선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 유산균은 spray dry, 상압건조 등의 일반건조방법 으로는 생균체로서 건조할 수 없다. 그러므로 유산균의 활성을 유지하면서 장기보존할 수 있는 동결건조 방법을 연구하였다. 그러나 동결건조시에 미생물 균체의 손상을 받아 활성과 생존율에 많은 영향을 미치게 되므로 미생물 균체의 생존율을 최대한 높일 수 있는 방법이 요구된다.
- 본 연구에서는 유산균 배양시 감잎 추출물을 첨가하여 유산균수와 pH 및 산도에 변화를 조사하였다. 또한 유산균 배양시 감잎 추출물을 첨가하여 항산화 효과와 vitamin c 함량에 변화를 조사하였다.
제안 방법
- pH meter(Istec720P, Korea)를 이용하여 pH 측정을 하였고, 생균수 측정은 생성된 집락수를 계측하고 그 평균 집락수에 희석배수를 곱하여 배양액 mL당 생균수를 산출하였다. MRS broth에 L. acidophilus MG501, L. brevis MGT9, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311을 5%씩 접종하고 감잎 추출물을 배양액에 0%, 5%, 10%, 15%, 20% 씩 첨가하여 37℃에서 48시간 정치배양하면서 생균수를 조사하였다.
- MRS broth에서 37℃로 72시간 정치배양하면서 생육시간에 따른 생균수를 측정하기 위하여 배양 12시간별로 pH, 산도 및 생균수를 조사하였다.pH meter(Istec7-20P, Korea)를 이용하여 pH 측정을 하였고, 생균수 측정은 생성된 집락수를 계측하고, 그 평균 집락수에 희석배수를 곱하여 배양액 mL당 생균수를 산출하였다29).
- brevis MG 19,L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311을 5%씩 접종하고 감잎 추출물을 배양액에 10%씩 첨가하여 37℃로 72시간 정치배양하면서 생육시간에 따른 생균수를 측정하기 위하여 배양 12시간 별로 pH 측정 및 생균수를 조사하였다. pH meter(Istec720P, Korea)를 이용하여 pH 측정을 하였고, 생균수 측정은 생성된 집락수를 계측하고 그 평균 집락수에 희석배수를 곱하여 배양액 mL당 생균수를 산출하였다.
- brevis MG 19,L. bulgarius MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311을 5%씩 접종하여 배양한 것과 감잎 추출물 10%를 첨가한 배양액을 원심분리(1000xg/15min)하여 균체를 회수하였다. 회수된 균체는 skim milk 10%, sucrose 5%로 구성된 기본 보호제 조성물을 첨가하여 균질화한 후- 40℃로 동결시킨 다음 동결건조기에서 건조하였 다.
- MRS broth에서 37℃로 72시간 정치배양하면서 생육시간에 따른 생균수를 측정하기 위하여 배양 12시간별로 pH, 산도 및 생균수를 조사하였다.pH meter(Istec7-20P, Korea)를 이용하여 pH 측정을 하였고, 생균수 측정은 생성된 집락수를 계측하고, 그 평균 집락수에 희석배수를 곱하여 배양액 mL당 생균수를 산출하였다29).
- casei MG311을 5%씩 접종하고 감잎 추출물을 배양액에 10%씩 첨가하여 37℃로 72시간 정치배양하면서 생육시간에 따른 생균수를 측정하기 위하여 배양 12시간 별로 pH 측정 및 생균수를 조사하였다. pH meter(Istec720P, Korea)를 이용하여 pH 측정을 하였고, 생균수 측정은 생성된 집락수를 계측하고 그 평균 집락수에 희석배수를 곱하여 배양액 mL당 생균수를 산출하였다. MRS broth에 L.
- 45 μ membrane fillter (ADVANTEL TOYO, Japan)로 여과한 후 사용하였다. 감잎의 총 vitamin c의 양을 2, 4-dinitrophenylhydrazine(DNP법)30)에 의해 측정하였으며, 감잎 추출물의 경우는 추출액 중의 일부를 5% meta-phosphoric acid로 희석한 후 총 vitamin c의 양을 측정하였다.
