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문제 정의
- 하지만 국내에선 인제대의 첫 보고 이후 아직까지 호흡기 감염에 대한 보카바이러스의 의의와 임상적 특징 및 중요성에 대해 언급한 보고는 많지 않다. 이에 저자들은 광주기독병원 소아과에 급성 호흡기질환으로 입원한 환아들을 대상으로 PCR을 이용하여 보카바이러스의 유병률 및 임상양상에 대해 알아보고자 본 연구를 실시하였다.
제안 방법
- 검체의 전처리는 바이러스 수송 배지안의 면봉을 배지 안에서 강하게 진탕 후 제거하고 penicillin (5 units/mL)/streptomycin (5 μg/mL) 및 nystatin (1,000 units/mL)를 첨가하여 잘 혼합한 다음 15분 간격으로 흔들어 주면서 4℃에서 1시간 동안 방치하였다.
- 5 mM dNTP 2 μL, SP Taq 1U를 첨가한 후 최종 50 μL가되도록 DW로 조정 중합연쇄반응(PCR)용액을 만들고, 94℃ 3분 반응 후 94℃ 30초, 54℃ 30초, 72℃ 30초를 35회 반복하고, 72℃ 7분간 중합연쇄반응(PCR)을 시행하였다. 반응된 산물은 1.5% Agarose gel에서 전기 영동하여 에틸렌브로마이드(Gibco, Gaithersburg, USA) 에 염색 후, 자외선 하에서 관찰하여 346bp의 증폭된 산물을 관찰하였다.
- 보카바이러스 확인을 위한 중합연쇄반응(PCR)은 검체로부터 추출된 DNA 5μL, primer 10 pmole HBoV F3, HBoV R2 각 1 μL, 10× buffer 5 μL, 2.5 mM dNTP 2 μL, SP Taq 1U를 첨가한 후 최종 50 μL가되도록 DW로 조정 중합연쇄반응(PCR)용액을 만들고, 94℃ 3분 반응 후 94℃ 30초, 54℃ 30초, 72℃ 30초를 35회 반복하고, 72℃ 7분간 중합연쇄반응(PCR)을 시행하였다.
- 전 처리한 상층액을 QIAamp Viral RNA Mini kit(QIAGEN, Hilden, Germany)를 사용하여 RNA를 분리하였다. 즉 바이러스 용해 완충액(buffer) 560 μL에 전처리한 검체 상층액 140 μL를 넣고 15초 진탕한 후에탄올 400 μL를 넣고 10분간 방치한 후 이를 column 에 넣어 8,000 rpm 4℃ 1분 원심 분리하였다.
- 흉부 질환의 진단명은 흉부 방사선, 임상 소견, 진찰 소견 등으로 정하였다(Table 1).
대상 데이터
- 2005년 4월부터 2006년 5월까지 광주기독병원에 입원한 호흡기 질환 환아 중 호흡기 증상이 심하거나(38℃ 이상의 열이 4일 이상 지속 혹은 1주일 이상의 기침 지속 시), 증상과 흉부 방사선 소견상 급속히 악화되는 환아 1,777명을 대상으로 검사를 실시하였다.
- 보카바이러스 진단을 위한 시발체는 HBoV F3 (5'-TGG CTA CAC GTC CTT TTG AAC C 3'), HBoV R2 (5'-GAC TTC GTT ATC TAG GGT TGC G-3')을 질병관리본부 인플루엔자 바이러스팀에서 제작하였다.
- 대부분 연구에서 대상 환아는 입원 환아였으나 Arnold 등10)은 외래 환아를 포함하여 상기도염이 나타난 것으로 생각된다. 본 조사에서도 대상 환아는 입원 환아로 폐렴(67.8%)이 모세기관지염(35.7%)보다 더 많이 발생하였고, 크룹은 발견되지 않았다.
데이터처리
- 보카바이러스에 대한 중합연쇄반응(PCR)을 시행했던 1,777명 환아와 보카바이러스가 검출된 84명의 환아들의 임상기록지를 후향적으로 검토하여 이들의 연령별, 성별, 검출시기별, 임상진단명에 따른 검출률과 양성 판정된 환아들의 임상증상 및 검사소견을 조사하였고, 통계 처리는 SPSS version 12를 사용하였으며, ANOVA, Student t-test, Chi-Square test를 통하여 P<0.05인 경우 유의한 것으로 하였다.
이론/모형
- 입원 중 환아의 비인두에서 소독된 8 프렌치 크기의 영양튜브를 점액 흡인기에 연결하여 흡입한 비인두 흡인물과 바이러스 수송배지(virus transport medium, Difco, USA)을 사용해 인두면봉법으로 검체를 채취하였다. 검체물은 가능한 빨리 광주광역시보건환경연구원으로 의뢰했으며 이것이 지연될 경우에는 검사 전까지 4℃에 냉장 보관하였다.
