선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 소풍산의 피부염에 대한 효능을 평가하기 위하여 수행하였다.
- 본 연구에서는 소풍산의 피부염에 대한 효능을 평가하기 위하여, DNCB로 BALB/c mouse에 접촉성피부염을 유발하여 귀 부종의 두께 및 immunoglobulin, interleukineSe 함량을 평가하였다.
제안 방법
- 부종이 유발된 마우스의 오른쪽 귀를 잘라 무게를 측정하고 귀 무게의 30배에 해당되는 량의 PBS-T (PBS + 0.1% Tween20)를 첨가하여 homogenizer (IKA®-Werkez Germany) 로조직을 마쇄한 후, 12, 006%에서 10분간 원심분리하여 상등액을 얻었다. Cytokine 측정을 위한 상등액은 사용 전까지 -70℃에 보관하였다.
- 5g/kg을 투여한 실험군 (T3)으로 나누어 각 군당 5마리씩 총 25마리를 사용하였다. 실험동물은 5마리씩 분리하여 polycarbonate cage에 수용하고, 온도 20~25 ℃ 및 습도 30~35%로 조절된 항온항습 및 공기청정 시스템(동물사육시스템, 한국)에서 사육하였으며, 명암주기는 12/12시간으로 조절하였다. 사료(한란, 한국)및 음용수는 자유롭게 섭취할 수 있도록 공급하였다.
- 실험동물은 male BALB/c mouse(오리엔트, 한국)를 사용하였으며, 기제(olive oil + acetone)만을 처치하여 접촉성 피부염 (귀부종)을 유도하지 않고, saline을 2주간 투여한 normal군, DNCB로 귀부종을 유도하고 saline을 2주간 투여한 control군, DNCB 로 귀부종을 유도하고 소풍산 (Sopung-san; SPS) 을 0.5g/kg으로 2주간 투여한 실험군 (Tl), L5g/kg으로 2주간 투여한 실험군 (T2), 2.5g/kg을 투여한 실험군 (T3)으로 나누어 각 군당 5마리씩 총 25마리를 사용하였다. 실험동물은 5마리씩 분리하여 polycarbonate cage에 수용하고, 온도 20~25 ℃ 및 습도 30~35%로 조절된 항온항습 및 공기청정 시스템(동물사육시스템, 한국)에서 사육하였으며, 명암주기는 12/12시간으로 조절하였다.
- 1% DNCB 용액을 사용하였다. 실험시작 1주일 전에 20成 의 1% DNCB 용액을 마우스의 오른쪽 귀안에 도포하여 sensitization한 후에 1주일에 3번씩 20 以의 1% DNCB 용액을 2 주 동안 반복적으로 도포하여 접촉성 피부염을 유발하였다. 귀 두께는 Micrometer (Mitutoyo, Kawasaki, Japan)를 이용하여 측정하였다 (Scheme.
- 조직중의 IL-6의 함량을 ELISA로 측정하였다. DNCB를 처리한 control군에서는 normal군에 비교하여 유의성있는 가를 나타내었으나, 소풍산을 처치한 실험군 Tl, T2, T3에서는 유의성 있는 변화를 나타내지 못하였다.
- 조직중의 IL-고의 함량을 ELISA로 측정하였다. DNCB를 처리한 control군에서는 normal군에 비교하여 유의성있는 증가를 나타내었으나, 소풍산을 처치한 실험군 Tl, T2, T3에서는 유의성 있는 변화를 나타내지 못하였다.
- 혈청중 IgG의 함량을 ELISA로 측정하였다. DNCB를 처리한 control군에서는 normal군에 비교하여 유의성있는 증가를 나타내었으며, 소풍산을 처치한 실험군 Tl, T2, T3에서는 유 의성 있게 농도가 감소하였다.
- 혈청중의 IgE의 함량을 ELISA로 측정하였다. Contro군은 DNCB에 의해 IgE의 농도가 유의성있게 증가하지 않았으며, 소풍 산 추출물도 유의한 변화를 유도하지 못하였다.
