식용식물자원으로부터 활성물질의 탐색-XIV. 사자발쑥(Artemisia herba)의 전초로부터 flavonoid 화합물의 분리 Development of Biologically Active Compounds from Edible Plant Sources XIV. Isolation and Identification of Flavonoids from the Aerial Parts of Sajabalssuk (Artemisia herba)원문보기
사자발쑥의 전초를 80% MeOH 용액으로 추출하고, 추출물을 EtOAc, n-BuOH 및 물로 분배, 추출하였다. 이 중 EtOAc 분획을 silica gel과 octadecylsilica gel(ODS) column chromatography로 정제하여 4종의 화합물을 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, MS 및 IR 등의 스펙트럼 데이터를 해석하여, eupatilin (1), jaceosidin (2), apigenin (3) 및 eupafolin (4)으로 동정하였다. 이들 중 eupatilin과 jaceosidin은 사자발쑥에서 분리, 보고 된 바 있으나 eupafolin과 apigenin은 처음 분리되었다.
사자발쑥의 전초를 80% MeOH 용액으로 추출하고, 추출물을 EtOAc, n-BuOH 및 물로 분배, 추출하였다. 이 중 EtOAc 분획을 silica gel과 octadecylsilica gel(ODS) column chromatography로 정제하여 4종의 화합물을 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, MS 및 IR 등의 스펙트럼 데이터를 해석하여, eupatilin (1), jaceosidin (2), apigenin (3) 및 eupafolin (4)으로 동정하였다. 이들 중 eupatilin과 jaceosidin은 사자발쑥에서 분리, 보고 된 바 있으나 eupafolin과 apigenin은 처음 분리되었다.
In order to search for biologically active compounds from edible plant sources, the aerial parts of Sajabalssuk (Artemisia herba) were extracted with 80% aqueous MeOH, and the concentrated extract was partitioned with EtOAc, n-BuOH and $H_2O$, successively. From the EtOAc fraction, four c...
In order to search for biologically active compounds from edible plant sources, the aerial parts of Sajabalssuk (Artemisia herba) were extracted with 80% aqueous MeOH, and the concentrated extract was partitioned with EtOAc, n-BuOH and $H_2O$, successively. From the EtOAc fraction, four compounds were isolated through the repeated silica gel and ODS column chromatographies. From the results of physico-chemical data including NMR, MS and IR, the chemical structures of the compounds were determined as eupatilin (1), jaceosidin (2), apigenin (3) and eupafolin (4). Among them, compounds 3 and 4 were isolated for the first time from Sajabalssuk (Artemisia herba).
In order to search for biologically active compounds from edible plant sources, the aerial parts of Sajabalssuk (Artemisia herba) were extracted with 80% aqueous MeOH, and the concentrated extract was partitioned with EtOAc, n-BuOH and $H_2O$, successively. From the EtOAc fraction, four compounds were isolated through the repeated silica gel and ODS column chromatographies. From the results of physico-chemical data including NMR, MS and IR, the chemical structures of the compounds were determined as eupatilin (1), jaceosidin (2), apigenin (3) and eupafolin (4). Among them, compounds 3 and 4 were isolated for the first time from Sajabalssuk (Artemisia herba).
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문제 정의
보고되어 있을 뿐이다. 본 연구에서 사자발쑥의 활성연구에 선행하여 본 식물의 식물화학 적 성분연구의 결과로 4종의 flavonoid 화합물을 분리, 동정하였기에 보고하고자 한다.
제안 방법
74(1H, s)에서 3개의 singlet aromatic methine proton signal을 확인할 수 있었다. Coupling pattern과 chemical shift를 고려해 본 결과 이 화합물은 A환의 5, 7번이 hydroxyl기로 치환된 flavone으로 추정하였다. l3C-NMR(100MHz, C5D5N) spectrum에서 15개의 탄소signal0] 관측되어 flavonoid 화합물이라는 것을 확인하 였고, carbonyl이 5c 183.
EtOAc 분획 (47 g)으 로부터 silica gel column chromatography(c.c.)(<|)7X21 cm, n- hexane-EtOAc = 7:1t 5:1t 3:1^ 1:1)를 실시하여 20개의 분획물(SSE-1 ~SSE-20)을 얻었다. 그중 SSE-16(1.
