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문제 정의
- 따라서 본 연구에서는 우리나라 연안에서 가장 많은 양식생산량을 보이고 있는 넙치를 사용하여 저 염분(15 psu)에서 장기 사육한후 염분변화에 따른 생리학적 반응 및 생존율을 비교 . 조사하여, 저 염분 지하해수와 담수화 현상에 따른 삼투압 조절과 관련된 생리학적 기초연구가 되고자한다.
제안 방법
- 항체 반응을 유도한 다음, 1470 WIZARD Automatic Gamma Counter (EG and G Wallac, Finland)를 사용하여 Radioimmunoassay (RIA)에 의해 측정하였다. Glucose, Na+, K+, Cl", aspartate aminotransferase (AST) 및 alanine aminotransferase (ALT)는 Chemistry System (VITROS DT60 II, VITROS DTE II, DTSC II Chemistry System, Johnson and Johnson Clinic시 Diagnostics Inc., New York, USA)에 의해 분석하였다.
- 30일 동안 15psu에서 순화 사육한 양식 넙치 (평균 전장: 20.8cm, 평균체중 96.1g)를 사용하여 염분변화에 따른 혈액학적 변화 (cortisol, glucose, Na+, C「, K+, AST, ALT, hematocrit, RBC, hemoglobin) 및 생존율을 조사하였다. 사육수를 실험개시시 15 psu로부터 0 psu (group I, GI)와 35 psu (group II, G II)로 30분 이내에 교환하였다.
- 있다. 따라서 본 연구에서는 우리나라 연안에서 가장 많은 양식생산량을 보이고 있는 넙치를 사용하여 저 염분(15 psu)에서 장기 사육한후 염분변화에 따른 생리학적 반응 및 생존율을 비교 . 조사하여, 저 염분 지하해수와 담수화 현상에 따른 삼투압 조절과 관련된 생리학적 기초연구가 되고자한다.
- 이후 다시 0 psu구는 35 psu로 사육수를 교환하였으며 (Gro叩 I, G I), 35 psu구는 0 psu로 사육 수를 교환하여 5일간 유지하였다(Group II, G II). 사육수의 염분 교환은 유입하는 해수와 담수를 조절하여 농도를 맞추어 주었다. 사육수의 염분 교환은 30분이내로 하였다.
- 생존율은 매일 폐사 개체수를 파악하여 폐사율을 구하고, 이로부터 생존율을 역산하였다. 각 실험에서 얻어진 자료값 사이의 유의차 유무는 SPSS-통계 패키지 (SPSS 9.
- 사육수의 염분 교환은 30분이내로 하였다. 실험구는 혈액채취와 생존율 조사그룹으로 구분하여 각각 2반복으로 실시하였다.
- 모든 실험수조는 FRP 원형수조 (250L)로 수량은 180 L였다. 실험수조의 1일 환수율은 수용적의 30배, 용존산소량은 5 ppm 이상이 되도록 에어레 이션하며 조절하였다. 사육 수온은 22.
- 실험어의 혈액은 채혈시각에 맞추어 15psu 해수에서 실험 전, 실험후 3, 6, 24, 120 및 240시간째에 각 실험 구에서 5마리 씩 무작위 추출하여 20IU mL1 heparin sodium (Sterile Solution HEPARIN Inj., Choongwae Pharma Corporation, HwaSung-Gun, Korea) 처리한 3 |iL-23 G의 일회용 plastic syringe (Dong Shin Medical Instruments Co., KongJu-Si, Kor曲로 마취 없이 1 분 이내에 미 병부의 혈관에서 채혈하였다. 개체별로 채취한 혈액은 L5 卩L Microtube (MCT-175-C, AXYGEN SCIENTIFIC INC.
- 실험전 30일 동안 15 psu 해수에서 순화시켜 사육하던 어류를 각각 0과 35 psu로 사육수를 교환하여 5일 동안 사육하였다. 이후 다시 0 psu구는 35 psu로 사육수를 교환하였으며 (Gro叩 I, G I), 35 psu구는 0 psu로 사육 수를 교환하여 5일간 유지하였다(Group II, G II).
- 6 g인 넙치를 사용하였으며, 경북 울진군 인근 육상수조 양식장에서 사육중인 것을 구입하였다. 이들 실험 어는 대형 콘크리트 수조 2개 (18 nP)에 수용하여 상업용 터봇 사료(수분 10%, 조단백질 56%, 조지방 12%, 조섬유 1.7%, 회분 12%, 인 1.9%, 비타민 A IQOOOIUkgT, 비타민 D3 1, 750 IU kgT, 비타민 E 200mg kg' 비타민 C 250 mg kg-1, Le Couessant, France)를 만복공급하면서 3 주간 안정 시킨 다음, 실험에 사용하였다. 유수식 사육시스템인 실험수조를 사용하였으며, 해수(35psu)는 모래 여과 후 사용하였고, 담수(0 psu)는 지하수를 사용하였다.
- , Union City, USA)에 분주하였다. 이중 혈액성상 분석용 시료는 즉시 혈액분석기 (Exc아1500, USA)로 분석하였으며, 혈장분석용 시료는 5, 600g로 5분 동안 원심분리 (Micro Haemtocrit Centrifuge, Hawksley and Sons Ltd., W-Sussex, UK)에 의해 혈장을 추출하여 一70°C의 초저온 냉 동고 (SW-UF-200, SAMWON Freezing Engineering co., Busan, Korea)에 보관하였다.
