[논문]지부자 활성성분이 D-Galactosamine 투여에 의한 흰쥐의 간손상에 미치는 영향

김나영; 이정숙; 박명주; 이경희; 김석환; 최종원; 박희준

doi:10.3746/jkfn.2004.33.8.1286

지부자 활성성분이 D-Galactosamine 투여에 의한 흰쥐의 간손상에 미치는 영향
The Hepatoprotective Effect of Active Compounds of Kochiae fructus on D-Galactosamine-Intoxicated Rats 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.33 no.8, 2004년, pp.1286 - 1293

김나영 (동아대학교 식품영양학과) , 이정숙 (고신대학교 식품영양학과) , 박명주 (동아대학교 식품영양학과) , 이경희 (동아대학교 식품영양학과) , 김석환 (동아대학교 식품영양학과) , 최종원 (경성대학교 약학과) , 박희준 (상지대학교 응용식품과학부)

초록
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지부자(Kochiae Fructus)의 생리활성물질 검색 및 간손상에 미치는 영향을 연구할 목적으로 실험동물에 지부자 추출물을 경구 투여한 후 GaIN으로 간손상을 유발하여 혈액 및 간조직의 생화학적 변화를 관찰하고 free radical의 생성계와 해독계의 활성에 미치는 영향을 검토한 결과는 다음과 같다. GaIN 단독투여군은 대조군에 비하여 AST와 ALT가 증가하였으나, KFB, oleanolic acid, momordin Ic 투여군에서는 GaIN 단독투여군에 비해 유의적 감소를 보였다. 간조직의 지질과산화 함량은 GaIN 단독투여군이 대조군과 비교하여 증가하였고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군에는 미치지 못하였으나 GaIN 단독투여군에 비해 현저히 감소하였다. XO, AO의 활성은 대조군보다 GaIN 단독투여군에서 유의적으로 증가하였으며, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 XO와 AO의 활성은 GaIN 단독투여군보다 낮게 나타났다. 간조직 중의 GSH농도는 GaIN 단독투여군이 대조군에 비해 현저히 감소하였고, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 GaIN 단독투여군과 비교시 증가를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 회복되었다. GaIN 단독투여군의 ${\gamma}$-GCS와 GR의 활성은 대조군에 비하여 유의한 감소를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군의 ${\gamma}$ -GCS의 활성은 대조군에는 미치지 못하였지만 GaIN 단독투여군에 비해 유의하게 개선되었다. KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 GR 활성은 GaIN 단독투여군보다 유의한 증가를 보였다. GST활성은 GaIN 단독투여군이 대조군에 비하여 현저한 감소를 나타내었고, KFM200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 못미쳤으나 GaIN 단독투여군보다 통계적으로 유의한 증가를 관찰할 수 있었다. SOD, catalase 및 GSH-Px의 활성은 대조군에 비하여 GaIN 단독투여군에서 감소를 보였고, SOD와 catalase 활성은 KFM, KFB와 oleanolic acid의 투여로 GaIN 단독투여군보다 높게 나타났다. 특히 momordin Ic 30-GaIN군의 SOD 활성은 대조군에 가깝게 개선되었다. GSH-Px의 활성은 KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GaIN 단독투여군에 비해 현저히 증가하였고, 특히 momordin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 증가되었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 지부자로부터 분리한 momordin Ic가 GSH 농도를 증가시키고 활성산소 해독계에 관여하는 효소의 활성을 증가시킴으로서 GaIN으로 인한 간손상을 완화시키는 것으로 사료되어진다.