성능/효과
- 2005년 4월에서 6월까지 365명 중 29명(7.9%), 7월에서 10월까지 367명 중 6명(1.6%), 11월에서 12월까지 319명 중 24명(7.5%), 2006년 1월에서 3월까지 430명 중 10명(2.3%), 4월에서 5월까지 296명 중 15명(5.1%) 이 검출되었고, 2005년 4월에서 6월, 11월과 12월, 2006년 4-5월에 보카바이러스 양성 환아 84명 중 68명(81.0%)이 집중적으로 검출된것으로 보아 겨울과 봄에 호발한 것을 알 수 있었다(Fig. 2).
- 그러나 본 조사에서는 호흡 곤란을 보인 19명 중 4명에서 산소나 인공 호흡기 치료를 받았으며, 이 중 2명은 치료 후 증상이 호전되었으나, 나머지 2명은 사망하였다. 2명 모두 중복 감염은 없었으며, 한명은 내원 11개월 전(9세 2개월) 기저 질환으로 간질성 폐질환을 진단받은 10세 남아로 발열과 호흡 곤란 1일, 기침 2일을 주소로 중환자실로 입원해 3일간 산소 치료후 인공호흡기 치료 하였으나 증상 악화되며 급성 호흡부전증 및 다발성 기관 부전으로 입원 5일째 사망하였다. 다른 한 명은 17개월 남아로 기저 질환 없이 발열 1일, 기침 4일, 호흡 곤란 2일 주소로 내원해 입원 시부터 호흡 곤란이 심해 중환자실에서 인공호흡기 치료하였으나 폐렴 악화로 입원 3일째 사망하였다.
- 은 입원의 가장 큰 이유는 호흡 곤란과 저산소증이며, 보카바이러스 양성 환아 82명 중 47명이 평균 3일간 입원 치료를 받았고, 입원 환자 중 30명이 평균 3일간의 산소 치료를, 3명이 평균 3일간 집중 치료실 치료를 받았다고 하였고, 다른 연구에서도 사망한 예는 없었다. 그러나 본 조사에서는 호흡 곤란을 보인 19명 중 4명에서 산소나 인공 호흡기 치료를 받았으며, 이 중 2명은 치료 후 증상이 호전되었으나, 나머지 2명은 사망하였다. 2명 모두 중복 감염은 없었으며, 한명은 내원 11개월 전(9세 2개월) 기저 질환으로 간질성 폐질환을 진단받은 10세 남아로 발열과 호흡 곤란 1일, 기침 2일을 주소로 중환자실로 입원해 3일간 산소 치료후 인공호흡기 치료 하였으나 증상 악화되며 급성 호흡부전증 및 다발성 기관 부전으로 입원 5일째 사망하였다.
- 기저질환으로 천식 11명(13.1%), 선천성 심장병 5명(VSD 4명, ASD 1명) (5.9%), 간질성 폐질환 1명(1.1%)으로 총 17명(20.1%)이 있었으며, 기저질환이 있는 환자에서 기저 질환이 없는 환자에 비하여 호흡곤란의 발생 빈도가 높고(P=0.212), 재원기간이 길어지는 경향(P=0.117)을 보였으나 통계학적 의의는 없었다.
- Allander 등8)의 연구에서는 7명 중 6명에서 양측성 간질 침윤을 보였으며 Ma 등14)의 연구에서는 18명 중 4명은 전반적인 간질 침윤, 3명은 폐문주위 간질 침윤, 1명은 과도통기 소견을 보였다. 대체적으로 보카 바이러스 감염시 흉부 방사선 소견은 폐문주위 간질 침윤과 모세기관지염이나 다른 바이러스성 하기도염과 유사한 소견을 보였으며, 본 조사에서는 폐문 주위 간질 침윤, 과도통기, 폐 경화, 폐문 림프절 확대 순으로 관찰되었다.
- 보카바이러스 감염은 2세 이내에서 호발하고, 4-6월과 11-12월에 집중적으로 검출되며, 폐렴을 잘 일으키고, 위장관 및 피부 증상도 유발할 수 있는 것으로 나타났다. 또한, 보카바이러스 감염은 치료에 호전되지 않고 사망한 경우도 존재하였으며, 중복 감염 시 증상 악화는 없었다. 본 연구는 연구 기간이 짧았고, 광주광역시와 전라남도 지역에만 국한되었으며, 또한 입원 환아들만을 대상으로 한 한계점이 있으므로 보카바이러스에 대한 여러 연령대의 건강한 아이들을 포함한 다각적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
- 대부분의 연구에서 기저 질환으로 만성 폐질환이 가장 많은 것으로 나타났으며, 본 조사에서는 천식이 11명으로 가장 많았고, 선천성심장병, 간질성 폐질환 순이었다. 보카바이러스 감염과 기저 질환이 동반되었을 때의 예후에 대한 기존 보고는 없었으나 본 조사에서는 천식 등의 기저 질환 동반시 증상이 심해지는 경향을 보였으나 통계적으로 의미 있는 수치는 아니었다.
- 보카바이러스 감염은 2세 이내에서 호발하고, 4-6월과 11-12월에 집중적으로 검출되며, 폐렴을 잘 일으키고, 위장관 및 피부 증상도 유발할 수 있는 것으로 나타났다. 또한, 보카바이러스 감염은 치료에 호전되지 않고 사망한 경우도 존재하였으며, 중복 감염 시 증상 악화는 없었다.
