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문제 정의
- , 1983; Goodling, 1987), 이러한 것은 적정 첨가수준 미구명 및 균주의 유익성에 대한 충분한 고찰을 실시하지 않았기 때문인 것으로 사료된다. 본 연구는 L. reuteri를 산란계에 급여시 생산성, 계란의 품질 변화, 영양소 이용성 및 장내 미생물 변화를 고찰하여 생균제적 가치를 구명하고자 실시하였다.
제안 방법
- 내용물은 채취 직후 PBS로 계단희석하여 Rogosa SL agar(유산균; Difco 2011001), Anaerobic agar(혐기성규 Difco 1283000), McConkey plate(E coli; Difco 1262002), SS agar(Salmonella, Difco 1354006)에 접종하였다. Rogosa SL agar와 Anaerobic agar plate는 CO2 incubator(Forma 311, USA)에서 37 ℃ 로 48시간 배양하였으며, MacConkey와 SS agar는 37 ℃ 로 조정된 호기적 incubator(Jisico-MIC2, 한국)에서 24시간 배양 후 colony를 계수하였다.
- 4%를 첨가한 처리구로 나누었다. 각 처리는 4반복으로 하였고 반복당 30수씩 공시하여 배치하였다.
- 계란은 매일 오후 3시에 채란하여 난중 및 산란율을 조사 하였고, 사료섭취량은 매 2주마다 조사하여 수당 평균 섭취량으로 나타내었으며, 사료요구율은 섭취량 대비 산란량으로 계산하여 표시하였다.
- 공시계는 양 측면이 윈치 커텐이 설치된 개방 계사내 1수용 3단 철제 케이지에서 사육하였으며, 시험 종료시까지 사료와 음수를 자유채식시켰다. 점등은 시험 전 기간동안 17시간으로 고정하였다.
- 난각질 및 난질분석은 시험개시시(49주령), 4주령(52주령) 및 8주령(56주령)에 각 반복별로 난중이 비슷한 5개씩의 계란을 선발하여 실시하였다. 난각파열강도 및 난각두께는FHK(Fiyihara Co. LTD, Saitama, Japan)를 이용하여 측정하였으며, 계란 내부 품질인 Haugh unit은 QCM+(Technical Ser-vices and Supplies, York, England)를 이용하여 측정하였다.
- 조사한 개체는 평균 체중과 비슷하고 건강한 상태의 병아리를 선발하였으며, 회장내용물은 Meckel's diverticulum 부위에서 아래쪽으로 5 cm정도 절단하여 채취하였고, 맹장 내용물은 두 개의 맹장 내용물 전체를 채취하였다. 내용물은 채취 직후 PBS로 계단희석하여 Rogosa SL agar(유산균; Difco 2011001), Anaerobic agar(혐기성규 Difco 1283000), McConkey plate(E coli; Difco 1262002), SS agar(Salmonella, Difco 1354006)에 접종하였다. Rogosa SL agar와 Anaerobic agar plate는 CO2 incubator(Forma 311, USA)에서 37 ℃ 로 48시간 배양하였으며, MacConkey와 SS agar는 37 ℃ 로 조정된 호기적 incubator(Jisico-MIC2, 한국)에서 24시간 배양 후 colony를 계수하였다.
- 7%로 하였다(Table 1). 시험사료는 수직형 배합기(200 kg, 국산)를 사용하여 2주 간격으로 배합하였다.
- 본 연구에 사용된 유산균주는 육계 장내에서 분리한Lactobacillus reuteri avibro 2(LR)였으며, MRS broth에 접종하여 발효조(Bestkorea 5L, 한국)에서 3일간 발효한 후 배양물을 농축 및 동결건조하여 유당과 혼합하여 제조하였는데, 유산균은 시제품 g당 107 cfu 정도였다. 시험설계는 유산균 배양물을 첨가하지 않은 대조구와 유산균 배양물을 사료에 0.1%, 0.2%, 0.4%를 첨가한 처리구로 나누었다. 각 처리는 4반복으로 하였고 반복당 30수씩 공시하여 배치하였다.
- 영양소 이용성을 조사하기 위하여 사양시험 종료후 처리당 4수씩 전분채취법으로 대사시험을 실시하였다. 평균체중을 유지하고 정상적인 분을 배설하는 개체를 선발하여 1수용 대사케이지에 수용하였는데, 케이지 적응을 고려하여 3일간 시험사료를 자유채식시켰고 이후 3일 동안 매일 사료 섭취량과 배설량을 수집하여 칭량하였다.
- 장내 미생물은 회장과 맹장 내용물에 대하여 3, 5, 7주령에 처리별 4수씩 희생하여 조사하였다. 조사한 개체는 평균 체중과 비슷하고 건강한 상태의 병아리를 선발하였으며, 회장내용물은 Meckel's diverticulum 부위에서 아래쪽으로 5 cm정도 절단하여 채취하였고, 맹장 내용물은 두 개의 맹장 내용물 전체를 채취하였다.
