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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 천연 식물 소재의 생리활성 물질 탐색 연구의 일환으로 herb추출물로부터 H. pylorie 대한 항균활성을 탐색하고 이를 이용한 기능성 식품을 개발하기위한 자료로 활용하고자 한다.
제안 방법
- Herb 식물로부터 액체배양에 의한 Helicobacter pylorie 대한 항균효과의 검정. H. pylori 액체배지에 균주를 분주하고, 제균된 각 herb 추출물을 주입한 후 배양하여 spectrophotometeric methods. 균수를 측정한 결과 Table 2에서와 같이 26종의 herb 에서 억제효과가 관찰되었으며, 이들 중 억제 효과가 높은 것은 200 μg phenol/mZ의 조건에서 가든세이지가 63.
- Disc agair diffusion법eH. pylori 최적배지 plate에 H. pylori균 100 나를 분주하여 멸균 유리봉으로 도말한 다음, 멸균된 disc paperΦ 8 mm)를 올리고 0.45 pm membrane filter로 제균한 각 추출물을 vacuum evaporatore- 농축한 후 멸균수로 희석하여 phenol 함량이 50- 200㎍100㎕가 되도록 조절한 후 각 추출물 100 ㎕를 disc paper에 흡수시키고, 대조구로는 멸균수를 흡수시킨 후 37, C의미 호기성 조건에서 48시간 동안 incubation한 다음, disc 주위의 clear zone 생성 유무를 확인하였다.끄) 액체 배양법은 H.
- 45 pm membrane filter로 제균한 각 추출물을 vacuum evaporatore- 농축한 후 멸균수로 희석하여 phenol 함량이 50- 200㎍100㎕가 되도록 조절한 후 각 추출물 100 ㎕를 disc paper에 흡수시키고, 대조구로는 멸균수를 흡수시킨 후 37, C의미 호기성 조건에서 48시간 동안 incubation한 다음, disc 주위의 clear zone 생성 유무를 확인하였다.끄) 액체 배양법은 H. pylori 최적 액체 배지 (special peptone 0.5 g, NaCl 0.25 g, yeast extract 0.25 g, beef extract 0.2 g 및 pyruvic acid 0.025 g) 5 ㎖ H. pylori 100 ㎕를 분주하고 각 추출물을 0.45 ㎛ membrane filter로 제균하여 0.5 m/씩 주입하고 대조구에는 멸 균수를 사용하여 371의 미호기성 조건에서 48-72시간 동안 incubation한 후 spectrophotometers- 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였으며, 23)표준곡선을 이용하여 균수를 counting 하였다.
- Herb 식물 추출물의 페놀성 물질 함량 측정. 페놀성 화합물은 식품계에 널리 분포되어 있는 2차 대사산물의 하나로서 다양한 구조와 분자량을 가지며, 이들은 phenolic hydroxyl기를 가지고 있기 때문에 단백질 등의 거대 분자들과 결합하는 성질을 가지며, 항산화, 항균 활성 등의 생리활성 기능을 가지는 것으로 알려져 있어 추출물에 함유된 페놀성 화합물의 함량을 조사하였다. Herb 추출물의 phenol 함량을 측정한 결과 Table 3과 같이 각종 herb 추출물의 phen이성 물질의 함량은 134.
대상 데이터
- 시료의 선정. 본 실험에 사용된 40종의 herb는 경북 구미 소재의 K 허브농장에서 재배되고 있는 것을 잎만 채취하여 50℃의 온도에서 건조시킨 후 분말로 만들어 실험에 사용하였다.
- Helicobacter pylori 배양. 실험에 사용한 균주는 위, 십이지장궤양 윈인균인 H. pylori로서 표준균주인 ATCC 43504> 사용하였다. H.
이론/모형
- 추출믈의 Helicobacter pylori 항균활성 검색. Helicobacter pylorie 대한 추출물의 항균활성 검색은 disc agar dililusion method와 액체 배양법으로 실시하였다. Disc agair diffusion법eH.
성능/효과
- 만성 위십이지장 질병과 밀접한 관련이 있으며 위점막 상피 세포간 접합부에서 서식하면서 만성적인 위궤양을 유발하는 Helicobacter pylori는 1983년 Warren과 Marshall이 환자의 위 유문부로부터 분리하여 보고한 이후 많은 연구가 이루어졌다.5) H. pylori의 정확한 오염경로나 전염원에 대하여서는 아직까지 정확히 증명된 바는 없지만 경구적 방법에 의하여 전달 감염되는 것으로 추정하고 있다. 우리나라 성인의 약 80% 정도가 이균에 감염되었으나 임상증상을 나타내지 않고 있다가, 어떠한 발병촉진인자의 영향으로 만성적인 위십이지장 궤양을 유발 한다는 보고 등을 감안하여 볼 때, H pylori 자체에 대한 연구와 병행하여 H.