- 보카바이러스가 검출된 84명의 환아 중 폐렴이 57명(67.8%)으로 가장 많았으며 그 다음으로 모세기관지염이 30명(35.7%), 급성 인두염 18명(21.4%), 기관지염 16명(19.0%)의 순으로 나타났고, 급성 인두염 환아 중 2명에서 열성 경련이 발생하였다. 기타 질환으로 급성 중이염 5명(5.
- 6%(10명)에서 RS 바이러스 8명, hMPV 1명, 아데노바이러스 1명의 동반 감염을 보고하였다. 보카바이러스는 이와 같이 다른 바이러스와의 중복감염이 많으며, 특히 RS 바이러스와의 중복감염이 가장 흔한 것으로 나타났고, 본 조사에서는 중복 감염률이 13.1%로 나타났다. 또한 hMPV는 RS 바이러스와 중복 감염시 증상이 심해지며 집중 치료실 치료가 필요한 경우도 증가하나23-25), 보카바이러스의 경우 중복 감염 시에 증상의 악화 등에 대한 보고는 없었으며, 본 연구에서도 다른 바이러스와의 중복 감염시 증상이 심해지는 경우는 없었다.
- 의 연구에서는 호흡 곤란이 17명 중 14명, 빈호흡 11명이었으며, 결막 충혈, 발진은 없었다. 본 조사에서는 나음, 천명 등의 청진음 이상이 대부분이었으며, 그 다음으로 흉부 함몰, 고막 발적, 심잡음, 결막충혈, 피부발진 순이었다.
- 3%의 사망률을 보였다(Table 3). 사망한 2명 중 1명은 간질 폐질환의 기저 질환이 있었던 환아이었고, 나머지 1명은 기저 질환 없이 폐렴으로 입원하여 인공호흡기 치료 중에 호전되지 않고 사망하였다. 사망한 환자에서 중복 감염은 관찰되지 않았다.
- 연령과 발열 기간, 기침 지속기간, 입원기간과의 연관을 살펴볼 때 열 및 기침의 지속기간과 연령과는 관련이 없었고, 나이가 어릴수록 입원 기간이 증가하는 경향을 보였으나 통계학적 의의는 없었다(P=0.179) (Table 2).
- 총 1,777명의 의뢰 환아 중 84명에서 보카바이러스가 검출되어 보카바이러스 양성률은 전체의 4.7%이었다. 이 중 다른 바이러스와의 중복 감염은 11명(13.
- 호흡곤란을 보인 19명 중 4명은 산소나 인공호흡기 치료를 받을 정도의 심한 양상을 보였으며, 이 중 2명은 치료 후 증상 호전되었으나, 나머지 2명은 사망하여 2.3%의 사망률을 보였다(Table 3). 사망한 2명 중 1명은 간질 폐질환의 기저 질환이 있었던 환아이었고, 나머지 1명은 기저 질환 없이 폐렴으로 입원하여 인공호흡기 치료 중에 호전되지 않고 사망하였다.
후속연구
- , 본 조사에서는 84명 중 증상이 지속되어 재검을 의뢰한 8명 중 5명의 환아에서 3-9일 후에 보카바이러스가 재검출되었다. 따라서 보카바이러스 감염 기간은 1주 이상임을 알 수 있으며 향후 이에 대한 더 많은 연구가 필요하다.
- 7%, 본 조사에서도 22%의 빈도를 보였다. 보카바이러스가 호흡기 증상과 더불어 위장관 및 발진, 결막염 등의 전신 감염을 일으킬 수 있어, 앞으로 전신 증상 및 기침의 양상에 대한 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다 본 조사에서는 기침이 가장 많았으며, 가래, 발열, 콧물 순이었고 결막염 3.5%, 피부 발진 2.3%의 빈도를 보였다.
- 또한, 보카바이러스 감염은 치료에 호전되지 않고 사망한 경우도 존재하였으며, 중복 감염 시 증상 악화는 없었다. 본 연구는 연구 기간이 짧았고, 광주광역시와 전라남도 지역에만 국한되었으며, 또한 입원 환아들만을 대상으로 한 한계점이 있으므로 보카바이러스에 대한 여러 연령대의 건강한 아이들을 포함한 다각적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
- 은 봄(3-5월)에 호발 한다고 하였다. 본 조사에서도 봄(4-6월)과 겨울(11-12월)에 호발하여, 보카바이러스는 주로 겨울과 봄에 호발하는 것으로 여겨지나, 각 지역별, 기후에 대한 차이는 앞으로도 연구가 더 필요할 것으로 생각된다.
- 다른 한 명은 17개월 남아로 기저 질환 없이 발열 1일, 기침 4일, 호흡 곤란 2일 주소로 내원해 입원 시부터 호흡 곤란이 심해 중환자실에서 인공호흡기 치료하였으나 폐렴 악화로 입원 3일째 사망하였다. 이 연구에서와같이 보카바이러스 양성이었던 환자에서 사망한 경우가 있었던 소견은 향후 보카바이러스 감염시 예후에 대해 연구가 더 필요하리라 생각된다.
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