- 회수된 균체는 skim milk 10%, sucrose 5%로 구성된 기본 보호제 조성물을 첨가하여 균질화한 후- 40℃로 동결시킨 다음 동결건조기에서 건조하였 다. 건조된 균체는 분쇄하여 분말화시킨 다음 멸균 생리식염수에 단계 희석하여 BcP배지에 도말한 후 37℃에서 48시간 배양한 다음 생균수를 측정하여 동결 건조 후의 생존율을 측정하였다.
- 동결 건조한 균 원료를 vial에 넣고 온도 37℃, 습도 70%를 유지하는 항온항습기 (SE-96HP) 에서 1개월간 방치시킨 후 시료를 채취하여 멸균 생리식염수에 단계 희석하여 BcP 배지에 도말한 후 37℃에서 48시간 배양한 다음 생균수를 측정하여 가혹조건에서의 생존율을 측정하였다.
- 라디칼 소거작용은 인체의 질병과 노화를 방지하는데 대단히 중요한 역할을 한다. 따라서 전자공여능 측정은 DPPH 라디칼 소거법으로 측정하며, DPPH는 비교적 안정한 라디칼을 갖는 물질로 항산화 효과가 있는 물질과 만나면 라디칼이 소거되어 탈색되는 점을 이용하여 항산화 효과를 검정한다.
- 본 연구에서는 유산균 배양시 감잎 추출물을 첨가하여 유산균수와 pH 및 산도에 변화를 조사하였다. 또한 유산균 배양시 감잎 추출물을 첨가하여 항산화 효과와 vitamin c 함량에 변화를 조사하였다.
- 본 연구는 감잎 추출물을 이용하여 L. acidophilus MG501, L. brevis MG 19, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311 균종에 대한 생육조건 및 동결건조 보호제로서의 효과, 가혹조건에서의 경시변화, vitamin C 함량 변화, DPPH 라디칼 소거효과, SOD 유사활성을 조사하였다.
- 시료 10 m止에 동량의 증류수를 가하여 1% pheno phthalein alcohol 0.5 mL를 가한 후 0.1N NaOH 용액으로 적정하여 엷은 홍색이 30초간 유지되는 시점에서의 소비량을 측정하여 다음 식에 의해 총산을 적정하여, 그 적정값을 lactic acid 함량(%)으로 환산하여 표시하였다.
- 을 응용하여 각 시료의 DPPH(l, l-diphenyl-2-pic- rylhydrazyl) radical 전자공여능을 측정하였다. 시험관에 0.15M DPPH 용액 4 mL와 시료 0.4 mL을 넣고 잘 혼합한 후 실온에서 30분간 방치한 다음 520 nm에서 흡광도를 측정하였으며 따로 공시험을 하여 대조구의 흡광도를 같은 조건에서 측정하였다. 이들 측정값을 다음 식에 대입하여 DPPH radical 소거활성을 계산하였다.
- 시료 30 g에 증류수 1L을 넣어 항온수조(water bath)에서 70℃로 10분간 중탕 처리하여 1차 추출물을 얻었으며, 2차 추출물은 1차 추출물에서 남은 시료를 다시 증류수 1L을 넣어 항온수조에서 70℃로 10분간 중탕 처리하여 얻었다. 이들 1차 추출물과 2차 추출물을 혼합하고 여과지(Whatman No. 2)로 걸러서 얻어진 것을 갈색 병에 보관하면서 동결건조 보호제 및 유산균 생육에 첨가제로 사용하였으며, 항산화 효과 측정에 사용하였다. 시료보관은 냉암소인 냉장고(4℃)에서 보관하여 사용하였다.
- 전자공여능(electron donating ability, EDA)은 Blois 방법3i)을 응용하여 각 시료의 DPPH(l, l-diphenyl-2-pic- rylhydrazyl) radical 전자공여능을 측정하였다. 시험관에 0.
대상 데이터
- brevis MG 19,L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311에 감잎 추출물 10%를 첨가한 배양액(l,000xg)에서 15분간 원심분리한 상징액을 0.45 μ membrane fillter (ADVANTEL TOYO, Japan)로 여과한 후 사용하였다. 감잎의 총 vitamin c의 양을 2, 4-dinitrophenylhydrazine(DNP법)30)에 의해 측정하였으며, 감잎 추출물의 경우는 추출액 중의 일부를 5% meta-phosphoric acid로 희석한 후 총 vitamin c의 양을 측정하였다.
