[논문]관류 랫드 장관모델에서의 케토프로펜의 흡수기전 연구

김미정

doi:10.4333/kps.2007.37.2.073

관류 랫드 장관모델에서의 케토프로펜의 흡수기전 연구
Mechanistic Studies of Ketoprofen Absorption in Perfused Rat Intestine Model 원문보기

藥劑學會誌 = Journal of Korean pharmaceutical sciences, v.37 no.2, 2007년, pp.73 - 78

김미정 (식품의약품안전청)

Abstract ▼ AI-Helper

The aim of this study was to investigate the absorption properties of ketoprofen. The in-situ perfusion model has advantages over in vitro models as it provides intact lymphatic and blood flow circulation. The absorption properties of six different concentrations of ketoprofen have been studied in single pass in-situ rat intestine model. $^{14}C-PEG$ 4000 was used as a permeability marker and the possibility of an energy dependent contribution to ketoprofen absorption was also Investigated using the metabolic inhibitor sodium azide. Three different concentrations of sodium azide were studied to examine its effect on absorption of ketoprofen from the rat intestine. The findings of this study suggest that mono-carboxylic type drugs like ketoprofen cause permeability changes in the intestine. This is shown by the increase in absorption of $^{14}C-PEG$ 4000 as the concentration of ketoprofen is increased. However, the trend for ketoprofen permeability is to decrease over the concentration ranges. It was observed that the Papp values for ketoprofen with sodium azide shows a trend towards reduction in the amount of ketoprofen absorbed from the rat intestine which was significantly different (p<0.05) from that of ketoprofen with sodium azide 3.0mM. This indicates that sodium azide has an affect on the absorption of ketoprofen. The pH of all the perfusion solutions was altered to ${\sim}pH\;6.7$ by the buffering capacity of the small intestine secretions. The results suggest that mechanisms other than passive diffusion may be involved in ketoprofen absorption. This would be consistent with the involvement of active transport or saturatable processes in the absorption of drugs containing monocarboxylic acid group, as has been previously suggested from in vitro data.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

이에 본 연구에서는 좀 더 다양한 농도 (0.0625〜2.0m必mL) 의 케토 프로펜이 in situ 관류장관모델에서 소장 내 투과도에 미치는 영향과 약물 수송의 특성을 고찰하고자 하였다.

가설 설정

1이라고 간주하면 케토프로펜의 경우 거의 모두 이온화되기 때문이다.X) 비록 약산성 약물의 이온화 형 태가 tight junction을 통해 paracellular transport로 수송될 수 있다 하더라도 tight junction의 면적은 전체 면적의 약 0.01%에 불과하기 때문에 약산성 약물의 주된 경로는 아닐 것이다.^17.

제안 방법

NSAIDs는 소화관 내에서 국소 및 전신적 장애를 일으킨다고 잘 알려져 있으며 23끄) 랫드에서 소장의 투과도를 변화시킨다고 보고되어 왔다.& 25)고분자 물질인 PEG4000은 이물질이 정상 상태에서는 소장에 흡수되지 않으므로 소장의 water flux 연구에 주로 사용되어 왔고,¹⁶⁾만약 소장의 막 기능이 손상되면 이물질이 흡수되므로 본 연구에서는 permeability marker로서 다양한 농도의 케토프로펜이 PEG4000 흡수에 어떤 영향을 미치는가를 고찰하여 그 Papp를 계산하였다.
8이 되게 조정하였다. in vivo 모델로서 single pass intestinal perfusion model을 사용하여 투과도의 변화를 고찰하였는데 본 연구에서는 실험 개시 24시간 동안 절식한 웅성 Wistar 랫드(280〜320 g)를 케타민으로 복강 내 마취시킨 다음 Komiya등의 방법을 사용하였다”)약물의 관류는 2시간 동안 유지하며 관류된 용액을 일정한 시간 간격으로 모아 HPLC로 정량하여 소장 내 남아있는 약물 농도를 계산하였다. NSAIDs는 소화관 내에서 국소 및 전신적 장애를 일으킨다고 잘 알려져 있으며 23끄) 랫드에서 소장의 투과도를 변화시킨다고 보고되어 왔다.
관류용액은 2시간 동안 10분마다 수집하였고, 사용된 소장의 길이는 10 cm이었으며 permeability marker로서 l4C- PEG 4000용액 (0.50Ci/mL)을 사용하였다. 수집된 각 관류용액은 HPLC를 사용하여 Lalande 등 ²¹⁾의 방법으로 분석하였다.
inhibitors. 사용하여 케토프로펜0.125 mg/mL 및 1 mg/mL를 가지고 각각 투과도에 미치는 영향을 고찰하였다.
약물은 체내에서 pre-systemic 또는 intracellular metabolism 이 일어나는 경우가 있기 때문에 관류용액에서의 약물농도감소가 항상 혈관으로 의 약물의 유입을 나타내는 것이 아니므로 이러한 문제를 극복하기 위해 관류하는 동안의 plasma 약물농도를 측정하였다. 관류 2시간 및 관류 이후 2시간 동안 30분마다.
케토프로펜의 투과도 특성에 대한 연구를 바탕으로 동 약물의 흡수기전을 규명하기 위해 ATP 고갈을 일으켜 흡수에 필요에 에너지의 감소시킨다고 알려진 sodium azide를 metabolic inhibitors. 사용하여 케토프로펜0.