대상 데이터
- 대원약업사(대구)에서 구입한 소풍산 (대구한의대학교 원내 처방 처치코드 D027) 20첩 분량의 약재 1360g을 물 4L에 넣고 3시간 전탕한 후 추출물을 거어즈로 1차 여과하고 3000xg에서 3분간 원심분리하고, 상층액만을 취하여 0.2iim filter (Nalgene, New York, USA)로 여과하였다. 이 여과액을 rotary evaporator (EYELA, Tokyo, Japan)로 동결건조하고 사용 때까지 -20 ℃ 에서 보관하였다.
- 본 연구에 사용된 소풍산은 대구한의대학교 원내처방 D027의 방으로 浮萍草, 12g, 甘草, 苦蔘, 當歸, 麻子仁, 木通, 防風, 生地黃, 石膏, 蟬退, 連翹, 牛旁子, 蒼朮, 荊芥, 胡麻子 각 4g으로 구성되어 白屑風, 面游風, 乾癬, 皮膚瘙痒症을 치료하는데 사용되고 있다.
- 접촉성 피부염을 유발하기 위해 acetone과 olive oil을 4:1로 섞어 만든 기제에 Lchloro-2, 4-dinitTobenzene (DNCB)를 녹여서 만든 1% DNCB 용액을 사용하였다. 실험시작 1주일 전에 20成 의 1% DNCB 용액을 마우스의 오른쪽 귀안에 도포하여 sensitization한 후에 1주일에 3번씩 20 以의 1% DNCB 용액을 2 주 동안 반복적으로 도포하여 접촉성 피부염을 유발하였다.
데이터처리
- 결과 통계처리는 평균 士 표준편차로 나타내었으며, 평균치 간의 유의성은 Student's T-test를 이용한 후 p값이 0.05미만일 때 유의한 것으로 판정하였다.
이론/모형
- Ⅱ.-고와 IL-6 는 시판되는 ELISA kit (Pierce Endogenz Rockford, IL, USA)를 구입하여 사용자 방법에 준하여 측정하였다.
성능/효과
- 혈청중 IgG의 함량을 ELISA로 측정하였다. DNCB를 처리한 control군에서는 normal군에 비교하여 유의성있는 증가를 나타내었으며, 소풍산을 처치한 실험군 Tl, T2, T3에서는 유 의성 있게 농도가 감소하였다.
- 본 실험에서의 혈청 중 IgG의 함량은 control군이 normal군에 비교하여 유의성있게 IgG의 수준을 증가시켰으며, 소풍 산을 처치한 실험군 Tlz T2, T3에서는 control군에 비교하여 유의성 있는 감소를 나타내었다.
- 본 실험에서의 혈청중 IgE의 함량은 contr이군이 normal군에 비교하여 유의성있는 증가를 나타내지 않았으며, 소풍산 추출물도 유의한 변화를 유도하지 못하였다. 그러나 이전의 Farraj 등 28}과 Albers 등2"의 연구에서는 BALB/c mice의 귀에 DNCB틀처치한 경우 IgE가 증가함을 보고한 바 있으므로, 염증 유발 기간 또는 용량 등에 대한 연구가 필요할 것으로 생각된다.
- 본 연구에서 DNCB만을 처치한 control군에서는 normal군에 비교하여 유의한 cytokine의 증가를 보였으나, 실험군에서는 모두 유의한 변화를 나타내지 못하였다.
- 본 연구에서도 DNCB로 접촉성 피부염을 유발한 control군은, 기제만을 도포한 normal군에 비교하여 유의성 있는 귀의 부종을 유발하였고, 소풍산을 투여한 실험군 T2, T3에서는 귀 부종의 유의한 감소를 유도하였다. 이러한 결과는 보중익기탕을 이용한 Nakata 등의 연구约와도 일치하는 결과이며, 이는 소풍 산이 염증성 부종의 개선에 관여할 수 있음을 시사하고 있다.
후속연구
- 유의한 변화를 유도하지 못하였다. 그러나 이전의 Farraj 등 28}과 Albers 등2"의 연구에서는 BALB/c mice의 귀에 DNCB틀처치한 경우 IgE가 증가함을 보고한 바 있으므로, 염증 유발 기간 또는 용량 등에 대한 연구가 필요할 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.