- lactis MG530(OO-L. easel MG311(-0).
- 본 연구에 사용된 균주는 (주)메디오젠에서 L.acidophilus MG501, L. brevis MG19, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311을 분양받아 MRS agar 배지(Difco, Maryland, USA)에 stab culture 하여 4℃에서 냉장 보관하면서 2주마다 계대하여 사용 하였다. 또한 장기보존을 하기 위해서 멸균된 20%(W/V)glycerol(Shinyo chem.
- 본 연구에 사용한 감잎(persimmon leaf; Diospyros kaki Thunberg)은 경남 하동군 화개농협에서 제공받아 감잎의 품질변화를 최소화시키기 위해 냉장고(4℃)에 보관하면서 감잎 추출물의 원료로서 사용하였다.
- 2)로 걸러서 얻어진 것을 갈색 병에 보관하면서 동결건조 보호제 및 유산균 생육에 첨가제로 사용하였으며, 항산화 효과 측정에 사용하였다. 시료보관은 냉암소인 냉장고(4℃)에서 보관하여 사용하였다.
- 유산균 증식용 배지는 MRS 배지28)(Difco, Maryland , USA)를 사용하였고, 생균수 측정용 배지로는 glucose 함량을 1%로 높인 BcP plate count agar (Eiken chemical, Japan)를 사용하였고, 희석수로는 0.9% 생리식염수를 사용하였다.
이론/모형
- Superoxide 라디칼( •O2-) 소거활성은 lio 등32)의 방법에 따라 xanthine-xanthine oxidase cytochrome c 환원법으로 측정하였다. 즉, 시료 0.
성능/효과
- 832를 나타내었다. 48시간 이후에 균수는 감소하였으며 pH는 낮아지고 산도는 높아짐을 알 수 있었다.
- DPPH 라디칼 소거효과는 감잎 추출물 10% 첨가시에 높았으며 그중에서도 L. brevis MG19에 감잎 추출물을 10% 첨가하여 배양한 경우 효과가 가장 높게 나타났다. SOD 유사활성은 전반적으로 대조군보다 비교적 낮은 활성을 나타냈다.
- L brevis MG19의 감잎 추출물 10% 첨가한 전자공여능은 43.4%로 가장 높게 나타났으며 대조군보다 높게 나타났다.
- L bulagricus MG515 는 감잎 추출물 10% 첨가한 전자공여능은 대조군보다 31.96%로 높게 나타났으며 L. lactic MG530는 대조군보다 낮게 나타났다.
- L. casel MG311, L, bulgaricus MG515에서 각각 대조군보다 약 2배 증가한 64.51 mg/100g, 115.17 mg/100g으로 함량이 L. lactic MG530에 vitamin C 함량 190.26 mg/100 g보다는 전반적으로 낮은 수치를 나타냈었으며 L. brevis MG19는 대조군보다 약간 감소한 것으로 나타났다.
- 감잎 추출물 10% 첨가한 농도에서 최적에 균수가 나타나는지 확인하기 위하여 감잎 추출물 농도를 각각 0%, 5%, 10%, 15%, 20%로 첨가하여 생균수와 pH 및 산도를 측정한 결과, L. acidophilus MG501, L. brevis MG19, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. caseiMG311 모두 감잎 추출물 10% 첨가한 배지에서 균수가 최적임을 알 수 있었다.
- 동결건조 보호제 사용시 L. acidophilus MG501은 생존율이 감소하는 경향을 보였지만 경시변화에서는 생존율이 대조군에 비해 증가하는 경향을 나타냈다. 또한 L.
- 동결건조 보호제로서의 효과를 조사한 결과, skim milk 10%(w/v), sucrose 5%(w/v) 로 구성된 기본 보호제 조성물에 고형분함량 4.83 mg/g인 감잎 추출물 10% (v/v)을 첨가한 경우 Table 2에서와 같이 L. aciophilus MG501 균주의 경우 대조군과 비교하여 약 30% 정도 생존율 감소를 보였으며 L. brevis MG19 및 L. bulgaricus MG515의 경우는 약 10% 정도 생존율 감소를 보였다. 반면에 L.
