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문제 정의
- 이에 fibrin glue가 단독으로 골 재생능이 있는지 확인하고, 임상적으로 적용하는데 어떠한 문제점이 있는지 등을 알아보기 위하여, 백서의 두개골에 인위적으로 골결손부를 만든 후 치유과정에서 fibrin glue가 미치는 영향을 조직병리학적으로 검경하였다.
제안 방법
- Fibrin glue가 골재생능이 있는지 알아보고자 백서의 두개골에 인위적인 골결손부를 형성하고 fibrin glue를 이식한 후 치유과정을 조직병리학적으로 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
- Ketamin 0.1 ml/g을 근육 주사하여 전신 마취를 시행하였다. 마취 후 술 후 감염과 부종을 감소하기 위하여 kymoxin과 dexamethasone을 술 전 근육 주사하였으며 수술 부위의 지혈을 위해 1:100,000 epinephrine이 포함된 2% lidocaine을 소량 주입하였다.
- 각 군의 백서들은 1주, 2주, 4주, 8주, 12주에 희생시켰으며, 검체는 8×8 mm의 사각형 크기로 채취하여 formalin에 고정, 보관하였다. 검체는 H&E 염색을 시행하여 골형성 정도를 평가하였다.
- 각 군의 백서들은 1주, 2주, 4주, 8주, 12주에 희생시켰으며, 검체는 8×8 mm의 사각형 크기로 채취하여 formalin에 고정, 보관하였다. 검체는 H&E 염색을 시행하여 골형성 정도를 평가하였다.
- 백서의 두개골을 충분히 노출 시킨 후 low speed 핸드피스에 round bur를 이용하여 충분한 생리식염수 주수하에 5×5 mm의 사각형 결손부를 두개골 정중부에 인위적으로 형성하였다. 결손부 형성 후 대조군에서는 지혈 처치 후 4-0 vicryl로 봉합을 시행하였고. 실험군에서는 fibrin glue를 1 ml 적용하고 5분 후에 4-0 vicryl로 봉합 하였으며, 결손부의 잉여 fibrin glue는 깨끗이 제거하였다.
- 1 ml/g을 근육 주사하여 전신 마취를 시행하였다. 마취 후 술 후 감염과 부종을 감소하기 위하여 kymoxin과 dexamethasone을 술 전 근육 주사하였으며 수술 부위의 지혈을 위해 1:100,000 epinephrine이 포함된 2% lidocaine을 소량 주입하였다.
- Fibrin glue의 유용성을 실험하기 위해 200-300g의 백서 총 50마리를 이용하였다. 백서들은 Fibrin glue를 적용한 실험군 25마리와 적용하지 않은 대조군 25마리로 나누었으며 백서의 두개골에 인위적 골결손부를 형성한 뒤 지난 기간에 따라 각각 1주, 2주, 4주, 8주, 12주의 5개 군으로 다시 분류하였다. 각 주의 군에는 각각 5마리씩을 배정하였다.
- 수술 부위를 깨끗이 면도하고, 베타딘으로 소독하였다. 백서의 두개 정중부에 1.5 cm의 절개를 시행하고 전층 박리를 시행하였다. 절개와 박리 시에 골막의 손상을 최소화 하도록 주의하였다.
- 본 실험에서는 18G injection needle을 사용하여 동시에 도포하는 방법을 사용하였다.
대상 데이터
- Fibrin glue의 유용성을 실험하기 위해 200-300g의 백서 총 50마리를 이용하였다. 백서들은 Fibrin glue를 적용한 실험군 25마리와 적용하지 않은 대조군 25마리로 나누었으며 백서의 두개골에 인위적 골결손부를 형성한 뒤 지난 기간에 따라 각각 1주, 2주, 4주, 8주, 12주의 5개 군으로 다시 분류하였다.
- 본 실험에서는 인간의 신선 혈장을 이용한 Green plast®(녹십자, 한국)를 이용하였다. Green plast®는 4개의 vial로 구성되어 있는데, Vial 1은 인간 혈장 fibrinogen과 coagulation factor Ⅷ이, Vial 2에는 antifibrinolytic agent인 aprotinin이, Vial 3에는 인간 혈장 thrombin이, Vial 4에는 NaCl이 주성분으로 되어있다.
성능/효과
- 1. 2주군까지는 양군 모두 염증세포의 침윤만 보이고 골형성의 징후는 나타나지 않았다.
- 2. 4주군에서는 인접 골로부터 골양조직이 자라 들어오는 양상을 관찰할 수 있었다.
- 3. 신생골 형성이 왕성한 8주군에서 대조군이 실험군보다 더 많은 골형성이 일어나고 있음을 관찰할 수 있었다.
- 4. 12주군에서는 훨씬 성숙된 골형성 양상을 보였고 실험군에서 더 많은 골개조가 일어나고 있음을 알 수 있었다.
- . 구강내에서 mucosal transplantation시 이식 조직과 수용부에 각각 적용됨으로써 높은 생착 성공률을 보였고, 구강 수술 후 상피가 결합 조직으로 덮이지 못한 노출된 부위에서는 dressing으로 사용됨으로써 술 후 불편감을 줄일 수 있었다. 골결손부에서는 fibrin glue를 사용하여 골이식재를 semisolid matrix 형태로 만들어 이식부위에 맞는 용적과 형태로 쉽게 조작할 수 있어 이식을 용이하게 할 수 있었다.
- 대조군에서는 실험군보다 더 활발한 신생골 형성의 양상을 보인다. 대조군에서는 결손부의 5-10% 회복 양상을 보이며, 실험 군에서는 30-40%의 회복 양상을 보인다 (Fig. 7, 8).
- 본 연구에서 fibrin glue만의 적용으로 신생골 형성에 도움을 줄 수 있음을 알 수 있었다. Fibrin glue를 백서에 적용하였을 경우, 신생골이 더 빨리 형성되는 것 보다는 신생골이 형성되는 시기에 더 많은 양이 형성되는 것으로 추정할 수 있다.
- . 본 연구에서는 glue를 적용했을 때 더 많은 감염이 발생하였는데 대부분 술 후 2-3일 이내에 발생하였다. 감염이 발생한 경우에는 glue를 적용하였을 때 발생한 감염을 조절하기가 더 어려웠으며, 감염이 진행되면서 개체가 죽거나, 생존하였을 경우에도 골형성이 거의 발생하지 않았다.
- 총 8마리의 백서가 마취 및 수술 중에 죽었으며, 8마리의 백서에서 술 후 감염이 발생하였고, 이 중 4마리가 죽었다. 술 후 감염은 술 후 2-3일 이내에 발생하였으며, 실험군에서 3마리에 발생하여 1마리가 죽었고, 대조군에서는 5마리에 발생하여 3마리가 죽었다.
- 총 8마리의 백서가 마취 및 수술 중에 죽었으며, 8마리의 백서에서 술 후 감염이 발생하였고, 이 중 4마리가 죽었다. 술 후 감염은 술 후 2-3일 이내에 발생하였으며, 실험군에서 3마리에 발생하여 1마리가 죽었고, 대조군에서는 5마리에 발생하여 3마리가 죽었다.
후속연구
- 이와 같은 변화로 보아 fibrin glue는 골결손부의 골재생 치료 시 보조적인 요법으로 사용될 수 있을 것으로 생각되며, 초기 감염 시 사망이나 골치유가 거의 일어나지 않음으로 보아 예방적 항생제의 사용과 창상에 대한 충분한 감염 방지 대책이 필요할 것으로 생각된다.
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