- Herb 식물 추출물의 disc agar diffusion 방법에 의한 Helicobacter pylorie 대한 항균 효과. H. pylori 평판 최적배지 plate에서 disc 주위의 clear zone 크기를 측정하여 H. pylori 균에 대한 항균효과를 살펴본 결과 Table 1에서와 같이 24종의 herb에서 clear zone이 형성이 되었으며, 이들 중 저해 활성이 강한 것으로는 예루살렘세이지, 크리핑로즈마리, 레몬그라스, 로즈마리, 체리세이지, 세인트존스워트, 루, 타임, 오레가노 및 세이지. 등 약 10종의 herb가 H.
- 페놀성 화합물은 식품계에 널리 분포되어 있는 2차 대사산물의 하나로서 다양한 구조와 분자량을 가지며, 이들은 phenolic hydroxyl기를 가지고 있기 때문에 단백질 등의 거대 분자들과 결합하는 성질을 가지며, 항산화, 항균 활성 등의 생리활성 기능을 가지는 것으로 알려져 있어 추출물에 함유된 페놀성 화합물의 함량을 조사하였다. Herb 추출물의 phenol 함량을 측정한 결과 Table 3과 같이 각종 herb 추출물의 phen이성 물질의 함량은 134.13-533.33 ㎍/mZ로 다양하게 나타났으며, 비교적 phenol성 물질의 함량이 높게 함유되어 있음을 알 수 있었다. 또한 phenol의 함량은 높으나 H.
- pylori 액체배지에 균주를 분주하고, 제균된 각 herb 추출물을 주입한 후 배양하여 spectrophotometeric methods. 균수를 측정한 결과 Table 2에서와 같이 26종의 herb 에서 억제효과가 관찰되었으며, 이들 중 억제 효과가 높은 것은 200 μg phenol/mZ의 조건에서 가든세이지가 63.42%, 예루살렘세 이지가 44.56%, 크리핑로즈마리 가 51.36%, 로즈마리가 78.23%, 체리세이지가 66.05%, 세인트존스워트가 34.23%, 오레가노가 72.19%, 세이지가 34.84% 및 화이트페퍼가 47.24%로 비교적 높은 저해활성을 나타내었다.
- Clark 등24)은 식물체에 함유된 페놀성 물질이 항균활성을 나타낸다고 보고하였고, Shetty 등25), Tabak 등26), Labigne와 Reuse20' 등은 thyme과 cinnamon 추출물이 H: pylori6^ 대한 항균력을 가지며 이는 주출물속에 존재하는 phenol 성분에 의한 것이라고 보고하였다. 따라서 본 연구에 이용한 다양한 종류의 herb 추출물에서 페놀성 물질의 함량이 비교적 높게 나타나 천연 항균제 및 생리활성 물질로의 이용 가능성을 추측할 수 있었다.
후속연구
- 국내에서는 박 등이 amoxicillin, tripotassium dictrato bismuthate, metronidazole을 이용한 병용투여를 통해 50% 내외의 치료효과를 얻었다고 보고하였다. 그러나 이런 항균제 치료는 이에 사용되는 항생제에 대한 내성이 나타나고, 재발가능성이 내재한다는 면에서 계속 적인 연구가 필요하다. 한편 천연물을 이용한 H.
- 33 ㎍/mZ로 다양하게 나타났으며, 비교적 phenol성 물질의 함량이 높게 함유되어 있음을 알 수 있었다. 또한 phenol의 함량은 높으나 H. pylorie 저해효과를 나타내지 않는 것은 추출물에 존재하는 phenol의 종류가 다른 것에 기인하는 것으로 판단되며, 이에 대한 연구는 추가로 진행되어야 할 것으로 생각된다. Clark 등24)은 식물체에 함유된 페놀성 물질이 항균활성을 나타낸다고 보고하였고, Shetty 등25), Tabak 등26), Labigne와 Reuse20' 등은 thyme과 cinnamon 추출물이 H: pylori6^ 대한 항균력을 가지며 이는 주출물속에 존재하는 phenol 성분에 의한 것이라고 보고하였다.
- 이러한 점에서 허브류를 기능성식품의 소재로 가공 . 이용하는 방법이나, 함유된 생리활성물질을 추출하여 목적 지향적 기능성식품용 첨가제로 이용하는 방법에 대한 연구가 수행될 필요가 있다.
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