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문제 정의
- 그 후 2004년과 2005년 경기도 안양 지역에서 토마토 등 주요 작물에 지속적으로 대 발생하고 있으며, 2005년 충남 당진지역에서 비닐 하우스에서 재배한 고추와 인근 노지 포장에서 대 발생하여 우리나라에서 TSWV의 피해가 커질 것으로 우려되고 있다. TSWV는 매우 전형적인 원형반점 병징을 일으키는 바이러스로서 채소작물에 나타나는 주요 병징 및 발생률을 보고하는 바이다.
제안 방법
- TSWV 항혈청은 일본 농업연구센터 식물 바이러스 연구실에서 분양받아 사용하였다. RT-PCRe nucleocapsid protein 유전자와 NSm 유전자를 대상으로 이루어졌으며 각각 TSNCPS (5'-ATG TCT AAG GTT AAG CTC AC-3')와 TSNCPR (5'-TCA AGC AAG TTC TGC GAG TT-3') primer, TSNSmS (5'-ATG TTA ACT CTT TTC GOT AA-3')와 TSNSmR (5'-CTA TAT TTC ATC AAA GGA TA-3') primer를 이용하여 RT-PCR을 수행하였다. 증폭조건은 48℃에서 45분→94℃에서 2분 처리 후94℃에서 30초→50℃ 에서 30초→72℃에서 1분 30초 처리를 35회 하였으며 최종적으로 72℃에서 7분간 처리를 하였다.
- 토마토 반점 위조 바이 러스(73/wEo spotted wilt virus; TSWV)가 2004년 경기도 안양지역에서 토마토, 고추 등을 포함한 14개 채소 작물에서 발생하였다. TSWV 검정은 지표식물 검정, IC/RT-PCR, VC/RT-PCR 및 Total RNA 를 이용한 RT-PCR 방법을 이용하였으며, TSWV가 발생한 작물의 종류는 토마토, 방울 토마토, 고추, 시금치, 치커리, 적치커리, 적겨자, 용설채, 트레비소, 감자, 들깨, 참깨, 호박, 쌈추 이었다. 포장에서의 발생율은 토마토, 고추 등 주요 작물에서 30%에서 100% 발생하였으며, 병징은 대부분 전형적인 원형반점이었으며, 괴저, 위조 및 심한 모자이크 병징으로 진전되었다.
- IF). 상추는 잎이 쭈글쭈글하기 때문에 병징을 알아보기 어렵지만, 작은 원형반점과 함께 전체적으로 위축이 일어나면서 잎 가장자리가 잘 전개되지 못하고 한쪽 잎부터 마름증상이 나타나면서 고사하였다(Fig. 1G). 쌈추의 경우도 상추와 마찬가지로 원형반점 병징이 잘 나타나지 않지만 전체적으로 위축되고 고사하였다.
- RT-PCRe nucleocapsid protein 유전자와 NSm 유전자를 대상으로 이루어졌으며 각각 TSNCPS (5'-ATG TCT AAG GTT AAG CTC AC-3')와 TSNCPR (5'-TCA AGC AAG TTC TGC GAG TT-3') primer, TSNSmS (5'-ATG TTA ACT CTT TTC GOT AA-3')와 TSNSmR (5'-CTA TAT TTC ATC AAA GGA TA-3') primer를 이용하여 RT-PCR을 수행하였다. 증폭조건은 48℃에서 45분→94℃에서 2분 처리 후94℃에서 30초→50℃ 에서 30초→72℃에서 1분 30초 처리를 35회 하였으며 최종적으로 72℃에서 7분간 처리를 하였다.
- 쌈추의 경우도 상추와 마찬가지로 원형반점 병징이 잘 나타나지 않지만 전체적으로 위축되고 고사하였다. 치커리(Fig. 1H)와 적치커리(Fig. II)는 잎에 전형적인 원형반점이 잘 나타났으며 이 중 및 삼중의 원형반점이 나타나고 심하면 황화증상과 함께 고사하였다. 트레비소는 작은 붉은 원형반점이 생기고 잎이 황화되면서 식물체 전체가 고사하였다(Fig.
대상 데이터
- 바이러스 진단은 전자현미경 검경과 Immuno-captured reverse transcription-polymerase chain reaction(IC/RT-PCR) 방법과 Virus captured (VC)/RT-PCR을 사용하였다. TSWV 항혈청은 일본 농업연구센터 식물 바이러스 연구실에서 분양받아 사용하였다. RT-PCRe nucleocapsid protein 유전자와 NSm 유전자를 대상으로 이루어졌으며 각각 TSNCPS (5'-ATG TCT AAG GTT AAG CTC AC-3')와 TSNCPR (5'-TCA AGC AAG TTC TGC GAG TT-3') primer, TSNSmS (5'-ATG TTA ACT CTT TTC GOT AA-3')와 TSNSmR (5'-CTA TAT TTC ATC AAA GGA TA-3') primer를 이용하여 RT-PCR을 수행하였다.
- 조사지역은 경기도 안양과 충남 당진이었으며, 안양지역은 2004년과 2005년, 당진지역은 2005년에 조사하였다. 바이러스병 발생조사는 전형적인 원형반점 병징과 함께 바이러스병 증상을 보이는 것을 육안으로 조사하였으며, 검정한 시료수는 토마토를 비롯한 22개 작물 135점이었다. 작물별 검정 시료수는 감자 3점, 고구마 3점, 고추 22점, 들깨 9점, 미나리 1점, 상추 5점, 시금치 5점, 쌈추 10점, 쑥갓 4점, 아욱 3점, 용설채 2점, 적겨자 10점, 적근대 3점, 적치코리 5점, 참깨 4점, 청겨자 10점, 치코리 5점, 콩(대두) 7 점, 토마토 10점, 방울토마토 2점, 트레비소 5점, 호박 6 점 이었다.