- 영양소 이용성을 조사하기 위하여 사양시험 종료후 처리당 4수씩 전분채취법으로 대사시험을 실시하였다. 평균체중을 유지하고 정상적인 분을 배설하는 개체를 선발하여 1수용 대사케이지에 수용하였는데, 케이지 적응을 고려하여 3일간 시험사료를 자유채식시켰고 이후 3일 동안 매일 사료 섭취량과 배설량을 수집하여 칭량하였다. 수집된 분은 Ho-mogenizer(SMT, Japan)로 충분히 섞은 후 60 ℃ 로 조정된 송풍건조기(Kijeong, 한국)에서 3일동안 건조하였으며, 건조 후 실온에서 1일 보관 후 칭량하였다.
대상 데이터
- 난각질 및 난질분석은 시험개시시(49주령), 4주령(52주령) 및 8주령(56주령)에 각 반복별로 난중이 비슷한 5개씩의 계란을 선발하여 실시하였다. 난각파열강도 및 난각두께는FHK(Fiyihara Co.
- 본 시험에 사용된 공시계는 49주령된 ISA Brown 480수였으며 산란시험 계사에서 8주간 급여시험을 실시하였다.
- 본 연구에 사용된 유산균주는 육계 장내에서 분리한Lactobacillus reuteri avibro 2(LR)였으며, MRS broth에 접종하여 발효조(Bestkorea 5L, 한국)에서 3일간 발효한 후 배양물을 농축 및 동결건조하여 유당과 혼합하여 제조하였는데, 유산균은 시제품 g당 107 cfu 정도였다. 시험설계는 유산균 배양물을 첨가하지 않은 대조구와 유산균 배양물을 사료에 0.
- 시험사료는 옥수수와 대두박 위주로 배합하였는데, 조단백질과 대사에너지함량은 각각 16%와 2, 800 kcal/kg이었으며 Ca은 3.7%로 하였다(Table 1). 시험사료는 수직형 배합기(200 kg, 국산)를 사용하여 2주 간격으로 배합하였다.
- 장내 미생물은 회장과 맹장 내용물에 대하여 3, 5, 7주령에 처리별 4수씩 희생하여 조사하였다. 조사한 개체는 평균 체중과 비슷하고 건강한 상태의 병아리를 선발하였으며, 회장내용물은 Meckel's diverticulum 부위에서 아래쪽으로 5 cm정도 절단하여 채취하였고, 맹장 내용물은 두 개의 맹장 내용물 전체를 채취하였다. 내용물은 채취 직후 PBS로 계단희석하여 Rogosa SL agar(유산균; Difco 2011001), Anaerobic agar(혐기성규 Difco 1283000), McConkey plate(E coli; Difco 1262002), SS agar(Salmonella, Difco 1354006)에 접종하였다.
데이터처리
- 본 시험에서 수집된 자료의 분석은 GLM(SAS Institute, 1996)을 이용하여 분산분석을 실시하였으며, 처리별 유의성분석은 Duncan's new multiple range test를 이용하여 5% 수준에서 유의성을 검정하였다.
이론/모형
- 송풍건조된 분은 분쇄하여 분석 전까지 밀폐용기로 보관하였다. 일반성분과 Ca, P분 석은 AOAC(1995)방법에 준하여 분석하였으며 각각의 분석치는 평균 사료섭취량과 배설량을 이용하여 건물값으로 소화율을 계산하였다.
성능/효과
- 05), LR 첨가구 간에는 유의적인 차이가 없었다. 1일 산란량은 LR 0.2%와 0.4%가 무첨가 대비 향상되었으며 (P<0.05), LR 0.1 %는 무첨가에 비하여 약간 높았으나 유의성은 인정되지 않았다. 사료섭취량은 LR 0.
- Table 2에서는 LR급여 에 의 한 산란율, 평균난중, 1일 산란량, 사료섭취량 및 사료요구율을 나타내었다. 8주간 평균 산란율은 LR 0.2% 첨가구가 무첨가와 LR 0.1% 첨가에 비하여 유의적으로 향상된 것으로 나타났다(P<0.05). 0.
- Table 3에서는 Table 2의 난중 향상 효과를 중량별로 표시한 것이다. 8주령시 평균 난중은 전기간 평균 난중과 비슷하게 유산균 배양물 첨가구가 무첨가보다 무거운 것으로 나타났다. 등급별 분포에서 왕란(Jumbo)은 난중이 가장 무거운 0.
