8-PE monoclonal antibody 5 “1를 첨가하고, 4 ℃ 에서 30분간 배양한 후 10% FBS가 함유된 PBS를 첨가하여 300 X g에서 5분씩 3번 원심분리하였다. 염색된 임파구는 2% paraformaldehyde로 고정시켰으며, Epics Altra™ flow cytometry (Beck- man Counter)로 측정하였다.
Anti-mouse cytokine의 항체를 coating 한 96 well pl- ate에 임파구의 배양 상층을 50 “1씩을 첨가하여, 2차 항체를 biotin화시킨 anti-cytokine의 항체를 반응시켰다. 1시간 동안 37℃에 방치한 후 기질 용액을 100 “1 첨가하고 다시 1시간 실온에 방치하였다.
군은 황금 열수 추출물 (100 ㎎/㎏BW) 을 2주간 경구투여하였다. DSS + Sulfasala- zine군은 양성 대조군 (positive control group)으로 치료 제 sulfasalazine (50 mg/k国BW) 을 2주간 경구투여하였다.
PCRe 3 “1 cDNA, primer는 IFN—儿 IL—2, IL—4, TNF—a를 사용하였고, sense primer (10 pmole/ n 1), antisense primer (10 pmole/〃D를 각각 1 “1가하고, 다시 1 //I 2.5 mmol/L dNTP, 3 //I 10X PCR buffer (100 mM Tris-HCl, pH 8.3, 500 mM KC1, 15 mM MgCb), 6 zzl 5X Qual-up™ 용액 및 0.3 #1 Tag polymerase (5unit/n 1; nerurotics inc)를 첨가한 다음 최종 부피가 30 “1가 되도록 증류수를 가하고, denaturatione 94℃에서 30초, annealinge 62℃에서 1분, extentione 72℃에서 1분 동안 35 cycle로 진행하였다. 실험에 사용한 murine IFN- 了, IL-2, 1L-4, TNF- a primer는 IFN- 7의 경우, 5, primer; 5' — TGC ATC TTG GCT TTG CAG CTC TTC CTC ATG GC-3' ; 3' primer; 5'- TGC ACC TGT GGG TTG TTG ACC TCA AAC TTG GC-3' 이고, fragment size는 365 bp였다.
1시간 동안 37℃에 방치한 후 기질 용액을 100 “1 첨가하고 다시 1시간 실온에 방치하였다. 각 단계마다 PBS에 0.05% Tween 20이 함유된 PBST로 세척하였으며 마지막으로,1.5% oxalic acid를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 동일한 과정을 통하여 purified cytokine을 표준으로 하여 비교 정량하였다.
일주일간 예비사육한 후 모든 동물에게 증류수에 DSS (5%, W/V)를 첨가하여 5일간 식수대용으로 자유공 급 시켜 m 급성 대장염을 유발시킨 후 DSS 군은 치료제를 투여하지 않았고, DSS + S彼. 군은 황금 열수 추출물 (100 ㎎/㎏BW) 을 2주간 경구투여하였다. DSS + Sulfasala- zine군은 양성 대조군 (positive control group)으로 치료 제 sulfasalazine (50 mg/k国BW) 을 2주간 경구투여하였다.
배양한 임파구 상층액의 Ig A와 Ig E 함량은 sandwich ELISA 방법을 이용하여 측정하였다"I" 총 항체 양의 측정으로는 항체의 F (ab)? 단편을, 항원 특이적 정량법으로 항원을 ELISA plate에 고정한 다음 배양 상층 (supernatant) 을 반응시켰다. 항체는 ELISA plate 표면에 비특이적으로 결합하는 경향이 있기 때문에, 고정항체로 고정시킨 후 고정항체에 결합한 항체에 표식 항체를 결합시켜 발색 시 켰다.
5% oxalic acid를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 동일한 과정을 통하여 purified cytokine을 표준으로 하여 비교 정량하였다.“3闵
,e)까지의 부위를 절단하여 장 길이를 측정하고 모양, 두께 등의 상태를 육안으로 확인하였다. 또한 비장과 장관 임파절 (mesenteric lymph node, MLN)을 적출한 후 IFN- r > IL—2, IL-4, TNF—q의 mRNA 발현을 조사하였다.
동양에서는 염증성 장 질환 환자에게 독성이 적고 식품 성분의 주원료로 사용 가능하며 소염, 항알러지 작용, 항산 화 작용 및 진정 작용 등을 지닌 황금을 처방하고 있으나 황금이 면역 기전에 미치는 영향에 대한 연구는 매우 미비한 실정이다. 본 연구에서는 면역실험에서 주로 이용되는 4주령의 Balb/c female mice를 사용하여 5% DSS를 5일간 섭취 시켜 급성 대장염을 유발시킨 후 2주간 황금 열수 추출물 (100 mg/Mg) 과 sulfasalazine (50 ㎎/㎏)을 경구 투여한 후 면역조절 기능에 미치는 영향을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1 g/ml)에 부유시켰다. 부유시킨 분변 pellete vortex로 균질화하여 15,000 X g에서 10분간 원심분리한 후 상층 액을 채취하여 IgA 항체를 이용하여 측정하였다.