사자발쑥 전초로부터 얻어진 MeOH 추출물에 대하여 용매의 극성에 따라 EtOAc, »-BuOH 및 HQ로 순차분획하고 각 분획은 감압농축하여 3개의 분획을 얻었다. EtOAc 분획을 silica gel 과 ODS column chromatography로 정제하여 화합물 1, 2, 3 및 4를 분리하였다. 이들 중 화합물 1과2는 본식물에서 분리, 보고된 바 있는 eupatilin"과 jaceosidin。으로 동정하였다.
NMRe 400 MHz FT-NMR spectrometer(Varian Inova AS 400, Vari an, USA)로 측정하였고, IR spectrume Perkin model 599B(Perkin-Elmer, Massachusetts, USA)로 측정하였다. UV는 Spectroline(Model ENF-240 C/F, Spectronics Corporation, USA) 을 사용하였으며, 융점은 Fisher-Johns 융점 측정기 (Fisher Scientific, USA)를 사용하여 측정하였고, 미 보정하였다.
NMRe 400 MHz FT-NMR spectrometer(Varian Inova AS 400, Vari an, USA)로 측정하였고, IR spectrume Perkin model 599B(Perkin-Elmer, Massachusetts, USA)로 측정하였다. UV는 Spectroline(Model ENF-240 C/F, Spectronics Corporation, USA) 을 사용하였으며, 융점은 Fisher-Johns 융점 측정기 (Fisher Scientific, USA)를 사용하여 측정하였고, 미 보정하였다.
61에서 2개의 산소가 결합되어 있는 aromatic quaternary carbon0] 관측되었다. 또한 저자 장 영역에서 6c 60.91의 signal로부터 1개의 methoxy기를 확인할 수 있었고 이관능기의 위치는 5c 132.61의 C-6 signal과 5H 3.86의 methoxy signal이 서로 correlation을 보이는 HMBC spectrum을 통하여 C-6번으로 결정하였다. 이와 같은 결과를 종합하여 화합물 2는 apigenin(화 합물 1)의 G3와 C-6이 산화되고 C-6번의 수산기가 methylation 된 eupafdlio으로 동정하였다.
사자발쑥 전초로부터 얻어진 MeOH 추출물에 대하여 용매의 극성에 따라 EtOAc, »-BuOH 및 HQ로 순차분획하고 각 분획은 감압농축하여 3개의 분획을 얻었다. EtOAc 분획을 silica gel 과 ODS column chromatography로 정제하여 화합물 1, 2, 3 및 4를 분리하였다.
대상 데이터
Column chromatogtaphy용 silica gele Merck (Germany)사에서 생산한 silica gel 60(63-200 um)을 사용하였고, thin layer chromatography(이하 TLC라고 함)는 Merck사에서 생산한 silica gel 60 F254를 사용하였다.
본 실험에 사용한 사자발쑥 전초는 강화군 농업기 술센터로부터 제공받았고, 단국대학교 분자생물학과 피재호 박사가 동정하였으며, 표본시료(KHU-05067)는 경희대학교 생명공학원 천연물 화학실에 보관되어 있다.
성능/효과
화합물 2의 iH-NMR(400 MHz, C5D5N) spectrum을 화합물 1과 비교히] 본 결과 화합물 1의 6번과 3, 번의 aromatic methine에 산소가치환된 것으로 추정되었다.즉 1H-NMR spectrum을 보면 화합물 1에서 보였던 2개의 aromatic methine proton signa!이 각각 8h 7.20과 6h 6.74에서 관측되지 않았으며, l3C-MNR(lOO MHz, C5D5N) spectrum에서도 6c 116.83고}" 8c 100.02에서 2기] 의 aromatic methine이 사라진 대신 6c 146.75와 6c 132.61에서 2개의 산소가 결합되어 있는 aromatic quaternary carbon0] 관측되었다. 또한 저자 장 영역에서 6c 60.
또한 #로부터 수산기(3600cnM) 및 carbonyl(1655 cme1) 작용기를 갖는 것으로 확인되어 flavonoid 화합물로 추정하였다. 1H-NMR(400 MHz, C5D5N) spectrum에서 5H 7.91(2H, d, 8.4 Hz)와 SH 7.20 (2H, d, J= 8.4 Hz)의 signa로부터 para-치환 벤젠을 확인할 수 있었고, 5h 6.9O(1H, s), 5h 6.81(1H, s) 및 5H 6.74(1H, s)에서 3개의 singlet aromatic methine proton signal을 확인할 수 있었다. Coupling pattern과 chemical shift를 고려해 본 결과 이 화합물은 A환의 5, 7번이 hydroxyl기로 치환된 flavone으로 추정하였다.
