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문제 정의
- 본 연구에서는 콩으로부터 식 이성 섬유를 제조하고 이로뷰터 간편한 방법으로 얻은 헤미셀룰로즈를 시료로 사용하여 당뇨유발전과 유발후의 쥐 혈당과 혈청콜레스테롤 함량에 미치는 영향을 조사함으로서 콩의 이용성 증대를 위한 기초자료를 마련코자 하였다.
가설 설정
- 3)The ratio of HDL-cholesterol/total cholesterol.
제안 방법
- 같은 시간에 측정하였다. 7주간 사육이 끝난 실험동물은해 부하기 전에 15시 간동안 사료공급을 중단한 후 ether로 마취 시 킨 후 항응고제 (heparin)를 함유하는 5 mL 주사기 로 복부대동맥에서 채혈하여 4℃, 3000rpm으로 10분간 원심분리하여 혈청을 얻었으며 -70℃에 두면서 분석용 재료로 사용하였다. 분뇨는 7주간 사육이 끝난 다음날 24시 간동안 수집하였으며 뇨의 경우는 원심분리하여 이 물질을 제거하여 중량과 부피 를 각각 측정하였다.
- 2 mg/mL 농도로 복강에 주사하였으며 그 후 1주간 사육하였다. STZ 투여 후 1 ~2일에 뇨당올 분석하였으며 공복시 꼬리정 맥으로부터 취한 혈액의 혈당농도가 200mg/dL 이상일 경우에 당뇨로 간주하였다.
- , Korea)을, mineral 및 vitamin mixture 는 AIN-76(Teklad, USA)에 따라 조합하였다. 기본식이는 탄수화물 : 단백질 : 지질의 비를 60: 20: 15로 조정하였으며, 헤 미 셀룰로즈 식 이는 1군은 0.5%, H-2군은 1%를 첨 가하여 Table 1과 같이 식이를 조제하였다.
- 즉, 콩 식 이 섬 유 100 g 에 5%의 소금물 1 L를 가하여 Polytron homogenizer(Homomixer Mark II F, TK, Japan)로 20분간 균질화한 후 10, 000 rpm으로 10분간 원심분리 하여 잔사를 얻었으며 , 잔사는 다시 동일용매 1 L씩으로 3회 세 척 하여 단백질을 제거하였다. 다음에 1 L의 증류수와 80% 알코올 순서로 각각 3회 반복 세척한 후 Whatman No 50 여과지로 감압여과하여 알코올 불용성 물질(AIS: alcohol insoluble substance) 을 얻었다. AIS는 1 L씩의 증류수로 3회 세척한 후 원심분리하여 탈수시켰으며, 여기에 500 mL의 1 N KOH 용액으로 추출하는 조작을 3회 반복하여 알칼리 가용성 헤 미 셀룰로즈를 추출하였으며 진한 염산으로 pH 40으로 조정하여 침전물을 얻었다.
- 대조군, H-1 및 H-2 식이군으로 나누어 6주간 사육한 쥐는 체중별로 나눈 후 streptozotocin(STZ, Sigma Chem. Co. MO, USA)을 0.01 M citrate buffer(pH 4.2)에 녹여 체중 250 g 당 37.2 mg/mL 농도로 복강에 주사하였으며 그 후 1주간 사육하였다. STZ 투여 후 1 ~2일에 뇨당올 분석하였으며 공복시 꼬리정 맥으로부터 취한 혈액의 혈당농도가 200mg/dL 이상일 경우에 당뇨로 간주하였다.
- 7주간 사육이 끝난 실험동물은해 부하기 전에 15시 간동안 사료공급을 중단한 후 ether로 마취 시 킨 후 항응고제 (heparin)를 함유하는 5 mL 주사기 로 복부대동맥에서 채혈하여 4℃, 3000rpm으로 10분간 원심분리하여 혈청을 얻었으며 -70℃에 두면서 분석용 재료로 사용하였다. 분뇨는 7주간 사육이 끝난 다음날 24시 간동안 수집하였으며 뇨의 경우는 원심분리하여 이 물질을 제거하여 중량과 부피 를 각각 측정하였다. 간장은 분리 한 후 phosphate buffered saline용액으로 씻어내어 paper towd로 습기를 제거한 후 무게를 측정하였다.
- 5 g되는 Sprague-Dawleye] 숫컷 휜쥐 30마리를 rat용 펠렛사료로 일주일간 적응시 킨 후 난괴 법에 따라 한 군에 10마리씩 3군 즉, 무처리군, 콩 식이섬유로 부터 추출한 헤 미 셀룰로즈(이하 헤 미 셀룰로즈) 5 g/kg- diet 식이군(HT), 혜미셀룰로즈 10 g/kg-diet 식이군(H-2) 으로 나누어 (Table 1) 6주간 사육하였으며, 당뇨를 유발시 킨 후 동일한 실험식이로 1주간 사육하였다. 사육장은 stainless steel 장을 사용하였고, 온도 및 습도는 23±2℃, 60±5%로 조정하였고 명암의 주기는 12시간 간격으로 설정하였으며, 사육중 물과 사료는 자유 섭취시켰다.