- 바이러스병 발생조사는 전형적인 원형반점 병징과 함께 바이러스병 증상을 보이는 것을 육안으로 조사하였으며, 검정한 시료수는 토마토를 비롯한 22개 작물 135점이었다. 작물별 검정 시료수는 감자 3점, 고구마 3점, 고추 22점, 들깨 9점, 미나리 1점, 상추 5점, 시금치 5점, 쌈추 10점, 쑥갓 4점, 아욱 3점, 용설채 2점, 적겨자 10점, 적근대 3점, 적치코리 5점, 참깨 4점, 청겨자 10점, 치코리 5점, 콩(대두) 7 점, 토마토 10점, 방울토마토 2점, 트레비소 5점, 호박 6 점 이었다.
- 바이러스병 발생조사 및 이병물 채집. 조사지역은 경기도 안양과 충남 당진이었으며, 안양지역은 2004년과 2005년, 당진지역은 2005년에 조사하였다. 바이러스병 발생조사는 전형적인 원형반점 병징과 함께 바이러스병 증상을 보이는 것을 육안으로 조사하였으며, 검정한 시료수는 토마토를 비롯한 22개 작물 135점이었다.
이론/모형
- 바이러스 검정방법. 바이러스 진단은 전자현미경 검경과 Immuno-captured reverse transcription-polymerase chain reaction(IC/RT-PCR) 방법과 Virus captured (VC)/RT-PCR을 사용하였다. TSWV 항혈청은 일본 농업연구센터 식물 바이러스 연구실에서 분양받아 사용하였다.
성능/효과
- 포장에서의 발생율은 토마토, 고추 등 주요 작물에서 30%에서 100% 발생하였으며, 병징은 대부분 전형적인 원형반점이었으며, 괴저, 위조 및 심한 모자이크 병징으로 진전되었다. TSWV가 발생한 포장에서 채집한 꽃노랑 총채벌레(Franklimiella occidentals)를 IC/RT-PCR 검정한 결과 감염율이 90%이었다.
- capitata) 30%, 그리고 감자(Solamum tuerosume: 65%의 이병률을 보였다. 그리고 (Sesamum indicum), 트레비소(Cichorium intybus L.), 호박(Cucnrbita moschata), 방울 토마토(Cherry tomato)에서도 TSWV 감염을 확인하였다.
- 1C). 안양지역의 노지재배 고추에서는 정식 초기에 잎에 작은 원형반점이 생기고 생육이 진전됨에 따라서 황화 위축 증상이 심하게 일어났으며, 당진지역의 하우스 고추에서는 정식 초기 어린묘에 감염되면 고사하고, 생육이 왕성한 식물체에서는 잎에 원형반점이 아주 크고 정확하게 발현되며 이 중 또는 삼중의 원형반점이 나타났다 (Fig. ID). 이러한 병징이 나타난 고추에서는 순이 고사 하고(Fig.
- 토마토를 포함하여 주요 원예작물의 이병율은 다음과 같다. 토마토(Lycopresicon esculentum), 치커리 (Cichorium intybus), 적치코리(Cichoriumintybus), 용설채 (Lactucaa indica var. dracoglossd)는 TSWV 에 100% 감염되었으며, 고추(Capsicum anmum)와 상주 (Lactuca sativa)는 80%, 적겨자(Brassica juncea; Red mustard) 50%, 들깨 (Perilla frutescens var. japonica) 38%, 쌈추(Brass/ca campestris subsp. napus var. pekinensis X Brassica oleracea var. capitata) 30%, 그리고 감자(Solamum tuerosume: 65%의 이병률을 보였다. 그리고 (Sesamum indicum), 트레비소(Cichorium intybus L.
- 채소 작물별 TSWV 병징. 토마토는 어린묘 시기에 감염되면 순이 괴사하여 식물체가 죽어 버리고, 정식 후에 생육이 진전되면서 감염되면 잎에 원형반점이 생기며 새 잎에는 심한 모자이크 증상과 함께 식물체 전체가 황화 고사되고(Fig. 1A) 과일에서도 전형적인 원형반점이 나타나거나 울퉁불퉁 기형이 나타났다(Fig. IB), 방울토마토에서도 과일에 괴저 원형반점 및 기형이 되었다(Fig. 1C). 안양지역의 노지재배 고추에서는 정식 초기에 잎에 작은 원형반점이 생기고 생육이 진전됨에 따라서 황화 위축 증상이 심하게 일어났으며, 당진지역의 하우스 고추에서는 정식 초기 어린묘에 감염되면 고사하고, 생육이 왕성한 식물체에서는 잎에 원형반점이 아주 크고 정확하게 발현되며 이 중 또는 삼중의 원형반점이 나타났다 (Fig.
- TSWV 검정은 지표식물 검정, IC/RT-PCR, VC/RT-PCR 및 Total RNA 를 이용한 RT-PCR 방법을 이용하였으며, TSWV가 발생한 작물의 종류는 토마토, 방울 토마토, 고추, 시금치, 치커리, 적치커리, 적겨자, 용설채, 트레비소, 감자, 들깨, 참깨, 호박, 쌈추 이었다. 포장에서의 발생율은 토마토, 고추 등 주요 작물에서 30%에서 100% 발생하였으며, 병징은 대부분 전형적인 원형반점이었으며, 괴저, 위조 및 심한 모자이크 병징으로 진전되었다. TSWV가 발생한 포장에서 채집한 꽃노랑 총채벌레(Franklimiella occidentals)를 IC/RT-PCR 검정한 결과 감염율이 90%이었다.
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