대상 데이터

케토프로펜은 Sigma-Aldrich(Poole, UK)로부터, 14C Poly ethylene glycol 4000은 Amersham Life Sciences (USA) 로부터 각각 구입하였고, 케타민은 Trinity College Dublin BioResources Unit에서 분양받아 사용하였다. 그 밖의 다른 시약은 analytical grade를 모두 사용하였다.

데이터처리

각 시간대에서 케토 프로펜의 Papp값은 각 관류용액의 steady-state에서의 평균값으로 하였고, 각 랫드에서의 Papp값으로부터 평균값과 표준편차를 계산하였다. 소장 내 비흡수된 water flux분획 (C₁/C_O)은 Perez 등 ³³⁾의 방법으로 보정하였다.
약물 농도 증가에 따른 Papp값의 차이는 Minitab^® Statis tical Software version 13.1을 사용하여 repeated measures ANOVA로 분석하였는데, 값이 0.05 이하인 경우 유의성이 있다고 정의하였다.

이론/모형

관류 2시간 및 관류 이후 2시간 동안 30분마다. 랫드의 꼬리정맥으로부터 혈액을 채취하여 Lalande 등²¹⁾의 방법으로 전처리 후 HPLC로 분석하였다.
각 시간대에서 케토 프로펜의 Papp값은 각 관류용액의 steady-state에서의 평균값으로 하였고, 각 랫드에서의 Papp값으로부터 평균값과 표준편차를 계산하였다. 소장 내 비흡수된 water flux분획 (C₁/C_O)은 Perez 등 ³³⁾의 방법으로 보정하였다.
50Ci/mL)을 사용하였다. 수집된 각 관류용액은 HPLC를 사용하여 Lalande 등 ²¹⁾의 방법으로 분석하였다. 또한 각 관류용액 중 14C-PEG 4000 측정은 Tri-Carb^® liquid scintillation counter (Packard^®)를 사용하였다.
사육되었다. 실험프로토콜은 아일랜드 Trinity College Dublin의 동물실험윤리위원회의 규정을 따라 수행되었으며, 유럽연합의 실험동물 보호법인 European Communities Council Directive 1986 을 준수하였다.

성능/효과

"케토프로펜의 약물 농도가 증가함에 따라 Papp 는 1.772x1("" cm/sec에서 0.965x10-4 cm/sec로 감소됨을보여주었고, (Figure 1) 0.0625 및 0.125 mg/tnL에서의 Papp 값은 다른 고농도에서의 값과 통계학적으로 유의적인 차이를 나타내었으나(n=8, p0.05) 고농도에서의 케토프로펜 포화를 확인할 수 있었다."
NSAIDs의 투과도 변화를 측정한 in vitro 모델로는 Legen & Kristie이 Ussing-chamber를 사용하여 낮은 농도 (<5mM) 에서의 케토 프로펜이 랫트 소장에서 플루오레스 신의 투과도를 증가시킨다는 제한된 보고가 있는데 이는 저농도에서 프로스타글라딘의 tight juction contol 감소로인한 것이라 추측되며14) 고농도에서의 투과도 변화는 ATP고갈에 의한 것으로 사료된다.⁹⁾ 관류랫트 장관 모델과 비교했을 때 고투 과도약물이 좀 더 낮은 투과도 값을 나타내는 것은 세포막 특성 유지에 필요한 비교반수층(unstirred water) 및 sink condition의 부재와 혈액 공급의 부족이라 볼 수 있다.^{05) 고농도에서의 케토프로펜 포화를 확인할 수 있었다. 관류 전후의 약물 농도의 차이는 없는 것으로 보아 실험을 진행하 는 동안 케토프로펜의 침전 생성은 없음을 알 수 있었다. Fagerholm 등끄)은 Papp값이 약 0.}

하지만 케토프로펜 농도의 증가가 케토 프로펜 자체의 소장 내 투과도를 증가시키지 않았는데 이것은 이미 보고된 바와 같이 고농도에서의 케토프로펜의 포화가 은폐됨에 따라 케토프로펜 약물수송에서 carrier mediated procedure가 과소평가되었음을 시사한다. 또한 케토프로펜의 투과도의 추세는 농도의 증가에 따라 감소되는 경향을 보이므로 유도된 투과도의 변화가 케토프로펜의 흡수를 증가시키지는 않음을 암시해 주었다. 모든 관류용액의 pH는 소장의 완충용적 (buffering capacity)에 의해일정한 값으로 조절되었다.

케토프로펜의 농도가 증가할수록 소장의 PEG4000의 투과도를 증가시킴을 보여주어 케토 프로펜의 농도 증가가 소장의 투과도 특성의 변화를 유도함을 제시하였다. 하지만 케토프로펜 농도의 증가가 케토 프로펜 자체의 소장 내 투과도를 증가시키지 않았는데 이것은 이미 보고된 바와 같이 고농도에서의 케토프로펜의 포화가 은폐됨에 따라 케토프로펜 약물수송에서 carrier mediated procedure가 과소평가되었음을 시사한다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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