식물세균병 방제에 사용되는 3종의 동 살균제, 3종의 항생물질계 살균제, 그리고 1종의 quinolone계 살균제를 선발하여 풋마름병균인 Ralstonia solanacearum에 대한 생장 억제 효과와 고추 유묘에서의 병 방제 효과를 조사하였다. NA배지 상에서 실시한 생장 억제 실험에서 oxytetracycline은 가장 우수한 효과를 보였는데, $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리에서 저지원의 크기가 14.95 mm로 가장 크게 나타났으며 $8.0{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리구에서도 0.91 mm 크기의 저지원을 확인할 수 있었다. Validamycin은 병원균 생장에 대한 억제효과가 전혀 없었다. 동 살균제들은 copper hydroxide, copper oxychloride+dithianone, copper sulfate의 $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리구에서 각각 2.19, 1.30, 1.48 mm의 저지원이 나타났을 뿐 큰 효과를 보이지 않았다. 유묘 검정을 위해서 토양에 살균제를 관주처리하였을 때, 실내 검정에서 가장 효과가 우수하였던 oxytetracycline이 병원균을 접종하고 7일 후까지 모든 처리 농도에서 시들음 증상이 전혀 관찰되지 않아 100%의 아주 우수한 방제효과를 보였으나, 14일 후에는 $5000{\mu}g\;mL^{-1}$의 처리구에서부터 효과가 감소하였다. 3 종의 동 살균제는 7일 후에 $2000{\mu}g\;mL^{-1}$에서 90%의 효과를 보여 다른 살균제보다 낮은 효과를 보였으며, 14일후에는 copper sulfate를 제외한 2종의 살균제에서는 $500{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리구에서 효과가 40% 이하로 감소하였다. 결과적으로 R. solanacearum에 의한 풋마름병의 방제를 위해서는 동 살균제보다는 항생물질계 살균제 또는 quinolone계 살균제 중에서 선발하여 사용하는 것이 타당할 것으로 생각된다.
식물세균병 방제에 사용되는 3종의 동 살균제, 3종의 항생물질계 살균제, 그리고 1종의 quinolone계 살균제를 선발하여 풋마름병균인 Ralstonia solanacearum에 대한 생장 억제 효과와 고추 유묘에서의 병 방제 효과를 조사하였다. NA배지 상에서 실시한 생장 억제 실험에서 oxytetracycline은 가장 우수한 효과를 보였는데, $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리에서 저지원의 크기가 14.95 mm로 가장 크게 나타났으며 $8.0{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리구에서도 0.91 mm 크기의 저지원을 확인할 수 있었다. Validamycin은 병원균 생장에 대한 억제효과가 전혀 없었다. 동 살균제들은 copper hydroxide, copper oxychloride+dithianone, copper sulfate의 $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리구에서 각각 2.19, 1.30, 1.48 mm의 저지원이 나타났을 뿐 큰 효과를 보이지 않았다. 유묘 검정을 위해서 토양에 살균제를 관주처리하였을 때, 실내 검정에서 가장 효과가 우수하였던 oxytetracycline이 병원균을 접종하고 7일 후까지 모든 처리 농도에서 시들음 증상이 전혀 관찰되지 않아 100%의 아주 우수한 방제효과를 보였으나, 14일 후에는 $5000{\mu}g\;mL^{-1}$의 처리구에서부터 효과가 감소하였다. 3 종의 동 살균제는 7일 후에 $2000{\mu}g\;mL^{-1}$에서 90%의 효과를 보여 다른 살균제보다 낮은 효과를 보였으며, 14일후에는 copper sulfate를 제외한 2종의 살균제에서는 $500{\mu}g\;mL^{-1}$ 처리구에서 효과가 40% 이하로 감소하였다. 결과적으로 R. solanacearum에 의한 풋마름병의 방제를 위해서는 동 살균제보다는 항생물질계 살균제 또는 quinolone계 살균제 중에서 선발하여 사용하는 것이 타당할 것으로 생각된다.
Control efficacy was investigated with fungicides as 3 copper compound, 3 antibiotic fungicides and one fungicide containing to quinolone against the growth of Ralstonia solanacearum on NA medium and the disease occurrence on pepper seedlings. Among 7 fungicides, oxytetracycline was shown the highes...
Control efficacy was investigated with fungicides as 3 copper compound, 3 antibiotic fungicides and one fungicide containing to quinolone against the growth of Ralstonia solanacearum on NA medium and the disease occurrence on pepper seedlings. Among 7 fungicides, oxytetracycline was shown the highest activity against a growth of the pathogen in the agar diffusion method, but validamycin showed no activity against the pathogen. With $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ of each copper fungicide as copper hydroxide, copper oxychloride+ dithianone and copper sulfate, 2.2, 1.3 and 1.5 mm in size of clear zone only could be found, respectively. In pepper seedling test, oxytetracycline showed a perfect activity in all treatments 7 days after inoculation. However, its activity was decreased from $500{\mu}g\;mL^{-1}$ of treatment over the time. Copper fungicides showed the control efficacy lower than antibiotic fungicides except for validamycin. Based on the results, it was suggested that it would be better to use antibiotic fungicides than copper fungicides to control pepper bacterial wilt in the fields.