- Table 6에서는 각 영양소의 이용율을 나타내었다. 건물 이용율은 0.4% 첨가구가 무첨가구에 비하여 유의하게 향상되었으며(P<0.05) 다른 첨가구는 무첨가에 비해 수치는 증가하였지만 유의성은 인정되지 않았다. 조단백질 역시 건물 소화율과 비슷한 경향을 보였으며, 조지방 및 조회분 소화율은 유의성은 인정되지 않았으나 LR 첨가구가 개선되는 경향을 보였다.
- 1 %는 무첨가에 비하여 약간 높았으나 유의성은 인정되지 않았다. 사료섭취량은 LR 0.1% 첨가구가 무첨가에 비하여 적었으며(P<0.05), LR 첨가구간 에는 유의적인 차이는 없었다. 사료요구율은 모든 LR 첨가 구가 무첨가에 비하여 유의적으로 개선되었으며(P<0.
- 05), LR 첨가구간 에는 유의적인 차이는 없었다. 사료요구율은 모든 LR 첨가 구가 무첨가에 비하여 유의적으로 개선되었으며(P<0.05), LR 첨가구 간에는 차이가 없었다.
- Table 7에서는 회장과 맹장의 미생물 변화를 나타내었다. 유산균은 회장과 맹장 모두 유산균 배양물 급여구에서 그수가 증가되는 것으로 나타났으며(P<0.05), SalmoneHa와 E. coli는 처리간 차이가 없는 것으로 나타났다. 산란계에 대한 유산균 급여시 장내 미생물 변화에 대한 보고는 거의 없는편으로 직접적인 비교는 곤란하지만, 육계에서는 유산균의 급여로 장내 유익균의 수가 증가된다는 보고들(남궁 환등, 1986; Jin et al, 1996; Jin et al.
- 대란(Large) 의 비율은 무첨가구가 가장 높았고 유산균 배양물 첨가구는 비슷하게 나타났다. 이러한 결과에서 평균 난중은 모두 특란급에 속하지만 왕 · 특란의 비율은 유산균 배양물 첨가구가 93%대로 88%대인 무첨가에 비하여 향상되는 것을 알 수 있다. 우리나라의 경우, 계란의 가격이 난중에 의하여 결정되는 것을 감안하면 유산균 배양물 의 난중 향상 효과에 의한 수익성이 향상될 것으로 판단된다.
- (1994)은 유산균을 사료에 첨가하면 식욕을 증진하고 지방, 질소, 칼슘, 인 및 구리 등의 이용율을 증진 시킨다고 하였다. 이러한 유산균의 영양소 이용성 개선 효과를 산란 생산성 및 사료섭취량과 함께 고려해보면 유산균 첨가는 영양소 이용성을 향상시켜 사료섭취량의 증가없이 생산성을 향상시킴으로서 난 생산 사료효율을 개선시키는 것으로 사료된다. 본 시험과 동일한 유산균을 육계에게 급여한 보고(김상호 등, 2002)에서도 본 연구 결과와 비슷한 결과를 보였다.
- 이상의 결과에서 Lactobacillus reuteri는 산란계의 생산성과 영양소 이용효율을 증진시키는 작용을 하며 이러한 것은 장내 유익균의 증가를 통하여 이루어지는 것으로 판단된다.
- 05) 다른 첨가구는 무첨가에 비해 수치는 증가하였지만 유의성은 인정되지 않았다. 조단백질 역시 건물 소화율과 비슷한 경향을 보였으며, 조지방 및 조회분 소화율은 유의성은 인정되지 않았으나 LR 첨가구가 개선되는 경향을 보였다.
- Lacobacillus reuteri는 유산간균(桿菌) 가운데 유일하게 포유동물과 조류에 동시에 존재하는 유산균으로 알려져 있으며, 부화 후 1주령 이내에 소화기관에서 가장 많이 우점되는 특징이 있다. 특히, 살모넬라 접종 및 혹서와 같은 스트레스 요인을 해소하는데 효과가 우수한 것으로 나타났다. Lactobacillus reuteri는 특유의 대사산물인 reuterin을 생산하는데, reuterin은 소화기관 전체에서 발견되며, 농도에 따라서 차이는 있지만 모든 미생물에 대하여 항균 효과가 있는 것으로 나타났다(Axelsson etal.
- 4% 첨가구는 무첨가에 비하여 약간 높았으나 통계적 유의성은 인정되지 않았다. 평균 난중은 모든 LR 첨가구가 무첨가보다 무거워진 것으로 나타났으며(P<0.05), LR 첨가구 간에는 유의적인 차이가 없었다. 1일 산란량은 LR 0.
후속연구
- (1994)의 결과에서도 본 연구와 비슷하였다. 난백의 품질은 유산균에 의하여 개선된다고 하였으나 본 연구 결과에서는 차이가 없었는데, 보관기간에 따른 난백 개선 효과가 있다는 보고(김상호 등, 2000)를 고려할 때 보관온도를 고려한 보관기간별 난백 개선 효과 역사 구명할 필요가 있다고 하겠다.
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