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Yeast two-hybrid 시스템을 통한 K11 phage lysozyme과 K11 phage RNA 중합효소와의 결합에 대한 연구
Interaction of phage K11 lysozyme with phage RNA polymerase 원문보기

自然 科學 論文集 : 배재대학 첨단과학연구소, v.14 no.2, 2004년, pp.83 - 91  

전현정 (배재대학교 생명공학과.바이오의약연구센터) ,  이상수 (배재대학교 생명공학과.바이오의약연구센터)

초록
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박테리오 파이지 K11 lysozyme은 최근에 우리 실험실에서 클로닝 되었으며, 숙주균주의 세포벽을 분해하는 고유의 lysozyme활성과 박테리오 파아지 K11 RNA 중합효소의 전사반응을 억제하는 활성을 가지고 있는 것으로 확인되었다. 이미 잘 연구된 박테리오 파아지 T7 lysozyme의 경우 클로닝되고 분리 정제된 T7 lysozyme 단백질의 3차 구조 및 T7 RNA 중합효소와의 결합양상에 대하여 밝혀졌다. 따라서 우리 실험실에서는 K11 lysozyme과 K11 RNA 중합효소와의 결합 정도 및 그 특성을 파악할 목적으로 yeast two hybrid 시스템을 통하여 K11 RNA 중합효소와 K11 lysozyme의 단백질-단백질 상호작용을 알아보고자 하였다. LexA 시스템을 이용하여 LexA DNA 결합 부위를 갖고 있는 pLexA에 K11 lysozyme 유전자를 삽입하여 prey로 하였따. 활성 부위로는 B42 융합 단백질을 만드는 pJG4-5에 K11 RNA 중합효소의 결합은 생체 밖에서 reporter 유전자인 lacZ와 leu2의 발현으로 확인되었으며 이들의 결합정도와 결합부위에 대한 연구들은 진행중에 있다.

Abstract AI-Helper 아이콘AI-Helper

Recently phage K11 lysozyme was cloned and characterized in our lab. The K11 lysozyme was identified to have dual functions. It not only cuts a peptidoglycan bond in bacterial cell wall but also acts as an inhibitor of K11 RNA polymerase. It has been known that the T7 lysozyme binds specifically to ...

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문제 정의

  • 이러한 Kll lysozjme과 Kll RNA 중합효소의 결합 정도 및 특성을 파악하기 위하여 Yeast two-hybrid 시스템을 이용하였다. 이 실험으로 RNA 중합효소와 Kll lysozyme의 단백질-단백질 상호작용을 확인하였고, 결합정도와 결합 부위를 파악하기 위하여 Kll RNA 중합효소 유전자가 부분적으로 결실된 돌연변이체를 제조하여 확인할 계획이다.
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