- 동결건조균 원료에 대한 가혹조건에서의 경시변화를 조사하기 위하여 생존율을 측정한 결과 감잎 추출 물 10% 첨가하여 동결 건조한 균 원료를 온도 37℃, 습도 70%를 유지하여 항온 항습기에서 한 달간 방치시킨 후 생존율(Table 3)은 L. acidophilus MG501의 경 우 대조군에 비해 약 2.5%, L. bulgaricus MG515은 2.8%, L. lactis MG530와 L. casei MG311의 경우 약 2%의 생존율 증가를 보여 가혹조건에서 균의 생존율을 연장시키는 역할을 하는 것으로 보이며, L. brevis MG19의 경우는 약 7% 정도 감소하는 경향을 보였다.
- 2정도 낮아진 것을 볼 수 있었다. 또한 유산균증식에 vitamin c에 의해 균증식이 활발히 이루어지는 경향이 있으므로 감잎 추출물에 함유된 vitamin c의 작용으로 인하여 대조군보다 균증식이 증가하는 경향을 보였다,
- bulgaricus MG515의 경우는 약 10% 정도 생존율 감소를 보였다. 반면에 L. lactis MG530는 약 10% 정도 생존율 증가를 보였으며 L. casei MG311은 거의 동등한 효과를 나타냈다. Vitmin C 함량 변화는 L.
- bulgaricus MG515의 경우는 약 10% 정도 생존율 감소를 보였다. 반면에 L. lactis MG530에서는 대조군보다 약 10% 정도 생존율 증가를 보였으며 L casei MG311 균에서는 거의 동등한 효과틀 나타냈다.
- 본 실험에서는 lio 등의 방법을 이용하여 감잎 추출 물의 SOD 유사활성을 측정한 결과 Fig. 8과 같이 L.acidophilus MG501, L. brevis MG19, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311은 전반적으로 대조군보다 SOD 유사활성이 낮게 나타냈었다. Park 등 감잎으로부터 vitamin C, SOD 유사활성 물질을 효과적으로 이용하기 위해서는 80℃ 또는 90℃에 3분 동안 추출하는 것이 효과적이라고 하였다.
- 유산균 배양시 고형분함량 4.83 mg/g인 감잎 추출물 첨가에 따른 vitamin C 함량을 측정한 결과 Fig. 6과 같 이 L. lactic MG530에서 대조군보다 약 2배 증가한 190.26 mg/100 g으로 함량이 가장 높았으며 L. acido philus MG501가 대조군보다 약 3배 감소한 56.05 mg/100g으로 가장 낮게 나타났다.
- 유산균 생육은 L. acidophilus MG501, L. brevis MG 19, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MG311 에서 각각 37℃/48hr 동안 배양한 후 3.2x109cfu/mL , 2.9xl09cfu/mL, l.lxlO9cfu/mL, 1.6x 109cfu /mL, 3xl09cfu/mL 생균수을 나타냈으며 pH는 3.82~3.88, 산도는 1.697〜 1.842를 나타내었다. 반면에 감잎 추출물 10% 첨가에 4.
- 이 결과는 동결건소 보호제 사용시 L. lactis MG530, L. casei MG 311 균에서 감잎 추출물에 존재하는 vitamin C의 영향으로 생존율이 증가하는 경향을 보였다, 따라서 고형분 함량 4.83 mg/g인 감잎 추출물 2%에서 균종에 따라 보호제로서 이용할 수 있을 것으로 사료된다
- 이상의 결과로 L. acidophilus MG501, L. brevis MG 19, L. bulgaricus MG515, L. lactis MG530, L. casei MGS311 모두 최적 배양시간이 48시간임을 확인하였으며, MRS broth 배지에서 유산균을 배양할 때보다 균수가 증가하는 결과를 볼 수 있었으며 pH는 약간 낮아졌 고 산도는 0.2정도 낮아진 것을 볼 수 있었다. 또한 유산균증식에 vitamin c에 의해 균증식이 활발히 이루어지는 경향이 있으므로 감잎 추출물에 함유된 vitamin c의 작용으로 인하여 대조군보다 균증식이 증가하는 경향을 보였다,
- 이와 같은 결과로 L. brevis MG19와 L. bulagricus MG515에 감잎 추출물을 첨가한 다른 균종보다 전자 공여능이 높게 나타났으며 유산균 발효에 영향을 주는것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.