- 식이 섭취량, 체중 및 음용수 섭취량은 1주일에 한번씩 매일 같은 시간에 측정하였다. 7주간 사육이 끝난 실험동물은해 부하기 전에 15시 간동안 사료공급을 중단한 후 ether로 마취 시 킨 후 항응고제 (heparin)를 함유하는 5 mL 주사기 로 복부대동맥에서 채혈하여 4℃, 3000rpm으로 10분간 원심분리하여 혈청을 얻었으며 -70℃에 두면서 분석용 재료로 사용하였다.
- 조사하였다. 실험군은 셀룰로즈군(대조군), 헤미셀룰로즈 0.5% 식이군(H-1 군), 헤미셀룰로즈 1% 식이군(H-2 군)으로 나누어 6주간 사육한 후 당뇨를 유발시 키고 계속해서 1주간 사육하였다. 당뇨유발에 따른 식이섭취량과 체중증가량 및 식 이효율은 H-2 식 이 군이 대조군과 H-1 군에서보다 높은 값을 나타낸 반면 음용수 섭취량은 H-2 군에서 낮았다.
- 실험동물은 평균체중이 105.5 g되는 Sprague-Dawleye] 숫컷 휜쥐 30마리를 rat용 펠렛사료로 일주일간 적응시 킨 후 난괴 법에 따라 한 군에 10마리씩 3군 즉, 무처리군, 콩 식이섬유로 부터 추출한 헤 미 셀룰로즈(이하 헤 미 셀룰로즈) 5 g/kg- diet 식이군(HT), 혜미셀룰로즈 10 g/kg-diet 식이군(H-2) 으로 나누어 (Table 1) 6주간 사육하였으며, 당뇨를 유발시 킨 후 동일한 실험식이로 1주간 사육하였다. 사육장은 stainless steel 장을 사용하였고, 온도 및 습도는 23±2℃, 60±5%로 조정하였고 명암의 주기는 12시간 간격으로 설정하였으며, 사육중 물과 사료는 자유 섭취시켰다.
- 2의 방법에 따라 행하였다. 즉, 콩 식 이 섬 유 100 g 에 5%의 소금물 1 L를 가하여 Polytron homogenizer(Homomixer Mark II F, TK, Japan)로 20분간 균질화한 후 10, 000 rpm으로 10분간 원심분리 하여 잔사를 얻었으며 , 잔사는 다시 동일용매 1 L씩으로 3회 세 척 하여 단백질을 제거하였다. 다음에 1 L의 증류수와 80% 알코올 순서로 각각 3회 반복 세척한 후 Whatman No 50 여과지로 감압여과하여 알코올 불용성 물질(AIS: alcohol insoluble substance) 을 얻었다.
- 콩 식이 섬유로부터 제조한 헤미 셀룰로즈가 streptozotocin 으로 유발한 당뇨쥐의 혈당과 혈청콜레스테롤함량에 미치는 영향을 조사하였다. 실험군은 셀룰로즈군(대조군), 헤미셀룰로즈 0.
대상 데이터
- 본 연구는 과학기술부 한국과학재 단 지 정 대구대 학교 농산물 가공.저장 및 산업화 연구센터의 일부지원에 의한 것입니다.
- 실험용 콩은 2003년도 경북 청도에서 생산된 은하콩(Glycine max Eunha)으로 농협 에서 구입하여 재료로 사용하였다.
데이터처리
- 모든 실험결과는 실험동물 10마리의 평균치 土 표준편차로 표시 하였으며, 유의 성 검 증은 SPSS(Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc., Chicago, IL, USA) software package program-fr 이용하여 Duncan's multiple range test 및 t-test를 행하였다.
이론/모형
- 실험식이는 AIN-76 diet(Teklad, USA)를 기본으로 하여조제 하였다. 식 이 성 분으로는 choline bitartrte(ICN Biomedicals Inc.
- , USA)로, 뇨당은 Uriscan GP 2(YD Diagnostics, Seoul, Korea)로 각각 측정하여 mg/dL 단위로 나타내었다. 혈청 내의 중성 지 질, 총콜레스테롤 및 HDL 콜레스테롤 함량은 en- zymetic assay kit(Nissui Pharm. Co. Ltd., Japan)로 측정 하였으며, 동맥경화지수(atherogenic index)는 (total cholesterol —HDL-cholesterol)/HDL-cholesterol-^] 계산식에 의하여 산출하였다.