Abstract ▼ AI-Helper

This study was conducted to investigate the biological activity and hepatoprotective effect of various fractions and isolated compounds from Kochiae fructus (KF) extract on D-galactosamine (GaIN)-intoxicated rats. Male Sprague-Dawley rats were divided into control, GaIN treated group (GaIN), GaIN plus KF methanol extract treated group (KFM 200-GaIN), GaIN plus KF butanol extract treated group (KFB 200-GaIN), GaIN plus momordin Ic treated group (Momordin Ic 30-GaIN) and GaIN plus oleanolic acid treated group (Oleanolic acid 30-GaIN). KFM (200 mg/kg BW), KFB (200 mg/kg BW), momordin Ic (30 mg/kg BW) and oleanolic acid (30 mg/kg BW) were orally administered once a day for 14 days. GaIN (400 mg/kg BW) was injected at 30 minutes after the final administration of the compounds. The activities of serum aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase were increased in the GaIN group compared to the control group and significantly lower in the KFB 200-GaIN, momordin Ic 30-GaIN and oleanolic acid 30-GaIN group than in the GaIN group. Hepatic lipid peroxide level was increased in the GaIN group compared to the control group and was lower in the KFM 200-GaIN, KFB 200-GaIN, momordin Ic 30-GaIN and oleanolic acid 30-GaIN group than in the GaIN group. Activities of xanthine oxidase and aldehyde oxidase in liver were higher in the GaIN group than in the control group and were significantly decreased in the KFB 200-GaIN, momordin Ic 30-GaIN and oleanolic acid 30-GaIN group compared to the GaIN group. Hepatic glutathione, ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase and catalase activities were decreased in the GaIN group compared to the control group and were higher in the KFB 200-GaIN, momordin Ic 30-GaIN and oleanolic acid 30-GaIN group than in the GaIN group. Activities of hepatic glutathione reductase, glutathione S-transferase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase were lower in the GaIN group than in the control group and were improved in the KFM 200-GaIN, KFB 200-GaIN, momordin Ic 30-GaIN and oleanolic acid 30-GaIN group compared to the GaIN group. Therefore, the current results indicate that momordin Ic administration alleviated the GaIN-induced adverse effect through enhancing the antioxidant enzyme activities.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

이에 본 연구에서는 실험동물에 지부자 추출물을 경구투여한 후, GalN으로 간손상 유발하고 혈액과 간조직의 생화학적 변화를 관찰하여 지부자의 활성성분이 GalN 투여 에의한 간손상에 미치는 효과를 규명하고자 하였다.