Control efficacy was investigated with fungicides as 3 copper compound, 3 antibiotic fungicides and one fungicide containing to quinolone against the growth of Ralstonia solanacearum on NA medium and the disease occurrence on pepper seedlings. Among 7 fungicides, oxytetracycline was shown the highest activity against a growth of the pathogen in the agar diffusion method, but validamycin showed no activity against the pathogen. With $1000{\mu}g\;mL^{-1}$ of each copper fungicide as copper hydroxide, copper oxychloride+ dithianone and copper sulfate, 2.2, 1.3 and 1.5 mm in size of clear zone only could be found, respectively. In pepper seedling test, oxytetracycline showed a perfect activity in all treatments 7 days after inoculation. However, its activity was decreased from $500{\mu}g\;mL^{-1}$ of treatment over the time. Copper fungicides showed the control efficacy lower than antibiotic fungicides except for validamycin. Based on the results, it was suggested that it would be better to use antibiotic fungicides than copper fungicides to control pepper bacterial wilt in the fields.
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문제 정의
하지만 농가 현장에서 사용할 살균제가 토양소독제 외에는 전혀 등록되어 있지 않기 때문에, 풋마름병이 발생하였을때 시급히 사용할 살균제를 찾고자 하여도 선발할 수 없는 실정이다. 따라서 본 실험에서는 풋마르병균이 세균임을 감안하여 이미 세균점무늬병의 방제약제로 등록되어 있는 살균제 중에서 동제를 비롯하여 항생물질 계통의 살균제와 기타 다른 세균병 방제용으로 등록되어 있는 살균제 등을 선발하여 배지 상에서 병원균에 대한 생장 억제 실험과 고추 유묘를 이용한 온실 실험을 통하여 방제효과가 있는 살균제를 선발하여 포장에서 사용 가능성을 제공하고자 하였다.
제안 방법
Paper disc 확산법을 이용하여 살균제가 병원균의 생육에 미치는 효과는 살균제를 처리하고 48시간 후에 조사하였다 (Fig. 1). 실험에 사용한 3종의 동 살균제인 copper hydroxide, copper oxychloride+dithianone, copper sulfate 등은 1000µg mL−1의 처리구에서만 2.
각 살균제는 8.0, 40.0, 200.0, 1000.0 µg mL−1로 농도를 조절한 후에 멸균한 paper disc (직경; 6 mm)에 25 µL씩 점적 처리하고 무균상 안에서 풍건하였다.
접종한 고추 유묘는 80%이상으로 습도를 조절하는 30oC의 항온 조건에서 12시간 간격으로 광암 처리하며 발병을 유도하였다. 각 처리는 완전임의배치 3반복으로 배치하였으며, 각 반복은 5개의 포트를 사용하였다. 발병 정도는 병원균을 접종하고 7일과 14일 후에 발병도를 조사하였다.
온실에서 6엽기까지 재배한 왕대박 품종을 사용하였다. 고추 유묘 한 주 당 인위적으로 뿌리 부위 3곳에 송곳(두께;2 mm, 깊이; 2 cm)으로 상처를 내고, 준비한 살균제 용액을5 mL 씩 관주처리하였다. 이 때 살균제는 31.
하지만 대량의 유묘를 가지고 살균제의 효과 또는 병원균에 대한 저항성 정도를 검정하고자 할 때에는, 시간과 노동력이 많이 필요하기 때문에 기존의 방법을 개선해야 한다. 따라서 병 발생 조건은 기존의 방법과 동일하게 하며, 유묘를 이식하지 않고 재배한 상태에서 뿌리 부위에 상처를 내고 병원균의 현탁액을 토양에 관주하여 접종하는 방법으로 개선하여 실험하였다. 살균제 무처리구의 유묘에서는 병원균을 접종하고 7일 후부터 80% 이상의 발병률을 보였으며, 3가지 형태의 시들음 증상을 보였다.
각 처리는 완전임의배치 3반복으로 배치하였으며, 각 반복은 5개의 포트를 사용하였다. 발병 정도는 병원균을 접종하고 7일과 14일 후에 발병도를 조사하였다. 병 발생은 Table 1과 같은 발병지수로 조사한 후에 발병도를 계산하였다(Mimura et al.
