선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 실험에서는 다른 식물병의 방제에 사용되는 살균제를 선발하여 콩 검은뿌리썩음병에 대한 방제 효과를 실내와 온실 검정을 통하여 조사하고 우수한 효과를 보이는 살균제를 선발함으로써 포장에서의 방제체계를 확립하는 기초로 삼고자 하였다.
가설 설정
- b) The fungicidal activity was calculated by comparing the fungal growth in the treattnent not applied with a fungicide with one in the fungicide treatment.
제안 방법
- 05 pg mL-1로 조절하였다. C. ilicicola SC03-15는 25℃의 PDA에서 10일간 배양한 다음, 균총 선단에서 지름 5 mm의 균사 조각을 떼어 내어 정해진 농도의 살균제를 첨가한 PDA 배지의 중앙에 균사 표면이 배지에 직접 닿도록 접종하였다. 접종하고 25℃에서 10일간 배양한 후, 균총의 직경을 측정하였다.
- PDA배지에서 SC03-15의 자낭각을 형성시키기 위해서 분생포자를 2 X io5 로 조절한 다음, 50 yL를 PDA에 분주하고 유리봉으로 도말하고 25℃의 암상태에서 6일간 배양하였다. 균사가 배지 위를 완전히 덮었을 때 공중균사를 제거하고, 25℃에서 12시간 간격으로 광을 조사하며 병원균은 3주간 배양하여 자낭각을 형성시켰다. 살균증류수를 사용하여 형성된 자낭각을 수확하여 자낭각의 농도를 500 개 로 조절한 후 실험 pot 당 10 mL씩을 토양에 관주하여 접종하였다.
- Fusarium spp. 등 기타 균이 섞여 나오는 경우 균을 확보하기 어려우므로 지속적으로 균총을 육안으로 관찰하여 기타 균과 구분하였고 현미경 관찰을 통해 검은 뿌리 썩음 병균을 확인하였다. 지제부에서 자낭각이 관찰되는 시료는 검은뿌리썩음병균일 확률이 높기 때문에 멸균한 핀셋으로 지제부에서 자낭각을 떼어내어 PDA 배지에 치상 하였다.
- 또한 96-well microtiter plate법을 사용하여 병원균의 포자 발아에 미치는 살균제의 효과를 검정하였다. 병원균의 포자를 수확하기 위하여 C.
- KucharekQOOO)은 경종적 방법으로 토양의 수분관리가 중요하며, 포장에서의 병든 식물의 제거와 병이 발생한 포장의 격리 등 포장의 위생관리를 철저히 하는 것이 중요하다고 보고하였다. 또한 검은뿌리썩음병에 대한 강한 저항성 품종은 아직 육종되지 않았지만, Florumer가 다른 품종에 비하여 저항성을 보이기 때문에 저항성 품종의 재배를 장려하였다. 또한 효율적인 방제를 위해서 저항성 품종의 재배와 더불어 정식 2 ~ 3주전에 metam sodium 을 이용하여 토양 훈증을 한다면 더욱 효과가 증가할 것이라고 하였다.
- 멸균한 시약스푼을 사용하여 병원균의 공중균사를 제거하고, 25℃의 광상태에서 다시 5일간 배양하였다. 병원균을 배양한 PDA 배지에 20 mL의 PDB를 부어 배지 표면에서 포자를 수확한 후 거즈에 여과하여 균사체를 제거하였으며, 현미경으로 포자 현탁액을 관찰하여 포자의 농도를 1 X 104 mL-1로 조절하였다. 살균제는 300 ug mL-1의 streptomycin이 첨가된 멸균수에 용해시킨 다음, 준비한 병원균의 포자현 탁액에 정해진 농도가 되도록 희석하였다.
- 실험에 사용한 한남콩은 지름이 10 cm인 pot에 파종한 후, 본엽 2엽이 전개될 때까지 온실에서 재배하였다. 병원균을 접종하기 2일 전과 접종하고 2일 후에, 처리 용액의 농도를 100 pg ml-1로조절한 살균제를 pot 당 10 mL 씩 토양에 관주하여 방제 효과를 조사하였다. 병원균의 접종은 실내에서 형성시킨 C.