실험군은 난괴 법에 의해 모두 6마리씩 3군 (DSS군, DSS + Scu. 군, DSS + Sulfasalazine 군)으로 나누어 실험하였다. 일주일간 예비사육한 후 모든 동물에게 증류수에 DSS (5%, W/V)를 첨가하여 5일간 식수대용으로 자유공 급 시켜 m 급성 대장염을 유발시킨 후 DSS 군은 치료제를 투여하지 않았고, DSS + S彼.
10% FBS를 함유한 PBS 100 ml당 2 x 106 cell이 부 유된 비장 임파구에 CD4-FITC나 CD8-PE monoclonal antibody 5 “1를 첨가하고, 4 ℃ 에서 30분간 배양한 후 10% FBS가 함유된 PBS를 첨가하여 300 X g에서 5분씩 3번 원심분리하였다. 염색된 임파구는 2% paraformaldehyde로 고정시켰으며, Epics Altra™ flow cytometry (Beck- man Counter)로 측정하였다.
염증성 장 질환 동물모델을 확인하기 위하여 실험동물을 경추 탈골로 희생 시켜 유문 괄약근 (pyloric sphincter)부터 회맹판 (ileocecal val.,e)까지의 부위를 절단하여 장 길이를 측정하고 모양, 두께 등의 상태를 육안으로 확인하였다. 또한 비장과 장관 임파절 (mesenteric lymph node, MLN)을 적출한 후 IFN- r > IL—2, IL-4, TNF—q의 mRNA 발현을 조사하였다.
군, DSS + Sulfasalazine 군)으로 나누어 실험하였다. 일주일간 예비사육한 후 모든 동물에게 증류수에 DSS (5%, W/V)를 첨가하여 5일간 식수대용으로 자유공 급 시켜 m 급성 대장염을 유발시킨 후 DSS 군은 치료제를 투여하지 않았고, DSS + S彼. 군은 황금 열수 추출물 (100 ㎎/㎏BW) 을 2주간 경구투여하였다.
대상 데이터
4주령의 Balb/c female을 Samtaco Bio Korea (Osan, Korea)로부티 구입하여, 1주일간 일반 배합사료와 물을 충분히 공급하면서 이상적인 항온항습 환경 (22 ± 2℃, 55 ± 5%)으로 유지하고 12시간씩 밤과 낮을 자동 조절하여 적응시켰다. 실험 기간 동안 식이는 AIN-93G 식이軌 를 섭취시켰고 (Table 1), 식수는 자유 공급 시켰다.
(Ontario, Canada)에서 구입하였다. Ig A와 관련된 항체는 Zymed Laboratory Inc. (San Francisco, CA, U.S.A)에서 구입하였으며, Ig E와 관련된 항체들은 Biosource International (Comarillo, CA, U.S.A)에서 구입 하였다. 기타 시약은 Sigma (St.
황금 성분의 하나인 baicaleine 다른 flavonoid 성분에 비해 DSS에 의해 유도된 대장염 동물모델에서 염증 증상을 가장 많이 완화시켰고, baicalein (20 mg/Mg)의 항염증 효과는 sulfasalazine (50 mg/Mg)의 효능과 유사한 것으로 보고되었다.细 이와 같이 황금의 성분 중 baicalein이 현재 사용되고 있는 염증성 장 질환 치료제인 sulfasalazine과 유사한 치료 효과를 나타낸다는 점과 황금을 임상에 적용할 경우, 단일 활성 성분이 아닌 황금 열수 추출물로 처방된다는 점 등을 고려하여 염증성 장 질환의 치료 대체제로 써 황금의 열수 추출물을 본 실험에 사용하였다.
A)에서 구입하였다. 단일항체와 cytokinee ID Labs Inc. (Ontario, Canada)에서 구입하였다. Ig A와 관련된 항체는 Zymed Laboratory Inc.
본 실험에 사용된 시약 중 dextran sodium sulfate (DSS)와 concanavalin A (Con A)는 Sigma (St. Louis, MO,U.S.A)에서 구입하였다. 단일항체와 cytokinee ID Labs Inc.