88에서 관측되어 flavone 화합물이라는 것을 확인할 수 있었다. 5c 165.82, 8c 164.42, 8c 163.07, 5c 162.61 및 5c 158.42에서 산소가 결합되어 있는 aromatic quatemary carbon signal, 8c 122.24와 5c 104.96에서 2개의 aromatic quaternary carbon siallai을 확인하였다. 또한 8c128.
Coupling pattern과 chemical shift를 고려해 본 결과 이 화합물은 A환의 5, 7번이 hydroxyl기로 치환된 flavone으로 추정하였다. l3C-NMR(100MHz, C5D5N) spectrum에서 15개의 탄소signal0] 관측되어 flavonoid 화합물이라는 것을 확인하 였고, carbonyl이 5c 183.88에서 관측되어 flavone 화합물이라는 것을 확인할 수 있었다. 5c 165.
87의 signal로부터 모두 7개의 aromatic methine proton의 존재를 확인할 수 있었다. 따라서 화합물 1은 A환의 C-5, C-7 및 B환의 C-4가 산화된 flavone 화합물이라는 것을 추정할 수 있었다. 이와 같은 자료들을 종합하여 화합물 3은 Chrysanthemum momorifolium에서 주로 분리된 apigenin, 으로 동정하였다.
96에서 2개의 aromatic quaternary carbon siallai을 확인하였다. 또한 8c128.88과 5c 11383에서 각각 2개씩 겹쳐진 aromatic methine signal이 관측되었고, Sc 103.88, 8c 100.02 및 8c 94.87의 signal로부터 모두 7개의 aromatic methine proton의 존재를 확인할 수 있었다. 따라서 화합물 1은 A환의 C-5, C-7 및 B환의 C-4가 산화된 flavone 화합물이라는 것을 추정할 수 있었다.
86의 methoxy signal이 서로 correlation을 보이는 HMBC spectrum을 통하여 C-6번으로 결정하였다. 이와 같은 결과를 종합하여 화합물 2는 apigenin(화 합물 1)의 G3와 C-6이 산화되고 C-6번의 수산기가 methylation 된 eupafdlio으로 동정하였다.。
따라서 화합물 1은 A환의 C-5, C-7 및 B환의 C-4가 산화된 flavone 화합물이라는 것을 추정할 수 있었다. 이와 같은 자료들을 종합하여 화합물 3은 Chrysanthemum momorifolium에서 주로 분리된 apigenin, 으로 동정하였다.
princeps 와 유사한 것으로 알려져 있지만, 아직까지 확실한 식물학적 동정이 되어 있지 않다. 지금까지 약쑥(Artemisia asiatica, A. priceps)으로부터는 다양한 성분들이 분리 보고되어 있지만, 강화지 역에 자생하고 있는 사자발 쑥으로부터는 cineole, camphor 및 borneol 등의 정유(精油) 성분을 GC/MS로 분석한 결과와 eupatilir과 jaceosidin이 분리 . 보고되어 있을 뿐이다.
화합물 2의 NMR data는 apigenin(화합물 1)과 매우 유사하였다. 화합물 2의 iH-NMR(400 MHz, C5D5N) spectrum을 화합물 1과 비교히] 본 결과 화합물 1의 6번과 3, 번의 aromatic methine에 산소가치환된 것으로 추정되었다.즉 1H-NMR spectrum을 보면 화합물 1에서 보였던 2개의 aromatic methine proton signa!이 각각 8h 7.
후속연구
(3) 따라서 강화도에서 매우 쉽게 구할 수 있으며 식용으로 쓰이고 있다는 점에서 사자발쑥 의 폭넓은 이용 가능성을 시사하고 있다. 앞으로 이들 flavonoid 화합물에 대한 다양한 생리적 및 약리적 활성을 검토함으로써 건강기능성 식품 또는 의약품의 소재로서의 충분한 가치가 있다고 여겨지며, 추후 이의 활용과 관련된 연구가 활발히 추진될 것으로 기대된다.
참고문헌 (13)
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