성능/효과
- 9 g/week의 범위로 높았으나 처리에 따른 유의적 인 차이는 나타나지 않았다. 당뇨유발 1주 후의 평균 식이 섭취 량은 당뇨대조군이 132.7 g/week, H-1 식이군이 136.9 g/week로 유의 적 인 차이를 보이지 않았으나 H-2 식 이 군에서 는 137.6 g/week으로 당뇨대 조군과 HT군에서 보다 유의적 으로 높은 값을 나타내었다. 체 중증가량(Fig.
- Le氏와 Kim(16)은 당뇨가 유발되면 심장과 폐가 병들어 입 이 마르고, 많이 마시며, 가슴이 답답하고, 소변이 자주 마려우며 음식을 많이 먹어도 배가 고프고 땀이 많고 변비가 있는데 그 원인을 신장의 수분부족 때문이라 하였다. 본 실험결과 당뇨 유발로 음용수 섭 취 량이 증가하는 현상은 부족된 수분을 보충하려 는 생리적 현상으로 헤 미 셀룰로즈 식 이 군 특히 H-2 군에서 음용수 섭취량이 당뇨대조군에 비하여 적었다.
- lyorra와 Paya(17)은 당뇨쥐의 간장은 정상 쥐에 비하여 비 대 해진다고 하였으며, Lim과 Kim(18)은 둥글레 추출물을 식 이한 당뇨쥐의 간장이 당뇨대조군에 비하여 낮음으로서 식이군에서 당뇨의 회복이 촉진되는 현상이라 하였다. 본 실험에서도 H-2군은 당뇨 대조군에 비하여 간장의 무게가 낮게 나타나 헤 미 셀룰로즈 식이군에서 항당뇨효과가 있음을 나타내었다.
- 본 실험에서도 헤미셀룰로즈 식이로 혈청 중성지질의 함량에는 큰 영향을 미치지 않았으나 혈청 총콜레스테롤 함량에는 상당한 영향을 미쳤으며 결과적으로 헤미셀룰로즈 식이 군에서 LDL-콜레스테롤의 함량이 낮은 것으로 나타났다. .
- 6%로 H-2군에서 높은 증가를 나타내었으며, 대조군은 당뇨유발 전후의 유의적 인 차이를 보였으나 헤 미 셀룰로즈 식 이 군에서는 유의 적 인 차이가 없었다. 식이효율은 당뇨유발 전에는 1.05~L18로 처리 간의 유의 적 인 차이를 보이지 않았으나 당뇨유발 후는 H- n 식이군은 타군에 비하여 유의적으로 높았으며, 당뇨 유발 전후의 차이는 대조군에서는 나타났으나 헤미셀룰로즈 식이 군에서는 나타나지 않았다.
- 85로 대조군보다 낮았다. 이상 의결과, 콩 식이섬유로부터 추출한 헤미셀룰로즈는 항당뇨효과가 높음을 나타내었다.
- 이상의 결과, STZ의 처리가췌장의 파괴로 인하여 당뇨가 유발됨을 감안할 때 콩에 함유되어 있는 헤미 셀룰로즈가 췌장의 재생과 밀접한 관련이 있음을 시사한다.
- 2 mg/dL로 평 균치는 식이군에서 낮았으나 유의적인 차이는 보이지 않았다. 총콜레스테롤함량은 대조군 에서 101.6 mg/dL, 식이군에서는 73.8~78.4mg/dL로 식이군에서 유의적으로 낮았으며 HDL- 콜레스테롤 함량은 모든 실험군에서 39.8-44.7 mg/dL 범위로 비슷한 수치를 나타내었다. 식 이 군에서 HTRe 대조군과 유사하나 동맥경화지수는 0.
- Lee 등(15)은 STZ로 유발시킨 당뇨쥐를 무식이 섬유군, 셀루로즈군 이눌린군, .치커리군으로 나누어 4주간 식이 한 결과 식이섭취량과 체중증가율은 치커리군이 나머지 3군에 비 하여 높고 무식 이 섬 유군, 셀루로즈군 및 이 눌린군 간에는 유의적 인 차이가 없었다고 하였다. 이 같은 결과들로 미루어볼 때 본 실험의 H-2군에서 당뇨유발 후 체중증가율이 높은 것은 식 이섭 취 량이 높은 것과 관련이 있는 것으로 생각된다.
- 53 mg/dL, H-2군 035 mg/dL로 H-1 군은 대조군의 55%, H-2군은 대조군의 36%로 헤미셀룰로즈 식이 군이 대조군에 비하여 유의적으로 낮았다. 혈청내 중성지 질의함량은 식이에 따른 유의적인 차이는 보이지 않았으나 혈청 총콜레스테롤 함량은 대조굳에서 101.6 mg/dL, 식 이군에서는 73.8 -78.4 mg/dL로 유의적으로 낮았으며, 혈청 HDL-콜레스테롤 함량은 모든 실험군에서 39.8-44.7 mg/dL 범위로 비슷한 수치 를 나타내었다. HTR과 동맥경 화지 수는 대조군에서는 각각 0.
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