3 #1 Tag polymerase (5unit/n 1; nerurotics inc)를 첨가한 다음 최종 부피가 30 “1가 되도록 증류수를 가하고, denaturatione 94℃에서 30초, annealinge 62℃에서 1분, extentione 72℃에서 1분 동안 35 cycle로 진행하였다. 실험에 사용한 murine IFN- 了, IL-2, 1L-4, TNF- a primer는 IFN- 7의 경우, 5, primer; 5' — TGC ATC TTG GCT TTG CAG CTC TTC CTC ATG GC-3' ; 3' primer; 5'- TGC ACC TGT GGG TTG TTG ACC TCA AAC TTG GC-3' 이고, fragment size는 365 bp였다. IL-2 primer는 5' primer; 5'-AAC AGC GCA CCC ACT TCA A- 3' ; primer; 5' -TTG AGA TGA TGC TTT GAC A-3'이고, fragment size는 391 bp였匸k IL-4의 primere primer; 5' -GTC TGC TGT GGC ATA TTC TG-3' ; 3'primer; 5' -GGC ATT TCT CAT TCA GAT TC-3' 이고 fragment size는 357 bp였다.
황금은 전라남도 영암에 위치한 천수당 한약방에서 여수산 황금을 구입하였다. 황금 뿌리 100 g을 절편 하여 round flask에 넣고 20배 (2 L)의 증류수를 가한 후 120 ℃ 에서 2시간 동안 진탕기 (Misung Scientific Co, Korea)로 열수 추출한 후 이 과정을 2회 반복하여 rotary vacuum evaporator (Eyela, Japan)를 사용하여 감압농축 하였다.
데이터처리
0) program을 이용하여 분석하였으며, 그 결과는 평균 (mean) 士 표준오차 (standard error, SE)로 표시하였다. 각 실험군의 평균의 차이는 one-way AN0VA를 사용하여 0.05 수준에서 유의성을 검증하였다.
모든 실험 결과는 Statistics Analysis System (SAS, Ver 8.0) program을 이용하여 분석하였으며, 그 결과는 평균 (mean) 士 표준오차 (standard error, SE)로 표시하였다. 각 실험군의 평균의 차이는 one-way AN0VA를 사용하여 0.
이론/모형
배양한 임파구 상층액의 Ig A와 Ig E 함량은 sandwich ELISA 방법을 이용하여 측정하였다"I" 총 항체 양의 측정으로는 항체의 F (ab)? 단편을, 항원 특이적 정량법으로 항원을 ELISA plate에 고정한 다음 배양 상층 (supernatant) 을 반응시켰다. 항체는 ELISA plate 표면에 비특이적으로 결합하는 경향이 있기 때문에, 고정항체로 고정시킨 후 고정항체에 결합한 항체에 표식 항체를 결합시켜 발색 시 켰다.
항체는 ELISA plate 표면에 비특이적으로 결합하는 경향이 있기 때문에, 고정항체로 고정시킨 후 고정항체에 결합한 항체에 표식 항체를 결합시켜 발색 시 켰다. Ig A는 직접법으로 쉽게 정량 할 수 있었으나, Ig E 는 검출 감도가 낮아 avidin-biotin 방법을 사용하여 ELISA 법으로 검출하였다. 이 방법은 biotin 표식 항체에 avidin 표식 항체를 결합시키는 방법이므로 검출 감도를 높일 수 있었다.
실험 종료 시 각 군의 혈액 및 분변을 채취하여 분변은 분석 전까지 -80℃에 저장하였다. 혈액은 실험동물의 안 와 동맥으로부터 채취하여 3000 X g, 4℃에서 30분간 원심분리한 후 얻어진 혈청을 sandwich ELISA 방법을 이용하여 Ig A 농도를 측정하였다. 분변은 Fukushima et al.
성능/효과
1) DSS를 섭취시킨 결과 장내 염증으로 인한 협착, 누 공 등이 유발하여 장 길이가 감소하였고, DSS + Sc“. 군과 DSS + SuEasalazine 군에서는 증상과 장 길이가 회복되었다.
4) 임파구의 배양액에서 Ig A 농도는 DSS 군에서 유의적으로 낮았고, , DSS + Sc”. 군에서 높게 나타났다.
각 실험군의 평균 체중은 DSS 섭취 7일 후부터 감소하였으며, 식이 섭취량은 염증을 유발 시킨 후 7일째까지 모든 군에서 감소하였고 그 이후부터 점차 중가하였다. 그러나 식이 섭취량이 감소하는 기간동안에도 체중의 변화는 나타나지 않았다.
3 “g/ml로 DSS + Scu. 군, DSS + Sulfas- alazine군에서 유의적으로 높게 나타났다. 또한, 분변 중의 Ig A 농도 역시 DSS군, DSS + Scm.
3 “g/ml로 DSS + Scu. 군, DSS + Sulfas- alazine군에서 유의적으로 높게 나타났다. 또한, 분변 중의 Ig A 농도 역시 DSS군, DSS + Scm.
DSS + Scu. 군, DSS + Sulfasalazine 군에서 유의적으로 높게 나타났다.
