[논문]개에서 분리한 Staphylococcus aureus와 S. intermedius의 항생제 감수성

변정혜; 김태중

개에서 분리한 Staphylococcus aureus와 S. intermedius의 항생제 감수성
Antimicrobial susceptibility of Staphylococcus aureus and S. intermedius isolated from dogs 원문보기

大韓獸醫學會誌 = Korean journal of veterinary research, v.47 no.1=no.126, 2007년, pp.43 - 50

변정혜 (국립수의과학검역원 부산지원) , 김태중 (전남대학교 수의과대학)

Abstract ▼ AI-Helper

Staphylococci are Gram-positive, facultatively anaerobic cocci, normally found on the skin andmucosal surfaces of most warm-blooded animals and often involved in a wide variety of diseases in animals.Staphylococcal infections are treated with antibiotics and, consequently, antibiotic resistance and/or acquiredresistance have developed. Staphylococcus (S.) intermedius and Staphylococcus (S.) aureus are 2 comonveterinary isolates that are frequently associated with suppurative infections. This study was undertaken toexamine antimicrobial susceptibility of S. aureus (23 isolates) and S. intermedius (160 isolates) isolatedfrom dogs in Gwangju, Korea and investigate whether the antibiotic resistance of S. aureus and S.intermedius is efected by the site of isolation, age, and sex of dogs. More isolates were isolated fromadult dogs (71.3%) than juveniles (20.5%). Antimicrobial resistance was commonly found for Penicillin,Tetracycline, Trimethoprim-Sulphamethoxazole in both Staphylococcus species. All of the isolates weresusceptible to Amoxicillin/Clavulanic Acid, Cephalothin, Oxacilin, Neomycin, and Vancomycin. Appropriateprotocol for antibiotic use and strategies to reduce antimicrobial resistance rate will be needed. Periodicsubstitution of antimicrobial agents and limitation of antibiotic use should also be considered.