제안 방법

였다. Homogenate 분획에서 Ohkawa 등의 방법(14)을 변경하여 지질과산화 함량과 Ellman의 방법 (15)에 따라 glutathione 함량을 측정하였다. Mitochondria 분획에서는 Aebi의 방법(16)에 준하여 catalase 활성을 측정홍!■였다.
실험동물은 (주)대한 바이오 링크로부터 분양 받아 일정 한 조건 (온도 22 ± 1℃, 습도 55 ± 3%, 명 암 12시간 light/ dark cycle)으로 1주 동안 적응시킨 Sprague-Dawley계 웅성 흰쥐(평균체중 200±10 g)를 그룹 당 5마리씩 나누어 Table 1과 같이 사육하였다. 대조군과 GalN 단독투여군은 생리식염수를 1일 1회 2주간 경구투여하고, 지부자 추출물투여군은 지부자 추출물을 1일 1회 2주간 경구투여하였다. 이 때 KFM 200-GaIN군은 지 부자메 탄올추출물 200 ㎎/㎏, KFB 200-GaIN군은 지 부자부탄올추출물 200 ㎎/㎏, momordin Ic 30-GalN군은 momordin Ic 30 ㎎/㎏, oleanolic acid 30-GaIN군은 oleanolic acid 30 ㎎/㎏씩을 각각 투여하였다.
않았다. 따라서 본 연구에서는 KFM과 KFB 및 KFB에서 분리 동정 한 momordin Ic와 oleanolic acid를 선택 하여 실험하였다. 실험동물은 (주)대한 바이오 링크로부터 분양 받아 일정 한 조건 (온도 22 ± 1℃, 습도 55 ± 3%, 명 암 12시간 light/ dark cycle)으로 1주 동안 적응시킨 Sprague-Dawley계 웅성 흰쥐(평균체중 200±10 g)를 그룹 당 5마리씩 나누어 Table 1과 같이 사육하였다.
이 때 KFM 200-GaIN군은 지 부자메 탄올추출물 200 ㎎/㎏, KFB 200-GaIN군은 지 부자부탄올추출물 200 ㎎/㎏, momordin Ic 30-GalN군은 momordin Ic 30 ㎎/㎏, oleanolic acid 30-GaIN군은 oleanolic acid 30 ㎎/㎏씩을 각각 투여하였다. 마지 막 날 지 부자 추출물 투여 30분 후 GalN 단독투여 군과 지 부자 추출물 투여 군에 GalN을 생 리 식 염 수에 용해시켜 400 ㎎/㎏씩 복강내로 투여하였다.
실험동물을 CO₂ gas로 가볍게 마취시킨 후, 복부 정중선을 따라 개복하고 복부 대동맥에서 혈액을 채취한 다음 실온에서 30분간 방치한 후 원심분리기로 700Xg에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리시켜 즉시 사용하였다. 혈청에서 Re- timan과 Frank시의 방법(13)에 준하여 조제된 kit(아산제약)를 사용하여 aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase 활성을 측정하였다.
대조군과 GalN 단독투여군은 생리식염수를 1일 1회 2주간 경구투여하고, 지부자 추출물투여군은 지부자 추출물을 1일 1회 2주간 경구투여하였다. 이 때 KFM 200-GaIN군은 지 부자메 탄올추출물 200 ㎎/㎏, KFB 200-GaIN군은 지 부자부탄올추출물 200 ㎎/㎏, momordin Ic 30-GalN군은 momordin Ic 30 ㎎/㎏, oleanolic acid 30-GaIN군은 oleanolic acid 30 ㎎/㎏씩을 각각 투여하였다. 마지 막 날 지 부자 추출물 투여 30분 후 GalN 단독투여 군과 지 부자 추출물 투여 군에 GalN을 생 리 식 염 수에 용해시켜 400 ㎎/㎏씩 복강내로 투여하였다.
4)를 가하여 빙 냉상에서 glass teflon homogenizer로 마쇄하였다. 이 마쇄 액을 homogenate 분획으로 하였다. 마쇄 으耳 은 600xg에서 10분간 원심분리하여 핵 및 미마쇄 부분을 제거하고 다시 10, 000Xg에서 20분간 원심분리하여 그 침전물에 동량의 0.
지 부자(Koc瓦ae Fructus)의 생 리 활성 물질 검색 및 간손상에 미치는 영향을 연구할 목적으로 실험동물에 지부자 추출물을 경구투여한 후 GalN으로 간손상을 유발하여 혈액 및 간조직의 생화학적 변화를 관찰하고 free radical의 생성계와 해독계의 활성에 미치는 영향을 검토한 결과는 다음과 같다. GalN 단독투여군은 대조군에 비하여 AST와 ALT가 증가하였으나, KFB, oleanolic acid, momordin Ic 투여군에서는 GalN 단독투여군에 비해 유의적 감소를 보였다.
5 kg을 환류 하에서 3회 에서 걸쳐 methanol(MeOH)로 추출하였다. 추출물을 여과하여 진공농축기에서 증발시킨 후 동결건조하여 고체상의 MeOH 추출물(KFM)을 얻었다(243 g). KFM을 용매의 극성을 증가시켜 계통분획법에 의해 chloroform(CHC₁₃)분획 (KFC) 50 g, ethyl acetate(EtOAc) 분획 (KFE) 9 g과 butanol(BuOH) 분획 (KFB) 21 g을 얻었다.
혈청을 분리시켜 즉시 사용하였다. 혈청에서 Re- timan과 Frank시의 방법(13)에 준하여 조제된 kit(아산제약)를 사용하여 aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase 활성을 측정하였다. 간장은 생리식염수로 관류시켜 조직내 혈액을 제거하고 적출하여 생리식염수로 씻고 여지로 조직에 남아 있는 혈액 및 기타 이물질을 제거하였다.