8 cm, DSS + Sch. 군은 39.0 ± 1.6 cm, DSS + Sulfasalazine 군은 38.5 ±1.4 cm로 황금 열수 추출물을 섭취한 DSS + 군과 염 증치료 약물 sulfasalazine을 섭취한 군에서 DSS만을 섭취한 군보다 유의적으로 장 길이가 길었다. 이는 DSS 섭취로 유발된 염증으로 인한 장 상태가 황금 열수 추출물과 치료제 sulfasalazine에 의해 호전된 결과로 사료된다.
혈액과 임파구 배양액에서 Ig A 농도를 종합해 보면, DSS + Sc“. 군이 DSS 군에 비해 혈액 및 임파구 배 양액 모두에서 Ig A 농도가 높게 나타났는데 이와 같은 결과는 황금이 DSS로 유발시킨 대장염 동물 모델에서 혈중 Ig A 농도와 비장 임파구 배양 상충의 Ig A 농도를 증가시킴으로 항염증 기전에 작용한 것으로 사료된다. 그러나 이러한 황금의 항염증 효과는 치료제로 널리 쓰이는 sulfasalazine 항염증 기전과는 상이한 것으로 사료된다.
이는 황금 열수 추출물을 섭취시킨 군은 세포 내 단백질 수준에서의 STAT 6의 전사 활동을 저해함으로써 세포 외로 분비되는 IL-4 생성을 저해하여 알러지 증상을 유발시키는 Ig E의 생성을 억제한 것으로 추정할 수 있다. 따라서 황금 열수 추출물은 IL-10의 농도에는 영향을 미치지 못하였 으나 IL-4 농도를 낮춤으로써 Th 2 cell의 기능이 항진되어 IL-4 생성량의 증가로 인해 유발된 염증성 장 질환의 증상을 개선시키는 기전에 관여하는 것으로 사료된다.
실험동물의 장 상태와 길이를 조사한 결과 DSS를 섭취시킨 mice의 경우, DSS를 섭취시키지 않은 mice에 비해 소장 및 대장의 모양이 흐트러져 있었으며, 장의 두께도 일정하지 않고, 윤기가 없는 것을 육안으로 확인할 수 있었다. 또한 장의 길이도 DSS를 섭취시킨 군이 DSS를 섭취시키지 않은 군보다 짧게 나타났으며, 염증으로 인한 협착 및 누공이 발생하여 장 전체가 붉게 부풀어 있었다 (Fig.
이상의 결과를 종합하면, 황금 열수 추출물은 비장 임파 구에서 Ig A와 Ig E 생성을 조절함으로써 T helper cell에 의해 유발된 면역반응을 조절하고 DSS로 유발된 대장염의 과민반응을 완화시킬 수 있었다. 즉, Ig A 생성을 촉진하고 염증 관련 cytokine인 IL-4 생성을 저해함으로써 Ig E 생성을 억제하여 면역시스템을 강화시키고, 손상된 염증을 완화시키는 것으로 사료된다.
2). 이와 같은 결과를 통하여 5일간 5% DSS (W/V)의 섭취는 소장 및 대장의 염증을 유발시킬 뿐만 아니라 장의 길이도 감소시켰으며, 염증 관련 cytokine의 생성을 증가시켜 염증성 장 질환 동물모델을 확립하는데 유효함을 확인할 수 있었다.
이상의 결과를 종합하면, 황금 열수 추출물은 비장 임파 구에서 Ig A와 Ig E 생성을 조절함으로써 T helper cell에 의해 유발된 면역반응을 조절하고 DSS로 유발된 대장염의 과민반응을 완화시킬 수 있었다. 즉, Ig A 생성을 촉진하고 염증 관련 cytokine인 IL-4 생성을 저해함으로써 Ig E 생성을 억제하여 면역시스템을 강화시키고, 손상된 염증을 완화시키는 것으로 사료된다.
1). 한편, 비장 및 장관 임파절에서 IL-4 및 TNF- a와 같은 염증 관련 cytokine의 발현을 즉정한 결과 DSS를 섭취시킨 군에서 섭취시키지 않은 군보다 높게 나타났다 (Fig. 2). 이와 같은 결과를 통하여 5일간 5% DSS (W/V)의 섭취는 소장 및 대장의 염증을 유발시킬 뿐만 아니라 장의 길이도 감소시켰으며, 염증 관련 cytokine의 생성을 증가시켜 염증성 장 질환 동물모델을 확립하는데 유효함을 확인할 수 있었다.
황금 열수 추출물이 비장 임파구의 T세포 집단에 미치는 영향을 측정해 본 결과 DSS 군의 CD4+ T cell의 함량이 33.1 ± 0.8%, DSS + 군이 34.7 ± 0.4%, DSS + Sulfasalazine 군이 31.2 ±0.5%로 DSS + Sc“. 군에서 가장 높게 나타났다(P < 0.
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