- TKCO Cortisol RIA Kit (DPC, USA)로 항원 . 항체 반응을 유도한 다음, 1470 WIZARD Automatic Gamma Counter (EG and G Wallac, Finland)를 사용하여 Radioimmunoassay (RIA)에 의해 측정하였다. Glucose, Na+, K+, Cl", aspartate aminotransferase (AST) 및 alanine aminotransferase (ALT)는 Chemistry System (VITROS DT60 II, VITROS DTE II, DTSC II Chemistry System, Johnson and Johnson Clinic시 Diagnostics Inc.
대상 데이터
- , KongJu-Si, Kor曲로 마취 없이 1 분 이내에 미 병부의 혈관에서 채혈하였다. 개체별로 채취한 혈액은 L5 卩L Microtube (MCT-175-C, AXYGEN SCIENTIFIC INC., Union City, USA)에 분주하였다. 이중 혈액성상 분석용 시료는 즉시 혈액분석기 (Exc아1500, USA)로 분석하였으며, 혈장분석용 시료는 5, 600g로 5분 동안 원심분리 (Micro Haemtocrit Centrifuge, Hawksley and Sons Ltd.
- 유수식 사육시스템인 실험수조를 사용하였으며, 해수(35psu)는 모래 여과 후 사용하였고, 담수(0 psu)는 지하수를 사용하였다. 모든 실험수조는 FRP 원형수조 (250L)로 수량은 180 L였다. 실험수조의 1일 환수율은 수용적의 30배, 용존산소량은 5 ppm 이상이 되도록 에어레 이션하며 조절하였다.
- 실험어는 평균전장 20.8± 1.1 cm, 평균체중 96.1 ±18.6 g인 넙치를 사용하였으며, 경북 울진군 인근 육상수조 양식장에서 사육중인 것을 구입하였다. 이들 실험 어는 대형 콘크리트 수조 2개 (18 nP)에 수용하여 상업용 터봇 사료(수분 10%, 조단백질 56%, 조지방 12%, 조섬유 1.
- 9%, 비타민 A IQOOOIUkgT, 비타민 D3 1, 750 IU kgT, 비타민 E 200mg kg' 비타민 C 250 mg kg-1, Le Couessant, France)를 만복공급하면서 3 주간 안정 시킨 다음, 실험에 사용하였다. 유수식 사육시스템인 실험수조를 사용하였으며, 해수(35psu)는 모래 여과 후 사용하였고, 담수(0 psu)는 지하수를 사용하였다. 모든 실험수조는 FRP 원형수조 (250L)로 수량은 180 L였다.
데이터처리
- 이로부터 생존율을 역산하였다. 각 실험에서 얻어진 자료값 사이의 유의차 유무는 SPSS-통계 패키지 (SPSS 9.0, SPSS Inc., Chicago, USA)에 의한 ANOVA 및 Duncan's multiple range test로 P=0.05 수준으로 검정하였다.
이론/모형
- 혈장 cortisol 농도는 Donaldson(1981)의 방법에 따라Coat-A-Count TKCO Cortisol RIA Kit (DPC, USA)로 항원 . 항체 반응을 유도한 다음, 1470 WIZARD Automatic Gamma Counter (EG and G Wallac, Finland)를 사용하여 Radioimmunoassay (RIA)에 의해 측정하였다.
성능/효과
- G II구는 35 psu에서 Opsu 로 교환한 240시간째에 cortisol, glucose 및 AST에서 유의적으로 높아진 값을 보였다. 두 실험구에서 생존율은 35psu에서보다 Opsu에서 낮아지는 것으로 나타났다. 본연구 결과 고염분과 저 염분변화에 따른 cortisol, glucose, Na+, K+, C「및 생존율에 대한 기초자료로 유용할 것이다.
- 본 연구 결과 15psu에 적응된 어류를 35psu로 사육 수를 교환시 에는 stress 반응이 나타나지 않았으나, Opsu 로 교환시에는 저염분에 대한 고삼투압 조절을 하는 것으로 나타났으나, 생존율 및 stress 반응 등으로 추측하여볼 때, 많은 에너지를 소비하고 있는 것으로 보여진다.
- 농도가 증가하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서 ALT보다는 AST 효소가 더 많은 영향을 미친 것으로 나타났다. 또한 다른 항목에서와 같이, G II구보다는 G I 구에 많은 영 향을 준 것으로 판단된다.
- 2006b, e). 본연구에서 GII구의 Hematocrit는 차이를 보이나, 다른 항목에서는 차이를 보이지 않아, 혈액 산소수급에는 문제가 없는 것으로 사료된다.
- 9ngmLT)로 보이하였다. 이것으로 볼 때, 본 연구에서 cortisol 농도는 실험전 15 psu 염분에서 순응되었음을 추측하여 볼 수 있다. 또 한 이 값은 다른 어종에서의 stress 전 안정 값과도 비슷하였다 (Barton and Iwama 1991; Pankhurst and Sharpies 1992; Carragher and Rees 1994; Bandeen and Leatherland 1997).
후속연구
- 두 실험구에서 생존율은 35psu에서보다 Opsu에서 낮아지는 것으로 나타났다. 본연구 결과 고염분과 저 염분변화에 따른 cortisol, glucose, Na+, K+, C「및 생존율에 대한 기초자료로 유용할 것이다.
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