대상 데이터

따라서 본 연구에서는 KFM과 KFB 및 KFB에서 분리 동정 한 momordin Ic와 oleanolic acid를 선택 하여 실험하였다. 실험동물은 (주)대한 바이오 링크로부터 분양 받아 일정 한 조건 (온도 22 ± 1℃, 습도 55 ± 3%, 명 암 12시간 light/ dark cycle)으로 1주 동안 적응시킨 Sprague-Dawley계 웅성 흰쥐(평균체중 200±10 g)를 그룹 당 5마리씩 나누어 Table 1과 같이 사육하였다. 대조군과 GalN 단독투여군은 생리식염수를 1일 1회 2주간 경구투여하고, 지부자 추출물투여군은 지부자 추출물을 1일 1회 2주간 경구투여하였다.
지부자는 원주시 우산동에 소재한 천일약업사에서 구입하여 상지 대학교 자원식물학과에서 Fig. 1에 나타낸 바와 같이 2.5 kg을 환류 하에서 3회 에서 걸쳐 methanol(MeOH)로 추출하였다. 추출물을 여과하여 진공농축기에서 증발시킨 후 동결건조하여 고체상의 MeOH 추출물(KFM)을 얻었다(243 g).

데이터처리

2)Data followed by different superscript are significantly different by Duncan's new multiple range test (p<0.05).
본 실험에서 얻어진 결과는 평균치 士표준편차로 표시하였고, 통계적 유의 성은 5% 수준에서 Duncan、multiple range test로 검정하였다.

이론/모형

Mitochondria 분획에서는 Aebi의 방법(16)에 준하여 catalase 활성을 측정홍!■였다. Cytosol 분획 에서 Mize와 Langdon의 방법 (17)에 따라 glutathione reductase 활성을 Paglia와 Valentine의 방법(18)으로 glutathione peroxidase 활성을 측정 하였다 r -Glutamylcysteine synthetase의 활성은 Meister와 Richman의 방법 (19)에 준하였고, Habig 등의 방법 (20)에 따라 glutathione S-transferase 활성 과 Marklund와 Markhand의 방법(21)에 따라 superoxide dismutase의 활성을 측정하였다. Stirpe과 Della의 방법 (22)으로 xanthine oxidase 활성과 Rajagopalan 등의 방법 (23)에 따라 aldehyde oxidase 활성을 측정하였다.
Cytosol 분획 에서 Mize와 Langdon의 방법 (17)에 따라 glutathione reductase 활성을 Paglia와 Valentine의 방법(18)으로 glutathione peroxidase 활성을 측정 하였다 r -Glutamylcysteine synthetase의 활성은 Meister와 Richman의 방법 (19)에 준하였고, Habig 등의 방법 (20)에 따라 glutathione S-transferase 활성 과 Marklund와 Markhand의 방법(21)에 따라 superoxide dismutase의 활성을 측정하였다. Stirpe과 Della의 방법 (22)으로 xanthine oxidase 활성과 Rajagopalan 등의 방법 (23)에 따라 aldehyde oxidase 활성을 측정하였다. 단백질의 함량은 Lowry 등의 방법 (24)에 준하여 bovine serum albumin(Sigma)을 표준품으로 하여 측정하였다.
Stirpe과 Della의 방법 (22)으로 xanthine oxidase 활성과 Rajagopalan 등의 방법 (23)에 따라 aldehyde oxidase 활성을 측정하였다. 단백질의 함량은 Lowry 등의 방법 (24)에 준하여 bovine serum albumin(Sigma)을 표준품으로 하여 측정하였다. 이상의 모든 조작을 따로 규정이 없는 한 4℃에서 행하였고, 효소원은 사용 전까지 -70℃에서 보관하였다.

