운동 사육구와 비운동 사육구에서의 참돔육에 대한 ATP관련 화합물의 변화를 살펴보면 운동 사육구에서는 ATP함량이 약간의 감소를 보이지만 ADP함량은 ATP의 소모만큼 약간의 증가를 보이고 있었다. 반면, 비운동 사육구에서 운동 사육구와 대초적으로 기간이 길어짐에 따라 ATP함량이 큰 변화를 보이고 있지 않았다. AEC수치는 운동 사육구에서 0.88$\pm$0.04으로 나타났고 비운동 사육구에서는 0.89$\pm$0.02으로 나타났으며 외관상으로 참돔의 건강상태는 양호하였다. 참돔의 근원섬유에 있어서 $Mg^{2+}$(+Ca$^{2+}$)-Arpase 활성의 변화는 운동 사육구의 Arpase 활성이 증가하여 운동 20일에는 0.42$\mu$mo1 Pi/min$.$mg의 함량을 나타내었으나, 비운동 사육구에서는 큰 차이를 보이지 않고 있다. $Mg^{2+}$(+Ca$^{2+}$)-ATPase활성은 운동시키 전에는 각각 0.10 $\mu$mol Pi/min$.$mg, 0.14 $\mu$mol Pi/min$.$mg으로 나타나 비운동 사육구가 운동 사육구에 비하여 높았으며 사육기간 동안 활성이 서서히 감소하는 경향을 나타내었다. $Ca^{2+}$-ATPase 활성 또한 사육기간 동안 큰 변화를 보이지 않았다. 운동 횟수에 따른 차이에서는 1회/일 운동시켰을 때에는 ATP관련 화합물의 함량은 2회/일 운동시킨 것과 비슷한 수준이었으며 운동휫수에 따른 ARC수치의 큰 변화는 나타나지 않았다.
운동 사육구와 비운동 사육구에서의 참돔육에 대한 ATP관련 화합물의 변화를 살펴보면 운동 사육구에서는 ATP함량이 약간의 감소를 보이지만 ADP함량은 ATP의 소모만큼 약간의 증가를 보이고 있었다. 반면, 비운동 사육구에서 운동 사육구와 대초적으로 기간이 길어짐에 따라 ATP함량이 큰 변화를 보이고 있지 않았다. AEC수치는 운동 사육구에서 0.88$\pm$0.04으로 나타났고 비운동 사육구에서는 0.89$\pm$0.02으로 나타났으며 외관상으로 참돔의 건강상태는 양호하였다. 참돔의 근원섬유에 있어서 $Mg^{2+}$(+Ca$^{2+}$)-Arpase 활성의 변화는 운동 사육구의 Arpase 활성이 증가하여 운동 20일에는 0.42$\mu$mo1 Pi/min$.$mg의 함량을 나타내었으나, 비운동 사육구에서는 큰 차이를 보이지 않고 있다. $Mg^{2+}$(+Ca$^{2+}$)-ATPase활성은 운동시키 전에는 각각 0.10 $\mu$mol Pi/min$.$mg, 0.14 $\mu$mol Pi/min$.$mg으로 나타나 비운동 사육구가 운동 사육구에 비하여 높았으며 사육기간 동안 활성이 서서히 감소하는 경향을 나타내었다. $Ca^{2+}$-ATPase 활성 또한 사육기간 동안 큰 변화를 보이지 않았다. 운동 횟수에 따른 차이에서는 1회/일 운동시켰을 때에는 ATP관련 화합물의 함량은 2회/일 운동시킨 것과 비슷한 수준이었으며 운동휫수에 따른 ARC수치의 큰 변화는 나타나지 않았다.
Chemoenzymatic method was used in this study to evaluate the quality of cultured red seabrim. Level of ATP related compounds, ATPase and Adenylate energy charge (AEC) well reflected changes in condition of fish. ATP level in the muscle of exercised cultured red seabream was decreased significantly d...