- 살균제를 정해진 농도로 처리한 각각의 포자 현탁액은 96-well microtiter plate에 100 μL씩 분주한 후, 25℃ 암상태에서 24시간 150 rpm으로 진탕 배양하였다. 병원균의 포자 발아와 균사 생장 정도는 현미경 관찰을 통하여 다음과 같은 지수로 조사하였는데, 포자가 전혀 발아 하지 못한 것은 0, 포자는 발아하였으나 균사를 뻗지 못한 것은 1, well 면적의 25% 미만이 균사로 덮인 것을 2, weU 면적의 25% 이상 50% 미만이 균사로 덮인 것은 3, well의 50 이상부터 75% 미만까지 균사로 덮인 것은 4, well의 75% 이상를 균사로 덮은 것을 5, well을 완전히 덮어 자란 것을 6으로 하여 조사하였다.
- 병원균의 포자를 수확하기 위하여 C. ilicicola SC03-15 를 PDA에 접종하고, 25℃의 암상태에서 10일간 배양하였다. 멸균한 시약스푼을 사용하여 병원균의 공중균사를 제거하고, 25℃의 광상태에서 다시 5일간 배양하였다.
- 살균제의 균사생장 억제 효과는 한천희석법을 통하여 조사하였다. 살균제는 300 pg mL-1의 streptomycin 용액을 사용하여 희석하였는데, neoasozin을 비롯한 16종은 배지에서의 최종 농도가 500, 50, 5, 0.5 ug 가 되도록 PDA 배지에 첨가하였으며, nuarimol을 비롯한 8종의 살균제는 배지에서의 최종농도를 50, 5, 0.5, 0.05 pg mL-1로 조절하였다. C.
- 균사가 배지 위를 완전히 덮었을 때 공중균사를 제거하고, 25℃에서 12시간 간격으로 광을 조사하며 병원균은 3주간 배양하여 자낭각을 형성시켰다. 살균증류수를 사용하여 형성된 자낭각을 수확하여 자낭각의 농도를 500 개 로 조절한 후 실험 pot 당 10 mL씩을 토양에 관주하여 접종하였다. 온실에서 접종한 pot는 각각을 저면 관수하며 발병을 유도하였으며, 접종하고 40일 후에 뿌리의 토양을 세척하고 Table 2와 같은 발병지수를 사용하여 조사하였다.
- 사용하였다. 시판되는 살균제 중에서 화학 구조, 작용기작 등을 고려하여 Table 1과 같이 총 25 종을 선발하였으며, 한천희석법과 96-well microtiter plate 법을 통하여 효과를 검정하였다. 살균제의 균사생장 억제 효과는 한천희석법을 통하여 조사하였다.
- 실내 검정에서 사용한 한천희석법과 96-well microtiter plate법 모두에서 병원균의 생장에 대한 억제 효과가 좋았던 dazomet, diethcfencarb와 carbenda/m의 혼합제, tebuconazole, prochloraz를 선발하여 온실 검정에 사용하였다 또한 한천희석법에서는 병원균 생육에 대한 EC%값이 0.01 pg mL1 이하이었지만, 96-well microtiter plate법에서의 병원균에 대한 생육 억제 효과는 저조하였던 iminoctadine, 반대로 한천희석법에서는 EC50값이 500 pg mL1 이상으로 병원균의 균사 생장에 대한 억제효과가 매우 낮았지만 96-weU microtiter plate법을 통해서 조사된 Ed값은 0.61, 0.29, 18.67 pg mL-1이었던 dichlofluanid, captan, difenoconazole 등 총 8종의 살균제를 선발하여 온실에서 효과 검정을 수행하였다.