성능/효과

7 -Glutamylcysteine synthetase( r -GCS) 활성은 대조군에 비 하 GalN 단독투여 군은 현저히 감소하였고, KFM 200-GalN, KFB 200-GalN과 oleanolic acid 30-GalN군에서는 GalN 단독투여군에 비해 다소 증가하였으나 유의한 차이가없었다. Momordin Ic 30-GalN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군과 비교하여 현저히 회복되었다.
특히 momodin Ic 30-GaIN군의 SOD 활성 은 대 조군에 가깝게 증가하였고, KFM 200-GaIN군의 catalase의 활성은 GalN 단독투여군에 비해 증가하였으나 통계적 유의성은 관찰할 수 없었다. GSH-Px 활성은 대조군과 비교하여 GalN 단독투여군에서 유의적인 감소를 보였고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 미 치지 못했으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 증가하였고, 특히 momodin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 회복되었다.
특히 momordin Ic 30-GaIN군의 SOD 활성은 대조군에 가깝게 개선되었다. GSH-Px의 활성 은 KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 증가하였고, 특히 momordin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 증가되었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 지 부자로부터 분리 한 momordin Ic가 GSH 농도를 증가시 키고 활성 산소 해독계 에 관여 하는 효소의 활성을 증가시 킴 으로서 GalN으로 인한 간손상을 완화시키는 것으로 사료되어진다.
KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 GR 활성은 GalN 단독투여군보다 유의한 증가를 보였다. GST 활성은 GalN 단독투여군이 대조군에 비하여 현저한 감소를 나타내었고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 못미 쳤으나 GalN 단독투여 군보다 통계 적 으로 유의한 증가를 관찰할 수 있었다. SOD, catalase 및 GSH-Px의 활성은 대조군에 비하여 GalN 단독투여군에서 감소를 보였고, SOD와 catalase 활성 은 KFM, KFB와 oleanolic acid의 투여로 GalN 단독투여 군보다 높게 나타났다.
간 조직 중의 GSH 농도는 GalN 단독투여군이 대조군에 비해 현저히 감소하였고, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GalN 군은 GalN 단독투여군과 비교시 증가를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 회 복되었다. GalN 단독투여 군의 7 -GCS와 GR의 활성은 대조군에 비하여 유의한 감소를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군의 r -GCS의 활성은 대조군에는 미치지 못하였지만 GalN 단독투여군에 비해 유의하게 개선되었다. KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 GR 활성은 GalN 단독투여군보다 유의한 증가를 보였다.
GalN 단독투여군은 대조군보다 SOD, catalase의 활성이 감소하였으며 , KFB와 oleanolic acid의 투여군은 대조군 수준에는 미치지 못했으나 GalN 단독투여에 비해 회복되었다. 특히 momodin Ic 30-GaIN군의 SOD 활성 은 대 조군에 가깝게 증가하였고, KFM 200-GaIN군의 catalase의 활성은 GalN 단독투여군에 비해 증가하였으나 통계적 유의성은 관찰할 수 없었다.
GalN 단독투여군은 대조군에 비하여 AST와 ALT가 증가하였으나, KFB, oleanolic acid, momordin Ic 투여군에서는 GalN 단독투여군에 비해 유의적 감소를 보였다. 간조직의 지 질과산화 함량은 GalN 단독투여군이 대조군과 비교하여 증가하였고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 감소하였다.
미치는 영향은 Table 2에 나타내었다. GalN 단독투여군의 XO와 AO의 활성이 대조군에 비하여 증가하였고, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GalN군의 XO와 AO의 활성은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비하여 낮게 나타났다. KFM 200-GaIN군은 GalN 단독투여군보다 감소하였으나 통계적 유의성은 없었다.