Chemoenzymatic method was used in this study to evaluate the quality of cultured red seabrim. Level of ATP related compounds, ATPase and Adenylate energy charge (AEC) well reflected changes in condition of fish. ATP level in the muscle of exercised cultured red seabream was decreased significantly during cultured period. In contrast, the level of ADP in the muscle was increased during the period. Level of ATP related compounds in the muscle of cultured red seabream without exercise didn't show significant difference compared to the exercised group. AEC value in muscle of cultured red seabream without exercise was 0.89$\pm$0.02, while AEC value of the exercised group was 0.88$\pm$0.04. ATP and AEC levels among different size of fish did not show any significant difference. AEC value in all sample was higher than 0.8, indicating that the condition of cultured fish was healthy. Activity of Mg2$^{+}$ (+Ca2$^{+}$), Mg2$^{+}$ (-Ca2$^{+}$) and Ca2$^{+}$-ATPase during culture period did not change significantly, regardless of exercise. Therefore, the AEC appears to have some validity as fish health indicator.
Chemoenzymatic method was used in this study to evaluate the quality of cultured red seabrim. Level of ATP related compounds, ATPase and Adenylate energy charge (AEC) well reflected changes in condition of fish. ATP level in the muscle of exercised cultured red seabream was decreased significantly during cultured period. In contrast, the level of ADP in the muscle was increased during the period. Level of ATP related compounds in the muscle of cultured red seabream without exercise didn't show significant difference compared to the exercised group. AEC value in muscle of cultured red seabream without exercise was 0.89$\pm$0.02, while AEC value of the exercised group was 0.88$\pm$0.04. ATP and AEC levels among different size of fish did not show any significant difference. AEC value in all sample was higher than 0.8, indicating that the condition of cultured fish was healthy. Activity of Mg2$^{+}$ (+Ca2$^{+}$), Mg2$^{+}$ (-Ca2$^{+}$) and Ca2$^{+}$-ATPase during culture period did not change significantly, regardless of exercise. Therefore, the AEC appears to have some validity as fish health indicator.
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문제 정의
고통 박은 어류가 즉살된 어류에 비교하여 분해가 빨리 일어나고 절셔이나 운동시킨 피로어는 죽은 직후에도 ATP는 극히 적고 幣가 많은 것을 볼 수 있다. 따라서 New AEC는 이런 점을 보완하여 AEC 계산에 IMP 함량을 포함하여 계산함으러써 건착도 측정에서 정확성을 높이려고 하였다.
본 연구에서는 운동 유무, 횟수 그리고 어체 크기에 대한 양식산 어종의 품질판정을 위한 지표를 검색하기 위하여 효소화하적 방법 즉, ATP 관련 화합물, ATPase 활성 (Okata 하 al., 1986) 그리고 양^산 활어의 건강한 상태와 칼슘의 노출, 염도의 감소, 산소의 부족, 궁핍 등과 같은 스트레스를 받은 상태를 판단하는 adenylate energy charge (AEC) 수치를 이용하여 활어의 건강도 측정을 위한 지표로써 활용하고자 조사하였다.
제안 방법
25 mM CaCl?의 반응액으로 측정하였다. Ca2+- ATPase 활성은 25 mM Tris-maleate (pH 7.0), 2 mM ATP 및 0.5 mg myofibril/mle) 각각 5 mM CaCI2 및 0.05 M KC1 을 첨가한 반응2에서 측정하였다. ATP를 가하여 2분간 반응시킨 후, 15% TCA i ml를 가하여 반응을 정지시켰다.
활어를 구입하였다. 제작된 수조에서 안정화시키고 20灯 의 해수를 하루에 1℃씩 단계적으로 수온을 조절하여 최종 수 §을 rrc로 하였다. 각 수조의 유속은 5 m/s으로 하였으며 운 S조건으로 1일 1회(09:00~15:00)는 6시간으로 설정하였고 1일 !)(09:00-12:00, 14:00~17:00)는 오전, 오후에 각 3시간씩 운동시켰다.
(2000)의 방법에 의거, 실험어를 즉살하여 근육을 절취한 다음, perchloric acid로 nucleotides를 추출하였다. 추출된 nucleotides는 ATP 관련 화합물의 분석 조건을 이용하여 HPLC 로 분석 후, 아래의 식을 이용하여 AEC 수치를 계산하였다.