주제어

AI 본문요약
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제안 방법

USA) 제품을 사용하였다. 감수성의 정도는 BBL 및 RASCO 판독기준에 따라 susceptible(S), intermediate(l) 또는 resistant(R)로 정리하였다.
광주지역의 개를 대상으로 균분리를 실시하였다. 선택된 동물의 이전 항생제 치료 병력은 고려하지 않았다.
시료의 해부학적 부위는 눈, 귀, 비강, 외부생식기, 그리고 피부로 분류하였다. 대상 축의 선정 부위를 소독 후 시료를 Tryptic Soy Broth(TSB)에 채취해 37℃/18-24시간 전증균 시킨 후 5% sheep blood agar에서 용혈양상를 관찰했다. 용혈을 일으킨 colony를 Staphylococcus spp.
이들 균에 대한 백신은 현재 개발되어있거나 사용되지 않기 때문에 이들 균은 항생제 처지가 가장 효과적인 치료방법이다 [24]. 많은 항생제가 개발되어 치료에 효과적으로 이용되고 있으나 무분별한 사용으로 항생제 내성균주의 발생과 빈도가 전 세계적으로 증가 추세에 있어 심각한 문제가 되고 있고, 이러한 항생제 내성 양상은 국가, 지역은 물론 병원에 따라서도 많은 차이를 보인다 [17丄 개에서 분리한 Staphylo- COCCMS의 항생제 감수성에 대한 연구는 이전부터 있었지만 [11], 광주지방의 연구는 발표된 적이 없어 개에서 분리 되는 2가지 주요 Staphylococcus인 S. owreay와 S. intermedinse 항생제 감수성을 다음 3가지 요소와 관련지어 실험하였다 [7].
선택된 동물의 이전 항생제 치료 병력은 고려하지 않았다. 분리된 세균의 분포 및 출현빈도는 male 또는 female, adult(> 1 year) 또는 juvenile(< 1 year), 그리고 S. aureus 또는 S. intermedig 따라 정리하였다. 육안적으로 외부에 아무런 외부증상이 없는 개체들을 건강한 것으로, 그리고 피부염과 같은 질환이 있는 개체들은 질환이 있는 것으로 구분하였다.
확산법으로 시행 했다. 분리주는 Macfarland Nephelo- meter Barium Sulfate Standards(Ex. 55) [8] 에 따라 units/ml이 되게 saline으로 희석해서 접종했고 항생제를 포함한 disc를 점적해 37℃에서 12시간 배양 후 가시적 성장이 관찰되지 않는 zone의 diameter# 측정했다. 사용된 항생제는 fJ-Lactams로는 amoxicillin/clavulanic acid(AMC), cephalothin(CF), penicillin(P), oxacilin(OX)0] 있고, non-fJ-Lactams로는 chloramphenicol(C), tetracycline (TE), ciprofloxacin(CIP), vancomycin(VA), trimethoprim/ sulphamethoxazole(SXT), lincomycin(L), etythromycin(E), neomycin(N), norfloxacin(NOR), clindamycin(CC), genta- micin(GM)으로 총 15종류이다.
용혈을 일으킨 colony를 Staphylococcus spp. 선택배지인 Baird-Parker(BP) agar에서 24-4&시간 배양한 뒤 Lu 등 μ4]이 사용한 생화학 테스트를 통해 S. aureus, S. intermedins, 그리고 coagulase negative strain(CNS)로 구별하였다.
육안적으로 외부에 아무런 외부증상이 없는 개체들을 건강한 것으로, 그리고 피부염과 같은 질환이 있는 개체들은 질환이 있는 것으로 구분하였다. 시료의 해부학적 부위는 눈, 귀, 비강, 외부생식기, 그리고 피부로 분류하였다. 대상 축의 선정 부위를 소독 후 시료를 Tryptic Soy Broth(TSB)에 채취해 37℃/18-24시간 전증균 시킨 후 5% sheep blood agar에서 용혈양상를 관찰했다.
intermedig 따라 정리하였다. 육안적으로 외부에 아무런 외부증상이 없는 개체들을 건강한 것으로, 그리고 피부염과 같은 질환이 있는 개체들은 질환이 있는 것으로 구분하였다. 시료의 해부학적 부위는 눈, 귀, 비강, 외부생식기, 그리고 피부로 분류하였다.

대상 데이터

본 실험에서 사용된 항생제 disc는 L과 N(RASCO, Denmark)< 제외하고는 BBL(Becton, Dickinson and Company, USA) 제품을 사용하였다. 감수성의 정도는 BBL 및 RASCO 판독기준에 따라 susceptible(S), intermediate(l) 또는 resistant(R)로 정리하였다.
본 실험에서는 총 23개의 S. owr㎛s와 160개의 S. bitemiedhis가 분리, 동정되어 이용되었다. 성별, 연령별 및 분리부위별로 Staphylococcus 분리주의 분리 빈도를 정리해본 결과는 Table 1과 같다.
55) [8] 에 따라 units/ml이 되게 saline으로 희석해서 접종했고 항생제를 포함한 disc를 점적해 37℃에서 12시간 배양 후 가시적 성장이 관찰되지 않는 zone의 diameter# 측정했다. 사용된 항생제는 fJ-Lactams로는 amoxicillin/clavulanic acid(AMC), cephalothin(CF), penicillin(P), oxacilin(OX)0] 있고, non-fJ-Lactams로는 chloramphenicol(C), tetracycline (TE), ciprofloxacin(CIP), vancomycin(VA), trimethoprim/ sulphamethoxazole(SXT), lincomycin(L), etythromycin(E), neomycin(N), norfloxacin(NOR), clindamycin(CC), genta- micin(GM)으로 총 15종류이다.

이론/모형

배양 및 동정검사 후 분리된 원인균에 대한 항생제 감수성 검사는 National Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS) [15]의 시행지침에 준하여 디스크 한천 확산법으로 시행 했다. 분리주는 Macfarland Nephelo- meter Barium Sulfate Standards(Ex.