65 karman unit에 비해 유의 한증가를 보였고, 이는 Lim 등(25)이 GalN 투여로 AST와 ALT 활성이 증가하였다는 보고와 일치하였다. KFB 200-GaIN 군, momordin Ic 30~GaIN군과 oleanolic acid 30-GalN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 유의한 개선을 보였고, KFM 200-GaIN군의 AST와 ALT는 GalN 단독투여군보다 감소하였으나 유의성은 없었다. Aminotransferase는 amino기 전이 반응을 촉매 하는 효소의 총칭 으로 AST와 ALT(26)가 임 상적 으로 가장 많이 이 용되고 있다.
40 μmole/g tissue와 비교하여 유의적으로 감소하였는데, 이는 GalN 투여 시 간조직 의 GSH 함량이 감소된다는 Rikans와 Kosanke(39)의 보고와 유사하였다. KFB 200-GalN군과 oleanolic acid 30-GalN군은 GalN 단독투여군보다 유의하게 개선되었고, 특히 momordin Ic 30-GalN군의 GSH 함량은 20.63 + 0.79 Mmole/g tissue로 대조군에 가깝게 회 복되 었다. KFM 200-GalN군은 GalN 단독투여 군에 비해 증가하였으나 유의성은 관찰할 수 없었다.
73 nmole/mg protein/min보다 유의한 감소를 보였고, 이는 GalN 투여 시 GST 활성 이감소되었다는 Lim 등(44)의 연구 보고와 일치 하였다. KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 유의하게 개선되었다.
GalN 단독투여 군의 7 -GCS와 GR의 활성은 대조군에 비하여 유의한 감소를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군의 r -GCS의 활성은 대조군에는 미치지 못하였지만 GalN 단독투여군에 비해 유의하게 개선되었다. KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 GR 활성은 GalN 단독투여군보다 유의한 증가를 보였다. GST 활성은 GalN 단독투여군이 대조군에 비하여 현저한 감소를 나타내었고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 못미 쳤으나 GalN 단독투여 군보다 통계 적 으로 유의한 증가를 관찰할 수 있었다.
28 ±L26 nmole/g tissue에 비하여 유의적 증가를 보였는데, 이는 GalN의 처 리로 지질과산화 함량이 대조군에 비해 유의적으로 증가한다는 보고(27)와 일치 하였다. KFM 200-GalN군, KFB 200-GalN군, momordin Ic 30-GalN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 지 질과산화 함량이 각각 98.80±4.75 nmole/g tissue, 81.85+15.98 nmole/g tissue, 55.88 ±5.55 nmole/g tissue오+ 66.62 ±8.07 nmole/g tissue로 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 낮아졌음이 관찰되었다.
Momordin Ic 30-GalN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군과 비교하여 현저히 회복되었다. 또한 glutathione reductase(GR)^ 활성 은 GalN 단독투여 군이 대조군에 비하여 유의한 감소를 보였고, KFM 200- GalN군, KFB 200-GalN군, momordin Ic 30-GalN군과 oleanolic acid 30-GalN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 개선되었다.
GST 활성은 GalN 단독투여군이 대조군에 비하여 현저한 감소를 나타내었고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 못미 쳤으나 GalN 단독투여 군보다 통계 적 으로 유의한 증가를 관찰할 수 있었다. SOD, catalase 및 GSH-Px의 활성은 대조군에 비하여 GalN 단독투여군에서 감소를 보였고, SOD와 catalase 활성 은 KFM, KFB와 oleanolic acid의 투여로 GalN 단독투여 군보다 높게 나타났다. 특히 momordin Ic 30-GaIN군의 SOD 활성은 대조군에 가깝게 개선되었다.
성은 GalN 단독투여군보다 낮게 나타났다. 간 조직 중의 GSH 농도는 GalN 단독투여군이 대조군에 비해 현저히 감소하였고, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GalN 군은 GalN 단독투여군과 비교시 증가를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 회 복되었다. GalN 단독투여 군의 7 -GCS와 GR의 활성은 대조군에 비하여 유의한 감소를 보였고, momordin Ic 30-GaIN군의 r -GCS의 활성은 대조군에는 미치지 못하였지만 GalN 단독투여군에 비해 유의하게 개선되었다.
GalN 단독투여군은 대조군에 비하여 AST와 ALT가 증가하였으나, KFB, oleanolic acid, momordin Ic 투여군에서는 GalN 단독투여군에 비해 유의적 감소를 보였다. 간조직의 지 질과산화 함량은 GalN 단독투여군이 대조군과 비교하여 증가하였고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 감소하였다. XO, A0의 활성은 대조군보다 GalN 단독투여군에서 유의적으로 증가하였으며, KFB 200-GaIN군, momordin Ic 30-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군의 XO와 AO의 홑!.