- 실내 실험에서 선발한 8종의 살균제 (dazomet, diclofluamid, iminoctadine tris, captan, diethofencarb + carbendazim, difenoconazole, tebuconazole, prochloraz) 는 온실에서 재배한 본엽 2엽기의 한남콩에 병원균을 접종하기 전과 후에 토양 처리하고, 병 발생 억제 효과를 조사하였다. 실험에 사용한 한남콩은 지름이 10 cm인 pot에 파종한 후, 본엽 2엽이 전개될 때까지 온실에서 재배하였다.
- 살균제는 300 ug mL-1의 streptomycin이 첨가된 멸균수에 용해시킨 다음, 준비한 병원균의 포자현 탁액에 정해진 농도가 되도록 희석하였다. 실험에 사용한 모든 살균제의 농도는 100 pg ml-1부터 0.098 11 g ml-1까지 1/2씩 희석하여 총 11개의 농도로 조절하였다. 살균제를 정해진 농도로 처리한 각각의 포자 현탁액은 96-well microtiter plate에 100 μL씩 분주한 후, 25℃ 암상태에서 24시간 150 rpm으로 진탕 배양하였다.
- 접종하고 25℃에서 10일간 배양한 후, 균총의 직경을 측정하였다. 약제의 균사생장 억제 효과는 멸균수만을 첨가한 PDA에서 자란 균총의 직경과 약제 첨가 배지에서의 균총의 직경을 비교하여 아래와 같이 구하였다.
- 살균증류수를 사용하여 형성된 자낭각을 수확하여 자낭각의 농도를 500 개 로 조절한 후 실험 pot 당 10 mL씩을 토양에 관주하여 접종하였다. 온실에서 접종한 pot는 각각을 저면 관수하며 발병을 유도하였으며, 접종하고 40일 후에 뿌리의 토양을 세척하고 Table 2와 같은 발병지수를 사용하여 조사하였다.
대상 데이터
- 2002년과 2003년 8월에 전국의 콩 재배지역에서 지상부가 황화되고 지제부에는 붉은색의 자낭각이 보이는 콩 검은뿌리썩음병균에 감염된 것으로 의심되는 식물체를 채집하였다. 흐르는 물로 채집한 시료의 흙을 세척하고 지제부의 조직 절편을 1% sodium hypochloride 용액에서 1분간 표면 살균한 후, 300 pg mF 의 streptomycin을 함유한 PDAS) 치상하여 25℃의 항온기에서 배양하였다.
- 병원균을 접종하기 2일 전과 접종하고 2일 후에, 처리 용액의 농도를 100 pg ml-1로조절한 살균제를 pot 당 10 mL 씩 토양에 관주하여 방제 효과를 조사하였다. 병원균의 접종은 실내에서 형성시킨 C. ilicicola SC03-15의 자낭각을 접종 원으로 사용하였다. PDA배지에서 SC03-15의 자낭각을 형성시키기 위해서 분생포자를 2 X io5 로 조절한 다음, 50 yL를 PDA에 분주하고 유리봉으로 도말하고 25℃의 암상태에서 6일간 배양하였다.
- 실험실에서 살균제의 효과 검정을 하기 위하여 2003년에 분리한 Calonectria ilicicola SC03-15를 선발하여 사용하였다. 시판되는 살균제 중에서 화학 구조, 작용기작 등을 고려하여 Table 1과 같이 총 25 종을 선발하였으며, 한천희석법과 96-well microtiter plate 법을 통하여 효과를 검정하였다.
- 조사하였다. 실험에 사용한 한남콩은 지름이 10 cm인 pot에 파종한 후, 본엽 2엽이 전개될 때까지 온실에서 재배하였다. 병원균을 접종하기 2일 전과 접종하고 2일 후에, 처리 용액의 농도를 100 pg ml-1로조절한 살균제를 pot 당 10 mL 씩 토양에 관주하여 방제 효과를 조사하였다.
- 과 유사하므로 분리에 주의하였다. 콩 검은뿌리썩음병균으로 확인된 균주는 단포자 분리하여 실험에 사용하였다. 분리한 콩 검은 뿌리 썩음 병균의 균주는 25℃의 PDA에서 7일간 배양한 후, 균사선단부에서 지름 5 mm의 균사 조각을 떼어내어 PDA 사면배지에 접종하고 25℃에서 7일 배양한 후, 4℃에서 보관하며 실험에 사용하였다.