성능/효과

개로부터 총 23개의 S. aureus와 160개의 S. intermedins 분리주가 분리, 동정되어 이용되었는데 juveniles(20.5%) 보다는 adult dog«71.3%)에서 분리가 많이 되었으며 S. OMraw(l 1.8%) 보다는 S. Z"/esed'"s(82.1%)가 많이 분리 되었다. 이들의 항생제 감수성을 조사한 결과, 분리주들 은 대체적으로 AMC, CF, OX, N, 그리고 Va에 감수성을 보였다.
Adults와 juvenile에서 공통적으로 AMC, CF, Va, N, OX는 매우 높은 감수성을 나타냈고, TE와 P에는 저항성을 획득했음을 보여주었다. Male juvenile(MJ)에서 가장 많은 항생제에 저항성을 나타내었는데 TE, P 이외에 SXT, GM, L, E, CC에도 저항성을 획득한 것으로 나타났다.
C, Vh, N에 보다 높은 감수성을 보였다. GMe 생식기 및 피부에서는 효과를 보이지만, 귀 및 비 강에서는 치료 효과가 떨어지는 것으로 나타났다. E의 경우에는 특히 눈에 적용하기에 부적합한 것으로 나타났다.
획득했음을 보여주었다. Male juvenile(MJ)에서 가장 많은 항생제에 저항성을 나타내었는데 TE, P 이외에 SXT, GM, L, E, CC에도 저항성을 획득한 것으로 나타났다. 이 결과에 따르면 SXT, GM, E는 치료제로서의 효과를 기대하기 어려울 것으로 보이며, CC는 저항성이증가되는 추세를 보였다.
Penicillin 내성균은 최초 발생보고 이후 그 발생비율이 점차 증가하고 있는데, 이번 결과에서도 S. aureus 서 87%, S. intermedium] 81%로 높게 나타나서 더 이상 P는 치료제로서 효용성이 없는 것으로 판단된다. TE 에 대한 저항성은 실험결과 S owgs에서 78%, S.
S. Intermedlus 분리 주는 AMC > N > CF > Va > OX > C에 매우 높은 감수성을 나타냈고, NOR>CIP>GM> L>CC>E 순으로 중등도의 감수성을 보였으며, TE> P>SXT에는 저항성을 나타냈다(Table 3).
S. aureus 분리주의 약제 감수성은 AMC>Vk>N에높은 감수성(80% 이상)을 나타냈고, CF > CIP, OX, NOR >C, GM에 중등도의 감수성(50%-80%)을 보였으며 P> TE>E>SXT, L에서는 저항성(S%>R%)을 나타냈다(Table 2).
S. azireMS와 S. intermedinse 모두 AMC, Vh, N에 높은 감수성을 보였으며, S. hiteEmedius가 S.aureus에 비해 많은 항생제에 높은 감수성을 보였다. S.
intermedium] 81%로 높게 나타나서 더 이상 P는 치료제로서 효용성이 없는 것으로 판단된다. TE 에 대한 저항성은 실험결과 S owgs에서 78%, S. intermedinse 90%의 저항성을 보여 P와 마찬가지로 치료제로서 효용이 없는 것으로 판단된다. TE계 항생제는 유사한 화학적 구조 때문에 교차내성이 발생해 deoxycycline, oxycycline의 저항성 증가에 영향을 미칠 수 있다.
감수성에 있어서 female이 male dogs에 비해 높은 수치를 보였고, NOR, CIR CC는 female 에서만 높은 감수성을 보였다. TE, P, SXT에는 두 성별 모두에서 저항성을 획득해 치료제로서 효용이 없음을 보여주었고, male 은 추가적으로 L, E에도 저항성을 보였다. 그 외에 아직은 효과가 있지만 중등도의 감수성(I)의 수치가 높아서 저항성이 높아질 가능성이 있는 약물로는 male에서는 CC, female에서는 GM과 L이 있었다(Table 4).
경향을 보였다. TE, P는 성별과 무관하게 저항성을 획득했음을 알 수 있었고, SXT, GM, L, E, CC 또한 전반적으로 저항성을 보였다(Table 5).