Momordin Ic 30-GalN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군과 비교하여 현저히 회복되었다. 또한 glutathione reductase(GR)^ 활성 은 GalN 단독투여 군이 대조군에 비하여 유의한 감소를 보였고, KFM 200- GalN군, KFB 200-GalN군, momordin Ic 30-GalN군과 oleanolic acid 30-GalN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 개선되었다. Free radical, 활성 산소와 지 질과산화의 최 종 무독화과정 에 필연적 으로 GSH을 필요로 한다.
본 실험 결과로 보아 KFM, KFB, momordin Ic와 oleanolic acid 투여로 인한 GST의 증가는 GalN 투여로 인해 야기되는 free radical과 지질과산화의 생성을 억제시키는 것으로 여겨진다.
AO도 XO와 물리화학적 인구조나 성질이 유사하며, XO와 마찬가지로 oxygen free radical을 생성시키는 효소이다(38). 본 실험의 결과 GalN 투여로 인해 XO, AO의 활성이 증가되어 superoxide anion,hydroxyl radical 및 H₂O₂와 같은 oxygen free radical 이 생성이 증가되는 것을 지부자의 추출물이 저지시켜 지질과산화반응을 억제시키는 것으로 생각된다.
세포 밖으로 빠져나간 AST 및 ALT는 순환 혈액 중으로 빠르게 유출되어 간손상 시 정상치보다는 현저히 증가됨으로서 간기능 검사에 이용되고 있다. 본 실험의 결과 KFB, oleanolic acid와 momordin Ic 투여가 간조직을 안정화하여 GalN에 의한 간 손상을 억제시켜 간을 보호하는 것으로 생각된다.
본 실험의 결과를 볼 때 지부자 추출물의 투여가 GalN 투여로 생성되는 free radical의 생성을 억제하거나 소거하여 흰쥐 간조직의 지질과산화반응을 억제시켜 간을 보호하는 것으로 사료된다.
예비실험에서 지 부자의 각 분획을 200 ㎎/㎏ BW씩 2주간 투여한 후 GalN 400 ㎎/㎏ 투여로 간손상을 일으켜 혈청 aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase의 활성을 실험한 결과 KSM과 KFB를 투여했을 때 유의적으로 감소하였으나, KFC와 KFE에서는 유의성 있는 차이가 보이지 않았다. 따라서 본 연구에서는 KFM과 KFB 및 KFB에서 분리 동정 한 momordin Ic와 oleanolic acid를 선택 하여 실험하였다.
이러한 결과로 볼 때 지부자의 momordin Ic 투여가 / - GCS의 활성을 증가시키고, KFM, KFB, momordin Ic와 oleanolic acid가 GR 활성을 원활히 하여 GSH 농도를 증가 시 켜 GalN 투여 로 인한 지 질 과산화반응을 억 제 시 키 는 것으로 사료된다.
이상의 결과로 볼 때 KFM, KFB와 oleanolic acid 및 특히 momordin Ic의 투여가 SOD와 catalase 활성을 증가시 켜 oxygen free radical의 생 성 을 억 제 시 키 고, 증가된 GSH를 기 질로 하여 GSH-Px가 H₂O₂와 지 질 과산화를 억 제 함으로서 간손상을 완화시켜 간을 보호하는 것으로 사료된다.
GSH-Px의 활성 은 KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 미치지 못하였으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 증가하였고, 특히 momordin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 증가되었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 지 부자로부터 분리 한 momordin Ic가 GSH 농도를 증가시 키고 활성 산소 해독계 에 관여 하는 효소의 활성을 증가시 킴 으로서 GalN으로 인한 간손상을 완화시키는 것으로 사료되어진다.
GalN 단독투여군은 대조군보다 SOD, catalase의 활성이 감소하였으며 , KFB와 oleanolic acid의 투여군은 대조군 수준에는 미치지 못했으나 GalN 단독투여에 비해 회복되었다. 특히 momodin Ic 30-GaIN군의 SOD 활성 은 대 조군에 가깝게 증가하였고, KFM 200-GaIN군의 catalase의 활성은 GalN 단독투여군에 비해 증가하였으나 통계적 유의성은 관찰할 수 없었다. GSH-Px 활성은 대조군과 비교하여 GalN 단독투여군에서 유의적인 감소를 보였고, KFM 200-GaIN군, KFB 200-GaIN군과 oleanolic acid 30-GaIN군은 대조군 수준에는 미 치지 못했으나 GalN 단독투여군에 비해 현저히 증가하였고, 특히 momodin Ic 30-GaIN군은 대조군에 가깝게 회복되었다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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