이론/모형
- 시판되는 살균제 중에서 화학 구조, 작용기작 등을 고려하여 Table 1과 같이 총 25 종을 선발하였으며, 한천희석법과 96-well microtiter plate 법을 통하여 효과를 검정하였다. 살균제의 균사생장 억제 효과는 한천희석법을 통하여 조사하였다. 살균제는 300 pg mL-1의 streptomycin 용액을 사용하여 희석하였는데, neoasozin을 비롯한 16종은 배지에서의 최종 농도가 500, 50, 5, 0.
성능/효과
- Carbendazim와 diethofencarb의 혼합제는 온실 실험에서도 병원균의 접종 전 처리와 접종 후 처리 모두에서 병 발생 억제효과가 75%와 76.7%로 처리한 살균제 중에서 가장 우수한 효과를 보였다(Fig. 2). Nonnan(1996) 이 Cylindrocladium spathiphylli 에 의한 Spathiphylhim의뿌리썩음병을 방제하기 위해서 살균제를 토양에 관주하였을 때, carbendazim과 동일한 계열의 살균제인 thiophanate-methyl의 처리에서 우수한 효과를 얻은 것을 보면 benzimidazole계 살균제가 토양 병원균인ylindrocladium의 방제에 유용하게 사용 될 수 있을 것으로 생각한다.
- 0 pg 보다 낮게 나타나 병원균의 균사 생장을 억제하는 효과가 큼을 알 수 있었다(Table 3). Dazomet, iprodione, myclobutanil, penconazole, prochloraz 등은 10.0 pg tnL'1 이하에서 병원균의 균사 생육을 50% 억제하는 것으로 나타났다. 특이한 것은 tebuconazole과 myclobutanil과 같이 진균의 ergosterol 생합성을 저해하는 것으로 알려져있는 nuarimol과 difenoconazolee EC50값이 25.
- Tebuconazolee 예방 처리에 의한 병 발생 억제 효과보다는 병원균을 접종하고 2일 후에 처리한 경우의 효과가 83.3%로 높게 나타났다. 이 결과는 tebuconazole이 C.
- 64 pg 의 EC50값을 보여 우수한 효과를 보였다. 그러나 현미경으로 병원균을 관찰한 결과, tebuconazole과 prochloraz 는 carbendazim과 diethofencarb의 혼합제와는 다르게 25.0 ug ml-1의 처리구에서도 병원균 포자가 발아는 하였지만, 발아관이 더 이상 신장하지 못하고 크게 저해되는 것으로 나타났다. 보호용 살균제인 dithianon, dichlofluanid, mancozeb, captan 등은 한전 희석법에서는 EC”값이 500 pg mL1 이상이었는데, 96-well microtiter plate법에서는 4.
- 균사생육 억제 효과가 높았다. 또한 병원균의 포자를 접종하여 실험한 96-well microtiter plate 법에서도 EC50값은 0.67 ug 로, 낮은 처리농도에서 높은 효과를 보임으로써 균사의 생장뿐만 아니라 포자의 발아도 억제하는 것으로 판단되었다. Carbenciaziin과 diethofencarb의 혼합제의 포자에 대한 효과를 현미경으로 관찰하면, Fig.
- 병원균의 균사를 접종하는 한천희석법에서 carbendazim과 diethofencarb의 혼합제는 낮은 처리 농도에서 병원균의 균사생육 억제 효과가 높았다. 또한 병원균의 포자를 접종하여 실험한 96-well microtiter plate 법에서도 EC50값은 0.
- ID). 병원균의 균사생장 억제 효과가 높았던 ergosterol 생합성 저해 살균제의 경우에는 tebuconazole과 prochloraz가 3.55와 1.64 pg 의 EC50값을 보여 우수한 효과를 보였다. 그러나 현미경으로 병원균을 관찰한 결과, tebuconazole과 prochloraz 는 carbendazim과 diethofencarb의 혼합제와는 다르게 25.