배양한 병원균의 단콜로니를 다시 28oC의 TTC 액체 배지(peptone; 10 g, dextrose; 5 g, 살균증류수; 1 L, 2,3,5- triphenyl tetrazolium; 5 g(멸균 후 배지에 첨가))에서 3일간 진탕배양한 후 3,000 × g로 원심분리하여 수확하였다.
0 µg mL−1로 농도를 조절한 후에 멸균한 paper disc (직경; 6 mm)에 25 µL씩 점적 처리하고 무균상 안에서 풍건하였다. 살균제를 농도 별로 처리한 paper disc는 병원균을 접종하여 만든 중층 배지 위에 올려놓고, 병원균을 28oC에서 배양하며 48시간 후에 형성된 clear zone을 관찰하고 직경을 조사하였다.
0 µg mL−1의 농도로 조절하여 처리하였다. 살균제를 처리하고 1시간 후에 미리 준비한 병원균의 현탁액을 5 mL 씩 토양에 관주하여 접종하였다. 접종한 고추 유묘는 80%이상으로 습도를 조절하는 30oC의 항온 조건에서 12시간 간격으로 광암 처리하며 발병을 유도하였다.
실험에 사용한 살균제가 병원균의 생장에 미치는 억제 효과는 중층배지 위에서 paper disc 확산법을 이용하여 조사하였다. 세척한 병원균의 현탁액을 1.5% agar를 첨가한 NA 배지에 1/10로 희석하여 첨가하였다. 병원균을 첨가한 NA 배지는 2%의 물한천배지 위에 부어 중층의 배지를 준비하였다.
유묘 검정을 위한 접종원 준비를 위해서 4oC에서 보관하던 병원균을 NB 배지에 접종하여 28o C에서 2일간 배양하였다. 배양한 병원균의 단콜로니를 다시 28oC의 TTC 액체 배지(peptone; 10 g, dextrose; 5 g, 살균증류수; 1 L, 2,3,5- triphenyl tetrazolium; 5 g(멸균 후 배지에 첨가))에서 3일간 진탕배양한 후 3,000 × g로 원심분리하여 수확하였다.
이 때 살균제는 31.2, 125.0, 500.0, 2000.0 µg mL−1의 농도로 조절하여 처리하였다.
살균제를 처리하고 1시간 후에 미리 준비한 병원균의 현탁액을 5 mL 씩 토양에 관주하여 접종하였다. 접종한 고추 유묘는 80%이상으로 습도를 조절하는 30oC의 항온 조건에서 12시간 간격으로 광암 처리하며 발병을 유도하였다. 각 처리는 완전임의배치 3반복으로 배치하였으며, 각 반복은 5개의 포트를 사용하였다.
온실에서 6엽기까지 재배한 왕대박 품종을 사용하였다. 고추 유묘 한 주 당 인위적으로 뿌리 부위 3곳에 송곳(두께;2 mm, 깊이; 2 cm)으로 상처를 내고, 준비한 살균제 용액을5 mL 씩 관주처리하였다.
이론/모형
실험에 사용한 살균제가 병원균의 생장에 미치는 억제 효과는 중층배지 위에서 paper disc 확산법을 이용하여 조사하였다. 세척한 병원균의 현탁액을 1.
성능/효과
Oxytetracycline은 실험한 살균제 중에서 가장 우수한 억제 효과를 보였는데, 8.0, 40, 200, 1000 µg mL−1 처리구에서 나타난 clear zone의 크기가 각각 0.91, 5.26, 9.35, 14.95 mm이었다.
각 살균제의 500 µg/ml 처리구의 효과를 비교하여 보면 kasugamycin에서 90.5%의 가장 높은 효과가 나타났고, 7일 후 조사에서 가장 우수한 효과를 보였던 oxytetracycline에서도 71.4%로 감소하였다.
반면 kasugamycin의 경우 실내 검정과 유묘 검정 모두에서 억제효과를 확인하였으며, 500 µg mL−1를 처리하였을 때 처리 후 14일까지도 효과가 지속되었기 때문에 oxytetracycline 과 oxolinic acid보다는 포장에서 적용이 용이할 것으로 생각한다.
, 2007). 본 실험의 결과, oxytetracyclne은 R. solanacearum의 생장 억제뿐만 아니라, 실험한 모든 살균제 중에서 고추에서의 발병까지도 가장 효과적으로 방제할 수 있는 살균제이었다. 하지만 이미 다양한 기작을 통하여 저항성균이 발현되고 있으며, 이런 저항성균은 서로 다른 속간에도 수평적으로 이동할 수 있기 때문에 포장에서의 저항성 발현을 모니터링하며 사용하여야 할 것으로 생각한다.