활성 , AEC 수치를 이용한 효소 . 화학적 지표를 검색하였다. ATP 관련 화합물의 함량은 사육기간 동안에 거의 변화를 보이지 않았으며 운동 사육구의 ATP 함량은 약간의 감소를 보이지만 유의적 차이를 보이지 않았다.
대상 데이터
각 수조의 유속은 5 m/s으로 하였으며 운 S조건으로 1일 1회(09:00~15:00)는 6시간으로 설정하였고 1일 !)(09:00-12:00, 14:00~17:00)는 오전, 오후에 각 3시간씩 운동시켰다. 각각의 조건에 따라 운동시킨 후 각 수조에서 3마리릌 임의로 채취하여 benzocaine (ethyl p-aminobenzoate)으로 分취 후에 즉살(두부의 급소를 강타)시켜 방혈 후 아이스 박스에 담아서 실험실로 운반하여 실험용 시료로 사용하였다. 실험 기간 동안 사료에 대한 영향을 배제하기 위하여 절식시켰으며, 실험에 사용된 참돔의 크기는 Table 1에 나타내었다.
동해안 지역의 민간 양^장에서 10개월 정도 양식한 참돔, Pagrus major을 부산광역시 소재의 계류장에 운반된 지 5일 이내의 활어를 구입하였다. 제작된 수조에서 안정화시키고 20灯 의 해수를 하루에 1℃씩 단계적으로 수온을 조절하여 최종 수 §을 rrc로 하였다.
데이터처리
실험의 측정결과를 SAS (Statistical Analysis System) 통계프로그램을 이용하여 측정치에 대한 평균 및 표준편차를 구하였으며 차이검정은 Duncan의 다중비교(Duncan's multiple range test)로 P<0.05에서 결과간의 유의성을 검정하였다.
이론/모형
, AIP 관련 화합물의 측정은 Iwamoto et al. (1987)의 방법에 浦라 시료를 추출한 다음 여과(0.20 μm membrane filter) 및 탈기한 후 HPLC (Waters 600, USA)에 주입하였다. Column 이동상으로는 0.
Thebault et al. (2000)의 방법에 의거, 실험어를 즉살하여 근육을 절취한 다음, perchloric acid로 nucleotides를 추출하였다. 추출된 nucleotides는 ATP 관련 화합물의 분석 조건을 이용하여 HPLC 로 분석 후, 아래의 식을 이용하여 AEC 수치를 계산하였다.
ATP를 가하여 2분간 반응시킨 후, 15% TCA i ml를 가하여 반응을 정지시켰다. 유리된 r 무기 인산은 Fiske and Subbarow (1925)의 방법에 따라 측정하고 ATPase 활성으로 환산하였다.
성능/효과
이와 같이 IMP가 축적되는 것은 AMP를 탈아미노 화 하여 IMP로 만드는 adenylic acid deaminase의 활성이 큰데 비하여, IMP를 탈인산화하여 inosine으로 분해하는 inosinic acid phosphatase의 작용이 상대적 미약하기 때문이다 . AEC 계산에 IMP 함량을 포함하여 New AEC 수치의 적용 가능성을 살펴보았으나, 본 연구에서는 살아있는 활어를 즉살하여 신속하게 ATP 관련 화합물을 측정하였으므로, ATP 관련 화합물이 IMP까지 분해가 이루어지지 않아서 New AEC 와 AEC 수치가 큰 차이를 보이지 않고 있었다.
48 gmol/g 으로 나타났다(Table 3). AEC 수치는 평균적으로 운동 사육 구에서 0.88±0.04, 비운동 사육구에서 0.89±0.02으로 나타났으며 New AEC 수치는 AEC 수치와 비슷하게 나타났다(Table 2, 3).