- 본 실험에서는 콩의 검은뿌리썩음병을 확학적 방법인 살균제를 처리하여 방제하기 위하여 실내와 온실 검정을 실시하였으며, carbendazim와 diethofencarb의 혼합제와 tebuconazole의 방제 효과가 우수함을 증명하였다. 따라서 콩의 논 재배 증가와 더불어 예상되는 검은뿌리썩음병의 방제를 위해서는 선발한 살균제를 토양처리하여야 하며, 살균제의 특성상 tebuconazolee 발병 전 예방 처리보다는 병 발생 직후가 처리 적기인 것으로 생각한다.
- 다만 실제 포장에서 사용하고자 할 때에 이러한 tebuconazole의 특성을 참고한다면, tebuconazole의 처리 시기는 1차 전염원이 나타나기 전부터 처리하는 것보다는 발병의 초기에 처리하는 것이 적기일 수도 있을 것으로 생각된다. 실험에 사용하였던 prochloraz와 보호용 살균제들의 방제 효과는 40% 이하로 저조하게 나타났다. 특히 실내 검정에 사용한 두 가지 방법 모두에서 우수한 병원균의 생육 억제 효과를 보였던 dazomete 식물체를 직접 사용하며 토양에 관주처리하는 온실 검정에서는 효과가 미미하였다.
- 실내 검정에서 carbendazim 와 diethofencarb의 혼합제는 한천희석법을 통한 균사 생장 억제효과가 매우 크게 나타났으며, 포자를 사용한 96-well microtiter plate법에서도 병원균의 생장 억제 효과가 우수한 것으로 조사되었던 살균제이다. 이 결과는 carbendazim와 diethofencarb의 혼합제가 콩 검은 뿌리 썩음 병균의 균사 생장과 포자 발아에 대한 억제 효과 모두를 갖는 우수한 살균제임을 보여주는 것으로 생각한다. 이처럼 균사 생장과 포자 발아 모두를 억제 할 수 있는 carbendazim와 diethofencarb의 혼합제는 식물체에 병원균을 접종하기 전에 처리하는 예방 처리에서는 병원균 포자의 발아를 저해함으로써 병 발생을 억제할 수 있으며, 병원균을 접종하고 2일 후에 처리한 경우에는 토양과 식물체의 표면에서 발아하여 균사 생장을 하는 병원균뿐만 아니라, 식물체에 침입하여 균사로 정착하는 병원균 모두에 대해서도 효과를 보이기 때문에 식물체에서 병 발생을 억제하는 것으로 생각한다.
- 3%로 높게 나타났다. 이 결과는 tebuconazole이 C. ilicicola SC03-15 의 포자 발아에 대한 억제 효과보다는 균사생장에 대한 억제효과가 우수한 살균제임을 보여주고 있으며, Table 3에서의 실내 검정 결과와도 부합하는 결과라고 생각한다. 특히 병원균 발아 전 처리에서 방제 효과가 20%로 저조하게 나타난 이유를 설명하기 위해서는 tebuconazole의 토양 중에서의 물리성과 이동 등의 특성을 기초로 더 연구되어야 할 것으로 생각한다.
- 3에서 보는 것과 같이 무처리구에서는 뿌리가 전체적으로 갈변하며 뿌리의 생육이 심하게 억제되고 있는데 비하여, carbendazim와 diethofencarb의 혼합제를 병원균 접종 전후에 토양에 처리하였을 때, 뿌리 생육의 억제는 크게 나타나지 않았지만 콩의 지제부와 뿌리의 측근 일부가 갈변하며 병이 발생하는 것을 관찰할 수 있었다. 이 결과는 온실 검정에서 가장 우수한 효과를 보인 carbendazim와 diethofencarb의 혼합제조차도 포장에서 사용할 때에 효과가 감소할 위험성이 있음을 보여주고 있다.