감수성에 있어서 female이 male dogs에 비해 높은 수치를 보였고, NOR, CIR CC는 female 에서만 높은 감수성을 보였다. TE, P, SXT에는 두 성별 모두에서 저항성을 획득해 치료제로서 효용이 없음을 보여주었고, male 은 추가적으로 L, E에도 저항성을 보였다.
건강한 개에서 male의 경우 % AMC>N>OX, C, CF 순으로 높은 감수성을, female의 경우 Va, AMC, N, OX, NOR, CF, CIP>C>CC순으로 높은 감수성을 나타냈다. 감수성에 있어서 female이 male dogs에 비해 높은 수치를 보였고, NOR, CIR CC는 female 에서만 높은 감수성을 보였다.
분리부위가 항생제 감수성에 미치는 영향을 이번 결과에서 관찰할 수 있었는데 외부 생식기에서는 다른 부위와는 달리 AMC보다는 CF와 C, Na, N에 보다 높은 감수성을 보였고, GMe 생식기 및 피부에서 높은 감수성을 보였으며, E의 경우에는 눈에 적용하기에 부적합한 것으로 나타났다. SXT에 대해 귀에서 분리된 Staphylococcus} 저항한다는 이전의 보고와 본 실험의 결과가 일치하였고 [25], 추가적으로 눈, 비강에서도 효용이 떨어지는 것으로 나타났다.
aureus도 연령별 실험결과에서 제외되었다. 분리주의 분포를 보면 Staphylococcits의 분리빈도는 juweniles(20.5%)보다 adult dogs(71.3%)에서 더 높았고, male dogs(50.8%)과 female dogs(43.1%)의 비율을 보였다. 특히 S.
생식기에서는 다른 부위와는 달리 AMC 보다는 CF 와 C, Vh, N에 보다 높은 감수성을 보였다. GMe 생식기 및 피부에서는 효과를 보이지만, 귀 및 비 강에서는 치료 효과가 떨어지는 것으로 나타났다.
Male juvenile(MJ)에서 가장 많은 항생제에 저항성을 나타내었는데 TE, P 이외에 SXT, GM, L, E, CC에도 저항성을 획득한 것으로 나타났다. 이 결과에 따르면 SXT, GM, E는 치료제로서의 효과를 기대하기 어려울 것으로 보이며, CC는 저항성이증가되는 추세를 보였다. Le MJ에서만 저항성이 나타났다(Table 7).
1%)가 많이 분리 되었다. 이들의 항생제 감수성을 조사한 결과, 분리주들 은 대체적으로 AMC, CF, OX, N, 그리고 Va에 감수성을 보였다. 그리고 이외의 항생제들에게는 상대적으로 높은 저항성을 보인다는 것을 감안하여 약제의 선택을 해야 할 것으로 생각된다.
종합해보면 Staphylococcus 감염증에 대한 유용한 치료제로는 p-lactam antibiotics인 AMC, CF, OX가 있었으며, 단백합성 억제제인 N과 glycopeptide 제제인 巧이효과적인 것으로 나타났다. 현재 수의 임상에서 Staphylococcus 감염증 치료에 많이 사용되고 있는 GM(male: 55.
질환이 있는 개에서 male의 경우 AMC>CF>N>Va>OX에 높은 감수성(80% 이상)을, ft:male의 경우는 AMC>Vk>CF>N>OX>C에 높은 감수성을 보여 유사한 경향을 보였다. TE, P는 성별과 무관하게 저항성을 획득했음을 알 수 있었고, SXT, GM, L, E, CC 또한 전반적으로 저항성을 보였다(Table 5).

후속연구

9%)등은 중등도의 약제내성이 나타나 임상에서 이 항생제의 사용은 좀 더 신중한 판단이 필요하겠다. 항생제 내성균주가 증가하고 있고 다약재 내성 균주들이 분리되고 있기 때문에 감수성 테스트를 통한 올바른 항생제 선택과 함꼐 상승효과가 기대되는 적절한 합제 약물의 제시가 필요할 것이다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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