화학적 지표를 검색하였다. ATP 관련 화합물의 함량은 사육기간 동안에 거의 변화를 보이지 않았으며 운동 사육구의 ATP 함량은 약간의 감소를 보이지만 유의적 차이를 보이지 않았다. 이는 ATP의 농도를 항상 일정하게 유지하도록 근육 세포 내의 대사계가 특수화되어있기 때문에 단시간의 운동에 의하여 소비된 ATP는 creatine phosphate가 creatine kinase에 의하여 ADP와 반응하여 ATP가 재생되는 경로와 adenylate kinase라는 효소에 의하여 2분자의 ADP로부甘 1분자의 ATP가 재생되는 반응 경로로 재생되었기 때문이다.
14 gmol Pi/min . mg 로비 운동 사육구가 운동 사육구에 비하여 Mg2+(-Ca2+)-ATPase 활성이 높았으며 사육기간 동안 활성이 서서히 감소하는 경향을 나타내었지만 운동 사육구에서는 큰 차이를 보이지 않았다. 한편, Ca2+-ATPase 활성은 운동 사육구와 비운동 사육구에서 사육 기간 동안 큰 변화를 보이지 않았다(Fig.
14 gmol Pi/min . mg으로 나타나 비 운동 사육 구가 운동 사육구에 비하여 높았으며 사육기간 동안 활성이 서서히 감소하는 경향을 나타내었다. CaMATPase 활성 또한 사육 기간 동안 큰 변화를 보이지 않았다.
36pmole/g 으로 나타났다. 반면에 ADP 함량은 0.7~0.9kg의 크기를 가진 참돔에서는 1.08±0.14|imole/g, L0~L2kg에서는 1.11 ±0.13 好mole/g, 1.5-1.7 kg에서는 0.76±0.25 |imole/g으로 나타났으며어체 크기에 따른 ATP 관련화합물의 변화는 거의 없었으며 , 평균적인 AEC 수치는 0.90±0.02으로 나타났다(Table 6).
7일 때는 부분적인 스트레스가 있는 환경으로 성장이 제한되고 생식이 없고 성장 비율이 낮거나 거의 성장하지 않는다고 하였다. 본 연구에서 건강 상태가 양호하고 외관상으로 표피, 안구가 뚜렷한 운동 사육 구에서 평균적으로 AEC 수치는 0.88±0.04으로 나타났고 비운동 사육 구에서는 0.89±0.02으로 나타났다. 하지만 운동 사육구에서 15 일째의 참돔 1마리가 상피세포의 박리와 염증이 나타났으며 이때의 AEC 수치는 0.
운동 횟수에 따른 차이에서는 1회/일 운동시켰을 때에는 ATP 관련 화합물의 함량은 2회/일 운동시킨 것과 비슷한 수준이었으며 운동횟수에 따른 AEC 수치의 큰 변화는 나타나지 않았다. 어체 크기에 따른 ATP 함량은 어체의 크기에 따른 차이가 거의 없었으며, 크기에 따른 AEC 수치의 변화 또한 큰 차이가 나타나지 않았다.
운동 사육구와 비운동 사육구에서 ATP 관련 화합물의 변화를 보면, 운동 0일차의 ATP 함량은 8.79±0.50 umol/g이었지만 15일차에는 6.35±2.48 卜血01値로 운동기간에 따라 ATP 함량은 약간의 감소를 보이면서 20일차에는 ATP 함량이 7.76± 0.45 Rmol/g으로 나타났다. 또한 운동 0일차의 ADP 함량은 0.
운동 사육구와 비운동 사육구에서의 참돔육에 대한 ATP 관련 화합물의 변화를 살펴보면 운동 사육구에서는 ATP 함량이 약간의 감소를 보이지만 ADP 함량은 ATP의 소모만큼 약간의 증가를 보이고 있었다. 반면, 비운동 사육구에서 운동 사육 구와 대조적으로 기간이 길어짐에 따라 ATP 함량이 큰 변화를 보이고 있지 않았다.
74로 나타났다. 운동 횟수에 따른 비교에서 , 1회/일 운동 사육구 10일째의 참돔 1마리와 2회/일 운동 사육구 15일째의 참돔 2마리에서 상피세포의 박리와 염증 및 안구의 백탁 현상이 나타났다. 이때 1회/일 운동 사육구의 AEC 수치는 0.
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