- 0 pg tnL'1 이하에서 병원균의 균사 생육을 50% 억제하는 것으로 나타났다. 특이한 것은 tebuconazole과 myclobutanil과 같이 진균의 ergosterol 생합성을 저해하는 것으로 알려져있는 nuarimol과 difenoconazolee EC50값이 25.1과 500 pg mL1 이상으로 높게 나타나 동일한 작용 기작을 갖는 살균제이면서도 동일한 병원균에 대하여 효과가 다름을 알 수 있었다. 김 등(2003)도 고추 탄저병균인 Colletotrichum 에 대한 살균제의 효과를 96-well micrititer plate를 이용하여 조사하였는데, 100 pg mL-1의 처리에서 bitertanol, nuarimol, prochloraz 등은 40% 이하의 생육 억제 효과를 보이는 반면에 hexaconazolee 90%의 효과를 보였다고 보고하였다.
- 이처럼 균사 생장과 포자 발아 모두를 억제 할 수 있는 carbendazim와 diethofencarb의 혼합제는 식물체에 병원균을 접종하기 전에 처리하는 예방 처리에서는 병원균 포자의 발아를 저해함으로써 병 발생을 억제할 수 있으며, 병원균을 접종하고 2일 후에 처리한 경우에는 토양과 식물체의 표면에서 발아하여 균사 생장을 하는 병원균뿐만 아니라, 식물체에 침입하여 균사로 정착하는 병원균 모두에 대해서도 효과를 보이기 때문에 식물체에서 병 발생을 억제하는 것으로 생각한다. 하지만 Fig. 3에서 보는 것과 같이 무처리구에서는 뿌리가 전체적으로 갈변하며 뿌리의 생육이 심하게 억제되고 있는데 비하여, carbendazim와 diethofencarb의 혼합제를 병원균 접종 전후에 토양에 처리하였을 때, 뿌리 생육의 억제는 크게 나타나지 않았지만 콩의 지제부와 뿌리의 측근 일부가 갈변하며 병이 발생하는 것을 관찰할 수 있었다. 이 결과는 온실 검정에서 가장 우수한 효과를 보인 carbendazim와 diethofencarb의 혼합제조차도 포장에서 사용할 때에 효과가 감소할 위험성이 있음을 보여주고 있다.
- 한천희석법을 통해서 실험한 25개의 살균제 중에서 iminoctadine, carbendazim 고} diethofencarb 의 혼합제, tebuconazole 등의 ECsj값이 1.0 pg 보다 낮게 나타나 병원균의 균사 생장을 억제하는 효과가 큼을 알 수 있었다(Table 3). Dazomet, iprodione, myclobutanil, penconazole, prochloraz 등은 10.
후속연구
- 따라서 콩의 논 재배 증가와 더불어 예상되는 검은뿌리썩음병의 방제를 위해서는 선발한 살균제를 토양처리하여야 하며, 살균제의 특성상 tebuconazolee 발병 전 예방 처리보다는 병 발생 직후가 처리 적기인 것으로 생각한다. 그러나 포장에서 콩 검은뿌리썩음병 방제를 위해서는 더 많은 살균제의 검정을 통하여 콩 검은뿌리썩음병균에 대하여 탁월한 방제 효과를 보이거나 특이적인 방제 특성을 보이는 살균제의 선발과 병원균의 침입 과정과 경로를 고려한 적합한 방제 시스템을 확립하는 것이 필요할 것으로 보인다.
- ilicicola SC03-15 의 포자 발아에 대한 억제 효과보다는 균사생장에 대한 억제효과가 우수한 살균제임을 보여주고 있으며, Table 3에서의 실내 검정 결과와도 부합하는 결과라고 생각한다. 특히 병원균 발아 전 처리에서 방제 효과가 20%로 저조하게 나타난 이유를 설명하기 위해서는 tebuconazole의 토양 중에서의 물리성과 이동 등의 특성을 기초로 더 연구되어야 할 것으로 생각한다. 다만 실제 포장에서 사용하고자 할 때에 이러한 tebuconazole의 특성을 참고한다면, tebuconazole의 처리 시기는 1차 전염원이 나타나기 전부터 처리하는 것보다는 발병의 초기에 처리하는 것이 적기일 수도 있을 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.