다만 불마름병을 방제하기 위해서 사과에 처리하였을 때, 처리하는 농도에 따라서 꽃과 잎이 마르는 약해 현상이 발생하였다(Psallidas and Tsiantos, 2000). 본 연구 결과, kasugamycin은 풋마름병균에 대해 직접적인 생육 억제효과뿐만 아니라 고추 유묘에서도 효과적으로 방제하였다. 또한 사과에서와는 다르게 2000 µg mL−1을 토양 관주 처리하였을 때에도 고추 유묘에 대한 약해는 전혀 발견되지 않았다.
실험에 사용한 3종의 동 살균제인 copper hydroxide, copper oxychloride+dithianone, copper sulfate 등은 1000µg mL−1의 처리구에서만 2.19, 1.30, 1.48 mm의 clear zone 이 나타났을 뿐 큰 효과를 보이지 않았다.
이상의 결과에서 보면 기존의 살균제 중에서 고추 풋마름 병균을 방제하기 적합한 살균제는 oxytetracycline과 oxolinic acid 그리고 kasugamycin 등이라고 생각한다. 하지만 oxytetracycline과 oxolinic acid는 유묘 검정 결과, 처리 후 시간이 경과함에 따라서 그 효과가 감소하기 때문에 포장에 적용하였을 때 효과가 지속될 지에 대해서는 의문이 남는다.
처리한 살균제의 효과를 조사한 결과, oxytetracycline은 7일 후까지는 모든 처리 농도에서 시들음 증상을 보이는 고추 유묘가 전혀 관찰되지 않아 100%의 방제효과를 보였으며, kasugamycin은 500 µg/ml 처리구에서 100%, 125 µg/ ml 처리구에서 66.7%의 방제효과를 보였다(Fig. 2).
항생물질계 살균제에서도 validamycine A는 모든 처리구에서 전혀 병원균의 생육을 억제하지 못하였으며, kasugamycin은 200과 1000 µg mL−1 처리구에서 각각 2.22와 5.55 mm의 clear zone이 나타났을 뿐이었다.
후속연구
, 2000). 본 실험에서도 병원균 생육 억제 검정과 온실에서 실시한 유묘 검정에서도 방제효과를 보였으나, 그 효과가 살균제 농도가 감소하거나 처리 후 시간이 경과하면서 빠르게 감소하는 단점이 있기는 하나, 포장 검정을 통해서 병 방제효과를 조사할 필요가 있다고 생각한다. 대부분의 살균제들은 처리하고 14일 후에는 효과가 빠르게 감소하였다.
또한 포장에서 살균제의 효과를 상승시키기 위한 방법 중의 하나로 서로 다른 살균제의 혼합 처리를 제안할수 있다. 현재 포장에서는 풋마름병의 발생이 전국적으로 증가하고 있는 실정이면서도 마땅한 방제의 방법이 제안되고 있지 않는 현 상황에서 본 실험을 통하여 선발된 살균제의 포장에서 효과와 다양한 처리 방법 등에 대한 연구가 필요한 시점이 아닌가 생각한다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
국내 풋마름병 방제 살균제로 등록된 제제는?
또한 풋마름병이 토양병이기 때문에 살균제를 사용하는 것도 한계가 있다. 국내에서 풋마름병 방제 살균제로등록되어 있는 것은 토양소독제로 사용되어 있는 dazomat한 종류밖에 없다.
Oxolinic acid가 고추 풋마름병 방제효과에 있어 가지는 단점은 무엇인가?
, 2000). 본 실험에서도 병원균 생육 억제 검정과 온실에서 실시한 유묘 검정에서도 방제효과를 보였으나, 그 효과가 살균제 농도가 감소하거나 처리 후 시간이 경과하면서 빠르게 감소하는 단점이 있기는 하나, 포장 검정을 통해서 병 방제효과를 조사할 필요가 있다고 생각한다.대부분의 살균제들은 처리하고 14일 후에는 효과가 빠르게 감소하였다.
풋마름병에 대한 저항성 품종은 무엇인가?
따라서 포장에서 고추와 토마토 풋마름병을 방제하기 위해서 여러 가지의 경종적 또는 생물적, 화학적 방법등이 적극적으로 연구되고 있다. 풋마름병에 대한 저항성품종은 지리, 기후, 병원균, 토양 상태 등에 따라서 영향을받는 경우가 많은데, 일본에서 선발한 말레이지아 계통인 LS2341은 풋마름병에 대해서 강한 저항성을 가지고 있어품종 육종의 좋은 재료가 될 수 있으나, 아직까지 포장에서 사용할 수 있는 품종으로 개발되지는 않았다(Mimura와Yoshikawa, 2009). 토마토 풋마름병을 방제하기 위한 경종적 방제 방법으로 비기주식물인 cowpea를 토마토와 혼작할경우 cowpea의 뿌리가 토양 중에서 병원균의 전파를 방지하여 병을 방지할 수 있었다(Michel et al.
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